易興友李中偉劉曉燕呂 瑤趙 明張 芳周 強(qiáng)蔣光輝曹 池賀 勇

（1.開縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，重慶 405499；2.開縣動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所，重慶 405499）

商品肉雞新城疫免疫技術(shù)研究

易興友1李中偉1劉曉燕1呂 瑤1趙 明1張 芳1周 強(qiáng)1蔣光輝2曹 池1賀 勇2

（1.開縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，重慶 405499；2.開縣動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所，重慶 405499）

通過對比不同新城疫（ND）疫苗免疫肉雞后HI抗體的消長規(guī)律，確定了雞新城疫、傳染性支氣管炎二聯(lián)活疫苗（ND-傳支二聯(lián)活疫苗）+雞新城疫病毒、傳染性支氣管炎病毒二聯(lián)滅活疫苗（ND-傳支二聯(lián)滅活疫苗）聯(lián)用是商品肉雞首選疫苗組合，并制定了ND的最佳免疫程序。以75日齡左右出欄的肉雞為研究對象得出：7～9日齡首免（ND-傳支二聯(lián)活疫苗+ND-傳支二聯(lián)滅活疫苗），45日齡二免（ND-傳支二聯(lián)活疫苗）。經(jīng)田間試驗(yàn)和小區(qū)應(yīng)用試驗(yàn)證實(shí)，將該ND免疫程序加入常規(guī)免疫程序中，其免疫效果基本不受其它疫苗免疫等因素干擾；在不同養(yǎng)雞場實(shí)施該免疫程序，其免疫效果差異不顯著，因此建議大面積推廣使用。

肉雞；新城疫；疫苗；免疫程序

雞新城疫（Neweastle disease，ND）是由新城疫病毒（Neweastle disease virus，NDV）引起雞的一種急性、烈性、高度接觸性傳染病，該病在世界各國均有發(fā)生，對養(yǎng)雞業(yè)危害極大，因此被世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE）定為A類傳染病，我國也將其列為一類傳染病。目前，國內(nèi)外對ND的防控主要采取免疫預(yù)防和發(fā)病后的撲殺銷毀，其中預(yù)防接種疫苗是防控ND的重要措施。我縣現(xiàn)用于ND防控疫苗種類較多，如常用的有弱毒苗、滅活苗、單苗和聯(lián)苗等，而各廠家推薦的ND免疫程序也不相同，其免疫效果參差不齊，無法確定統(tǒng)一的免疫程序，導(dǎo)致ND發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)極大，將直接影響?zhàn)B雞業(yè)的經(jīng)濟(jì)效益。因此，加強(qiáng)雞ND免疫技術(shù)研究，制定科學(xué)有效的免疫程序，對確保養(yǎng)雞業(yè)的健康發(fā)展具有十分重要的意義。

本研究首先通過測定肉雛雞ND的母源抗體，確定最佳首免時(shí)間；通過不同ND疫苗免疫效果試驗(yàn)，確定適合我縣的最佳疫苗種類；通過ND疫苗免疫后的抗體消長規(guī)律，制定一套科學(xué)的最佳免疫程序；再通過田間試驗(yàn)、小區(qū)試驗(yàn)，為大面積推廣提供科學(xué)依據(jù)。

1 母源抗體測定及不同種類新城疫疫苗免疫抗體消長規(guī)律研究

1.1 試驗(yàn)材料

選擇開縣鐵橋鎮(zhèn)海海生態(tài)養(yǎng)殖場1日齡肉雛雞；雞新城疫滅活疫苗，雞新城疫病毒、傳染性支氣管炎病毒二聯(lián)滅活疫苗，均由普萊柯生物工程股份有限公司生產(chǎn)；雞新城疫活疫苗，雞新城疫、傳染性支氣管炎二聯(lián)活疫苗，禽流感、新城疫重組二聯(lián)活疫苗，雞新城疫、傳染性支氣管炎二聯(lián)活疫苗，均由哈爾濱維科生物技術(shù)開發(fā)公司生產(chǎn)；雞傳染性支氣管炎活疫苗，乾元潔生物股份有限公司生產(chǎn)；雞傳染性法氏囊病活疫苗，齊魯動(dòng)物保健品有限公司生產(chǎn)；重組禽流感病毒滅活疫苗，遼寧益康生物股份有限公司生產(chǎn)；雞痘活疫苗，楊凌綠方生物工程有限公司生產(chǎn)；新城疫血凝與血凝抑制抗原，青島易邦生物科技有限公司生產(chǎn)；新城疫陽性血清，哈爾濱動(dòng)物生物制品國家工程研究中心有限公司生產(chǎn)。

1.2 試驗(yàn)方法

從開縣鐵橋鎮(zhèn)海海生態(tài)養(yǎng)殖場新購入的1日齡肉雛雞中，隨機(jī)挑選1200只健康狀況良好的雛雞，隨機(jī)分成A、B、C、D、E、F六個(gè)組，A組為ND滅活疫苗+ ND弱毒疫苗（La Sota株）免疫組，B組為ND弱毒疫苗（La Sota）免疫組，C組為ND-傳支二聯(lián)活疫苗（La Sota株+H120株）組，D組為ND-傳支二聯(lián)活疫苗（La Sota株+H120株）+ ND-傳支二聯(lián)滅活疫苗組，E組為禽流感、新城疫重組二聯(lián)活疫苗（Rlh5-6株）組，F(xiàn)組為ND免疫空白對照組。

該六個(gè)組肉雛雞在同一條件下飼養(yǎng)，分別于3日齡、5日齡、7日齡時(shí)隨機(jī)抽取20只雛雞血清檢測ND母源抗體，首免后每間隔7d采血檢測ND抗體水平。根據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)《新城疫診斷技術(shù)》（GB/ Tl6550-2008）進(jìn)行判定，當(dāng)HI抗體水平≤5log2時(shí)，判定為免疫效果差；當(dāng)HI抗體水平＞5log2時(shí)，判定為免疫效果良好。當(dāng)HI抗體水平≤5log2時(shí)進(jìn)行加強(qiáng)免疫。

HI抗體平均效價(jià)（log2）=Σxn／Σn（x表示HI抗體效價(jià)，n表示該效價(jià)的血清份數(shù)）。

1.3 結(jié)果與分析

通過對A、B、C、D、E、F六個(gè)組試驗(yàn)雞新城疫HI抗體水平的檢測，其結(jié)果如下：

A組：9日齡首免ND滅活疫苗0.3ml（皮下注射），并用ND弱毒疫苗1.5羽份點(diǎn)眼，免疫后28d（37日齡）抗體滴度為7.2log2，達(dá)到峰值；免疫后35d（44日齡）抗體滴度下降至5.4log2，免疫保護(hù)維持三周，從整體看抗體滴度整齊，離散度不大。45日齡二免ND活疫苗（兩羽份飲水），58日齡時(shí)免疫抗體滴度達(dá)到8.8log2，抗體較整齊，離散度不大。

B組：9日齡首免ND弱毒疫苗（1.5羽份點(diǎn)眼），免疫后14d（23日齡）抗體滴度為5.8 log2，達(dá)到峰值；免疫后35d（44日齡）抗體滴度下降至0.8log2，免疫保護(hù)維持不足一周，從整體看抗體滴度不整齊，離散度較大。45日齡二免ND弱毒疫苗（兩羽份飲水），58日齡免疫抗體滴度達(dá)到7.1log2，抗體不整齊，離散度偏大。

C組：9日齡首免ND-傳支二聯(lián)活疫苗（1.5羽份點(diǎn)眼），免疫后14d（23日齡）抗體滴度為4.2 log2、免疫后28d（37日齡）抗體滴度為4.8log2，皆不具有保護(hù)力；免疫后35d（44日齡）抗體滴度下降至2.1log2，從整體看抗體滴度不整齊，離散度大。45日齡二免ND-傳支二聯(lián)活疫苗（兩羽份飲水），58日齡抗體滴度達(dá)到7.1log2，抗體滴度不整齊，離散度大。

D組：9日齡首免ND-傳支二聯(lián)活疫苗（1.5羽份點(diǎn)眼），并肌注ND-傳支二聯(lián)滅活疫苗0.3ml，免疫后21d（30日齡）抗體滴度為7.4log2，達(dá)到峰值；免疫后35d（44日齡）抗體滴度下降至5.6log2，從整體看抗體滴度整齊，離散度不大。45日齡二免ND-傳支二聯(lián)活疫苗（兩羽份飲水），58日齡免疫抗體滴度達(dá)到8.0log2，抗體較整齊，離散度不大。

E組：9日齡首免禽流感、新城疫重組二聯(lián)活疫苗（1.5羽份點(diǎn)眼），免疫后14d（23日齡）抗體滴度為5.2 log2，具有免疫保護(hù)力；免疫后28d（37日齡）抗體滴度為5.3log2，達(dá)到峰值；免疫后35天（44日齡）抗體滴度下降至2.0log2，從整體看抗體滴度不整齊，離散度大。45日齡二免該疫苗（兩羽份飲水），58日齡抗體滴度為5.6log2，抗體不整齊，離散度較大。

F組：16日齡監(jiān)測時(shí)，母源抗體滴度為0.8log2，到30日齡時(shí)僅為0.4log2，以后不再監(jiān)測。

從圖1可以看出：（1）母源抗體水平較高，到7日齡時(shí)還維持有6.0 log2左右，到9日齡時(shí)才用不同種ND疫苗對A、B、C、D、E組進(jìn)行首免。（2）A、D組免疫14天后就產(chǎn)生ND保護(hù)抗體，且A、D組分別于免疫后28天、21天達(dá)到峰值，該兩組產(chǎn)生的抗體水平最高，有效保護(hù)維持時(shí)間達(dá)到三周以上。B、E組免疫后14天產(chǎn)生保護(hù)抗體，但抗體滴度下降速度較快，有效保護(hù)維持時(shí)間僅一周。C組未達(dá)到有效保護(hù)抗體，且抗體滴度下降速度較快。到45日齡時(shí)，A、B、C、D、E組各采用相應(yīng)組的弱毒苗（或活疫苗）兩羽份量飲水補(bǔ)免，A、D組產(chǎn)生ND免疫抗體優(yōu)于B、C、E組，整體看A、D組抗體滴度整齊度比B、C、E組好，離散度較B、C、E組小。

1.4 結(jié)論

從試驗(yàn)結(jié)果可以看出，A、D組能誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生較好的免疫應(yīng)答，免疫后ND抗體滴度顯著提高，上升速度快，維持時(shí)間長（三周以上），雞群整體抗體水平的整齊度也有較大改善。因此，確定A、D組為最佳使用疫苗組合，且D組更優(yōu)于A組，因后者免疫ND同時(shí)兼顧到傳染性支氣管炎病毒免疫，且對ND免疫效果無明顯影響。根據(jù)本試驗(yàn)?zāi)冈纯贵w和免疫抗體消長規(guī)律綜合分析，確定了ND最佳免疫程序（7-9日齡首免ND-傳支二聯(lián)活疫苗+ ND-傳支二聯(lián)滅活疫苗→45日齡二免ND-傳支二聯(lián)活疫苗）。

2 ND免疫程序田間試驗(yàn)

根據(jù)確定的最佳ND免疫程序，在開縣鐵橋鎮(zhèn)海海生態(tài)養(yǎng)殖場進(jìn)行田間試驗(yàn)。其中免疫試驗(yàn)組只接種ND-傳支二聯(lián)苗；田間試驗(yàn)組除接種ND-傳支二聯(lián)苗外，還進(jìn)行其他常規(guī)疫苗免疫。田間試驗(yàn)的免疫程序?yàn)椋?日齡，頸部皮下注射馬立克1羽份；3日齡，雞傳染性支氣管炎活疫苗1羽份滴鼻或點(diǎn)眼；7日齡，1.5羽份新支H120點(diǎn)眼，皮下注射新支二聯(lián)滅活苗0.3ml；12日齡，皮下注射禽流感病毒H5N1滅活苗0.3ml；14日齡，法氏囊活疫苗兩羽份滴口；24日齡，兩羽份法氏囊活疫苗飲水；36日齡，胸部肌肉注射禽流感病毒H5N1滅活苗0.5ml，刺種雞痘1羽份；45日齡，新支H52兩羽份飲水。首先于6日齡測定母源抗體，于7日齡首免后每隔7d，每組隨機(jī)挑選20只試驗(yàn)雞采血檢測HI抗體水平。

2.1 結(jié)果

從兩組試驗(yàn)雞新城疫HI抗體檢測結(jié)果可以看出，于7日齡、45日齡免疫后均能快速產(chǎn)生高水平的有效保護(hù)抗體，整體看抗體較整齊，離散度不大；45日齡二免后免疫抗體到56日齡達(dá)到峰值。63日齡之前按該免疫程序，免疫試驗(yàn)組與田間試驗(yàn)組ND抗體消長規(guī)律相似（P＜0.05）。說明免疫試驗(yàn)組與田間試驗(yàn)組具有相近的免疫效果。

2.2 結(jié)論

該免疫程序加入常規(guī)免疫程序中，其免疫效果不受其他疫苗影響，免疫保護(hù)力強(qiáng)，為大面積推廣奠定了基礎(chǔ)。

3 ND免疫程序小區(qū)應(yīng)用試驗(yàn)

3.1 試驗(yàn)方法

分別在開縣特驅(qū)家禽養(yǎng)殖有限公司、開縣鐵橋鎮(zhèn)海海生態(tài)養(yǎng)殖場、臨江鎮(zhèn)深水河李某養(yǎng)雞場、再剛養(yǎng)殖場、趙桑養(yǎng)殖場等5個(gè)養(yǎng)雞場進(jìn)行最佳ND免疫程序的小區(qū)域應(yīng)用試驗(yàn)。每個(gè)場各選取2000只健康肉雞苗，均在各自的飼養(yǎng)管理?xiàng)l件下飼養(yǎng)，并都按田間試驗(yàn)的免疫程序進(jìn)行免疫。首免后14d，每個(gè)場隨機(jī)抽取20只試驗(yàn)雞血清，檢測HI抗體水平，以后每隔7d采血1次，共采血7次。

3.2 試驗(yàn)結(jié)果

從5個(gè)養(yǎng)雞場試驗(yàn)雞新城疫HI抗體的檢測結(jié)果可以看出，在試驗(yàn)期內(nèi)免疫試驗(yàn)雞的抗體水平均達(dá)5log2以上，均可獲得較好的免疫力，該5個(gè)雞場都按田間試驗(yàn)的免疫程序進(jìn)行免疫，新城疫HI抗體消長規(guī)律基本一致（P＜0.05）。

3.3 結(jié)論

本研究通過對比ND疫苗免疫肉雞后HI抗體的消長規(guī)律，確立了ND-傳支二聯(lián)活疫苗+ND-傳支二聯(lián)滅活苗聯(lián)用是商品肉雞首選的疫苗組合，并制定了ND最佳免疫程序。對75日齡左右出欄的肉雞：7～9日齡首免[建議選用雞新城疫（La Sota株）、傳染性支氣管炎病毒（M41株）二聯(lián)滅活疫苗（頸部皮下注射0.3ml）+雞新城疫、傳染性支氣管炎二聯(lián)活疫苗（La Sota株+H120株）（1.5羽份量點(diǎn)眼）]，45日齡二免[建議選用雞新城疫、傳染性支氣管炎二聯(lián)活疫苗（La Sota株+H52株）（兩羽份量飲水）]。經(jīng)田間試驗(yàn)和小區(qū)應(yīng)用試驗(yàn)證實(shí)，該ND免疫程序加入常規(guī)免疫程序中，其免疫效果基本不受其他疫苗免疫等因素干擾；在不同肉雞養(yǎng)殖場使用該免疫程序，其免疫效果差異不顯著。因此，建議在我縣大面積推廣應(yīng)用。

[1] 甄志剛，張漢成，丁壯.商品蛋雞新城疫免疫技術(shù)研究[J].廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010，41（11）：1229-1232.

[2] 熊東艷，秦玉成，葛忠源，等.平谷區(qū)蛋雞禽流感、新城疫免疫效果監(jiān)測及其免疫程序探索[J].家禽科學(xué)，2013，（12）：38-42.

易興友（1965—），男，高級獸醫(yī)師，重慶市開縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心工作，主要研究方向?yàn)榧仪萁】叼B(yǎng)殖技術(shù)研究及應(yīng)用。