余海芬,陶軍,殷方芝,黃忠,戰(zhàn)濤
(上海市嘉定區(qū)農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣服務(wù)中心,上海 嘉定 201800)
飼料霉菌毒素的種類及其檢測(cè)方法研究
余海芬,陶軍,殷方芝,黃忠,戰(zhàn)濤
(上海市嘉定區(qū)農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣服務(wù)中心,上海 嘉定 201800)
畜禽飼料受霉菌毒素污染在我國(guó)十分普遍,造成的危害巨大。加強(qiáng)飼料中霉菌毒素的監(jiān)測(cè)關(guān)系到整個(gè)飼料產(chǎn)業(yè)及養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展。本文介紹了近年來監(jiān)測(cè)到的畜禽飼料中主要霉菌毒素的種類,并就其檢測(cè)方法進(jìn)行了綜述。關(guān)鍵詞:霉菌毒素;危害;檢測(cè)方法
霉菌毒素幾乎存在于所有的飼料原料和人類食品原料中,其造成的危害是一個(gè)全球性的問題。飼料中的霉菌毒素能直接引起動(dòng)物病理或生理變化,還常常容易與其他疾病產(chǎn)生混淆,被養(yǎng)殖者忽略,因此給畜禽養(yǎng)殖業(yè)及飼料工業(yè)的發(fā)展帶來嚴(yán)重危害。據(jù)估計(jì),全球每年有25%的谷類作物會(huì)受到霉菌毒素的污染,造成的經(jīng)濟(jì)損失達(dá)到幾百億美元。
最近幾年,隨著原料價(jià)格的不斷攀升,糧食副產(chǎn)物被大量使用,使得飼料中霉菌毒素含量成倍增長(zhǎng)。人們對(duì)霉菌毒素所帶來的危害也越來越重視,針對(duì)霉菌毒素的檢測(cè)技術(shù)也在逐步發(fā)展。本文綜述了幾種飼料中常見霉菌毒素的種類及其危害,并就各種新舊檢測(cè)方法的發(fā)展進(jìn)行了討論。
1.1 飼料中常見霉菌毒素的種類
在飼料原料中殘留的霉菌毒素大約有30多種,其中最為常見的有黃曲霉毒素、玉米赤霉烯酮、嘔吐毒素、赭曲霉毒素、伏馬毒素、T-2毒素等。
王金勇等在2012年、2013年連續(xù)對(duì)中國(guó)飼料和原料霉菌毒素進(jìn)行監(jiān)測(cè),共檢測(cè)來自全國(guó)各地的包括豬料、禽料、奶牛精料、水產(chǎn)料、餅粕、豆粕等飼料樣品1500余份。檢測(cè)結(jié)果顯示:豬料、禽料中最常見的霉菌毒素為嘔吐毒素、伏馬毒素和玉米赤霉烯酮,陽(yáng)性檢出率超過50%,其中嘔吐毒素和伏馬毒素甚至超過80%~90%;黃曲霉毒素和赭曲霉毒素在豬禽料中陽(yáng)性檢出率較低。奶牛精料中同樣嘔吐毒素、伏馬毒素和玉米赤霉烯酮的出現(xiàn)頻率較高。不同水產(chǎn)品種對(duì)霉菌毒素耐受差異很大,因此幾種毒素都應(yīng)該加強(qiáng)防控。另外,受黃曲霉毒素污染的原料主要出現(xiàn)在棉籽、棉粕、花生粕,玉米及玉米副產(chǎn)品飼料中。
1.2 幾種霉菌毒素對(duì)動(dòng)物的危害
霉菌毒素會(huì)對(duì)動(dòng)物機(jī)體產(chǎn)生很強(qiáng)的毒副作用,即使在飼料原料中含量很低,也會(huì)引起動(dòng)物出現(xiàn)生長(zhǎng)受阻、免疫機(jī)能下降、繁殖性能降低等現(xiàn)象。飼料原料中往往多種霉菌毒素同時(shí)存在,不同霉菌毒素間還會(huì)產(chǎn)生協(xié)同作用,對(duì)動(dòng)物的危害將加劇。表1列舉了幾種飼料中常見霉菌毒素對(duì)動(dòng)物的危害。
2.1 酶聯(lián)免疫法
該方法特異性強(qiáng)、靈敏度高,操作步驟簡(jiǎn)單、檢測(cè)時(shí)間短,無需貴重儀器設(shè)備,對(duì)樣品的純度要求不高,適用于大批量樣品集中檢測(cè)。且在操作過程中安全性高、污染少,毒素標(biāo)準(zhǔn)品的濃度可以很低,減少了對(duì)檢測(cè)人員和環(huán)境的潛在危害和污染。其中黃曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、赭曲霉毒素A、嘔吐毒素都已建立了單克隆抗體酶聯(lián)免疫檢測(cè)的國(guó)標(biāo)方法,可用于快速篩選。幾種常見霉菌毒素也有相應(yīng)的商品化試劑盒銷售,技術(shù)比較成熟。
2.2 薄層色譜法
薄層色譜法(TLC)是我國(guó)測(cè)定飼料中霉菌毒素的仲裁方法之一。該方法設(shè)備簡(jiǎn)單,易于普及,但樣品前處理比較繁瑣,分離效率低、靈敏度稍差,目前已很少使用。然而,在發(fā)現(xiàn)確證新毒素、快速監(jiān)測(cè)方法建立,毒素分析方法研究等方面,尤其是當(dāng)實(shí)驗(yàn)條件有限時(shí),薄層色譜還是有一定優(yōu)越性的。
2.3 色譜法
液相色譜法(HPLC)是近幾年發(fā)展起來的檢測(cè)霉菌毒素方法,主要是用熒光檢測(cè)器檢測(cè),該法快速準(zhǔn)確,純化效果好,其方法適用性、分離效率和靈敏度方面是其他方法無法替代的。氣相色譜法(GC)從20世紀(jì)70年代開始用于霉菌毒素檢測(cè),氣相色譜法近年來也被應(yīng)用到高風(fēng)險(xiǎn)的飼料霉變污染的檢測(cè)中,但是它不及液相色譜法廉價(jià)與快速。
2.4 質(zhì)譜法
質(zhì)譜法是霉菌毒素檢測(cè)領(lǐng)域最準(zhǔn)確可靠的檢測(cè)方法,如液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法,但此法檢測(cè)速度較慢,適用于定性檢測(cè)與實(shí)驗(yàn)室研究。隨著科技的發(fā)展,后來又出現(xiàn)了一些基于質(zhì)譜技術(shù)的快速檢測(cè)方法,如基質(zhì)輔助激光解析電離-質(zhì)譜聯(lián)用法、離子遷移光譜法、常規(guī)環(huán)境電離質(zhì)譜法等。隨著讀取定量質(zhì)的手持設(shè)備已經(jīng)商業(yè)化生產(chǎn),這種成本低廉,可進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)操作的檢測(cè)方法應(yīng)用前景可觀,飼料廠可用其對(duì)原料中霉菌毒素含量進(jìn)行常規(guī)監(jiān)測(cè)。
大量研究和生產(chǎn)實(shí)踐證明,霉菌毒素可以使畜禽等產(chǎn)生多種難以判斷的綜合病癥,并能通過動(dòng)物肉、蛋、奶、內(nèi)臟進(jìn)入人類的食品鏈中,危害人類健康。中國(guó)尤其是南方,由于自然條件等原因,霉菌毒素污染導(dǎo)致的問題相當(dāng)嚴(yán)重。因此,重視霉菌毒素檢測(cè)是非常迫切的問題,越早進(jìn)行霉菌毒素檢測(cè)就越能將危害降到最低。飼料作為霉菌毒素產(chǎn)生的源頭更應(yīng)該及時(shí)通過檢測(cè)發(fā)現(xiàn)問題,盡早采取合理措施控制毒素生長(zhǎng),以免給養(yǎng)殖業(yè)帶來更大的危害。
表1 飼料中霉菌毒素對(duì)動(dòng)物的危害
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10.3969/J.ISSN.1671-6027.2015.08.018