張振國(guó)（山西省陽(yáng)高縣畜牧獸醫(yī)服務(wù)中心 038100）

雞大腸桿菌對(duì)氧氟沙星耐藥性試驗(yàn)

張振國(guó)（山西省陽(yáng)高縣畜牧獸醫(yī)服務(wù)中心 038100）

雞大腸桿菌病是養(yǎng)殖生產(chǎn)中對(duì)雞群危害最嚴(yán)重的疾病之一，由于其血清型復(fù)雜，耐藥菌株不斷增加，給防治工作帶來了巨大困難，本研究通過選用速效泰康作為預(yù)防和治療雞大腸桿菌病的藥物，試驗(yàn)通過對(duì)大腸桿菌標(biāo)準(zhǔn)菌O78的藥敏試驗(yàn)，來比較速效泰康與對(duì)照藥物甲磺酸左旋氧氟沙星的體外抑菌效果，并進(jìn)行動(dòng)物防治試驗(yàn)，對(duì)動(dòng)物相對(duì)增重率、保護(hù)率、死亡率進(jìn)行分析，來測(cè)試這種藥物在防治雞大腸桿菌病的效果，這對(duì)于進(jìn)一步預(yù)防雞大腸桿菌病具有重要意義。

雞；大腸桿菌；氧氟沙星

大腸桿菌病對(duì)養(yǎng)禽業(yè)危害嚴(yán)重，因而對(duì)該病的防治尤為重要。防治大腸桿菌病的藥物有許多，沈建忠等[1]已做關(guān)于氧氟沙星對(duì)雞大腸桿菌病的藥效試驗(yàn)，證明氧氟沙星對(duì)治療雞大腸桿菌病的效果顯著，但目前沒有報(bào)道速效泰康對(duì)大腸桿菌病的藥效試驗(yàn)。速效泰康該藥成分中的氧氟沙星系第三代喹諾酮類藥物，又名氟嗪酸，是在喹諾酮類分子結(jié)構(gòu)的基本骨架均為氮雙并環(huán)結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上，同時(shí)增加子并環(huán)，由日本第一制藥株式會(huì)社于1982年開發(fā)，屬?gòu)V譜抗菌藥物，對(duì)細(xì)菌、支原體及部分厭氧菌有效。本試驗(yàn)選用速效泰康作為預(yù)防和治療雞大腸桿菌病的藥物，試驗(yàn)通過對(duì)大腸桿菌標(biāo)準(zhǔn)菌O78的藥敏試驗(yàn)，來比較速效泰康與對(duì)照藥物甲磺酸左旋氧氟沙星的體外抑菌效果，并進(jìn)行動(dòng)物防治試驗(yàn)，來測(cè)試這種藥物對(duì)雞大腸桿菌病的防治效果，為大腸桿菌病的防治提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試藥品

速效泰康（4%氧氟沙星及氨基比林和安替比林）；甲磺酸左旋氧氟沙星。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物

14日齡雛雞60只，購(gòu)自山西陽(yáng)高某雞場(chǎng)，公母均有，未經(jīng)雞大腸桿菌疫苗免疫。試驗(yàn)前按照常規(guī)飼養(yǎng)，喂全價(jià)飼料，自由采食及飲水，并進(jìn)行臨床觀察。試驗(yàn)時(shí)隨機(jī)分為6組。

1.3 抗菌藥物的制備

取氧氟沙星溶液1ml溶于1000ml水中配成溶液備用，取甲磺酸左旋氧氟沙星粉末0.01g溶于400ml水中配成溶液備用。含藥濾紙片的制備：選擇新華1號(hào)定性濾紙，用打孔機(jī)打成直徑為6mm的小圓片，將打成的小圓片包成一紙包，121℃滅菌15min，置100℃干燥箱內(nèi)烘干備用。將滅菌濾紙片攤布于滅菌平皿中，每50張濾紙片加藥液0.5ml（藥敏片含氧氟沙星0.4μg、藥敏片含甲磺酸左旋氧氟沙星0.25μg），不時(shí)翻動(dòng)濾紙片，使濾紙片將藥液均勻吸凈，浸泡30min。然后取出含藥紙片置于一沙布袋中，置37℃溫箱中干燥。干燥后，立即裝入無(wú)菌的小瓶中加塞，至于干燥箱內(nèi)保存。

2 試驗(yàn)結(jié)果

2.1 體外抑菌試驗(yàn)

2.1.1 細(xì)菌計(jì)數(shù)

大腸桿菌接種于普通營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中，在37℃培養(yǎng)24h，菌懸液濃度為每毫升含大腸桿菌2.28×108個(gè)。

2.1.2 藥敏試驗(yàn)結(jié)果

試驗(yàn)結(jié)果表明，速效泰康（40g/L）和甲磺酸左旋氧氟沙星（24.5g/L）對(duì)雞源大腸桿菌O78平均抑菌直徑分別為28.9mm和27.6mm，但治療劑量的速效泰康的抑菌效果顯著（P＜0.05）高于甲磺酸左旋氧氟沙星，詳見表1。

2.2 藥物治療結(jié)果

表1 藥敏試驗(yàn)結(jié)果

表2 藥物對(duì)雛雞大腸桿菌病的療效

試驗(yàn)分組死亡率由低到高分別為：速效泰康預(yù)防組和速效泰康治療組（11.26%），甲磺酸左旋氧氟沙星治療組和免疫激動(dòng)劑組（21.35%），陽(yáng)性組（43.56%）；保護(hù)率由低到高分別為：陽(yáng)性組（52.26%），免疫激動(dòng)劑組、甲磺酸左旋氧氟沙星治療組（75.38%）和速效泰康預(yù)防組、速效泰康治療組（82.66%）；相對(duì)增重率由低到高分別為：速效泰康治療組（52.97%)，免疫激動(dòng)劑組（67.80%），速效泰康預(yù)防組（70.11%），甲磺酸左旋氧氟沙星治療組（84.29%）和陽(yáng)性對(duì)照組（114.87%）。

3 討論

（1）藥敏試驗(yàn)表明，治療劑量的氧氟沙星對(duì)雞大腸桿菌為高度敏感。氧氟沙星與甲磺酸左旋氧氟沙星藥理作用均為通過抑制細(xì)菌原核細(xì)胞DNA旋轉(zhuǎn)酶和DNA復(fù)制而發(fā)揮作用。治療劑量的氧氟沙星的抑菌效果顯著高于甲磺酸左旋氧氟沙星。分析原因可能為試驗(yàn)中所用的左旋氧氟沙星的濃度遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于氧氟沙星，所以抑菌效果沒有治療量的氧氟沙星好。

（2）由藥效試驗(yàn)結(jié)果可見速效泰康預(yù)防組、速效泰康治療組、甲磺酸左旋氧氟沙星治療組和免疫激動(dòng)劑組在死亡率和保護(hù)率方面都好于陽(yáng)性對(duì)照組。這說明速效泰康預(yù)防組、速效泰康治療組、甲磺酸左旋氧氟沙星治療組和免疫激動(dòng)劑組對(duì)雞大腸桿菌病都有一定的療效。這是由于速效泰康預(yù)防組和速效泰康組均使用速效泰康。氧氟沙星為抗菌藥具有抗菌譜廣、抗菌活性強(qiáng)的特點(diǎn)，對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌、陰性菌群均有較強(qiáng)的抗菌作用。甲磺酸左旋氧氟沙星與氧氟沙星均為第三代喹諾酮類藥物，殺菌機(jī)理同氧氟沙星，但甲磺酸左旋氧氟沙星的抗菌活性比氧氟沙星強(qiáng)2～4倍。免疫激動(dòng)劑組使用免疫激動(dòng)劑作為治療藥物，添加于雞飼料中用于預(yù)防和提高免疫力，作用機(jī)理為此免疫激動(dòng)劑在體內(nèi)可以激活由受體構(gòu)成的動(dòng)物生物防御系統(tǒng)，使機(jī)體產(chǎn)生一系列的免疫因子如干擾素、白介素、腫瘤壞死因子等，由此激發(fā)和調(diào)動(dòng)免疫防御系統(tǒng)以抵御外來病原體的侵襲。