楊雪海， 趙 娜， 魏金濤， 張 巍， 黃少文， 郭萬正， 嚴(yán)念東， 陳 芳

（1.湖北省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所，湖北武漢 430064；2.動物胚胎工程及分子育種湖北省重點(diǎn)實驗室，湖北武漢 430064）

幼齡動物某些器官尚未發(fā)育完善，免疫力低下，極易受病原微生物的影響。在動物的生長過程中，控制抗生素作為生長促劑的使用，成為目前動物營養(yǎng)領(lǐng)域研究的重點(diǎn)和熱點(diǎn)，如何從源頭上減少抗生素的使用，也是目前研究的重中之重。本試驗將酶解、發(fā)酵等生物技術(shù)用于改良幼齡動物常用的植物性蛋白原料——豆粕，通過在飼料中添加豆粕液態(tài)酶解發(fā)酵物，以期在幼齡動物上達(dá)到替代抗生素作為生長促進(jìn)劑的目的，實現(xiàn)畜禽產(chǎn)品的安全化生產(chǎn)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料 豆粕，購于嘉吉糧油南通有限公司，粉碎過1.5 mm篩片，取篩下物備用；中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶，均購于南寧龐博生物工程有限公司；木聚糖酶、β-葡聚糖酶、α-半乳糖苷酶、果膠酶，均購于寧夏夏盛實業(yè)有限公司；植物乳桿菌及干酪乳桿菌為本實驗室分離、鑒定、保存菌株，使用時進(jìn)行菌株的活化和增殖。固始雞（優(yōu)質(zhì)系）購于河南三高農(nóng)牧股份有限公司。

1.2 基礎(chǔ)日糧 基礎(chǔ)日糧參照美國NRC（1998）0～21日齡白羽肉仔雞營養(yǎng)需要量進(jìn)行配制，日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 日糧組成及營養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.3 試驗設(shè)計 本試驗采用單因素完全隨機(jī)分組試驗設(shè)計，選用1日齡固始優(yōu)質(zhì)系肉蛋兼用型雞180只，分為3組，每組4個重復(fù)，每個重復(fù)15只。各重復(fù)初始體重?zé)o顯著差異（P﹥0.05）。對照1組，飼喂基礎(chǔ)日糧；對照2組為抗生素對照組，飼喂基礎(chǔ)日糧+45 mg/kg金霉素；試驗組在基礎(chǔ)日糧中用10%的豆粕酶解發(fā)酵物 （以干物料計）替代部分普通豆粕。整個試驗期為28 d。

1.4 飼養(yǎng)管理 試驗動物于1～3 d全部飲用電解多維配制的溫開水，3 d后改為自來水自由飲水。1日齡保持舍內(nèi)溫度在35℃，以后每兩天降低1℃，最后保持舍內(nèi)溫度在20～25℃。光照按照1～3日齡24 h光照，4～7日齡每天光照 22 h，8～14日齡每天光照 20 h，15～28日齡每天光照16 h。免疫程序按常規(guī)免疫進(jìn)行，采用滴鼻法在第7天和第14天分別免疫新城疫和法氏囊疫苗。

1.5 豆粕液態(tài)酶解發(fā)酵物的制作方法 稱取一定質(zhì)量粉碎過1.5 mm篩的豆粕，按固液比1∶3.5加入35～40℃的生活用水，按質(zhì)量份數(shù)加入酶活為40萬IU/g的中性蛋白酶0.1%，酶活為120萬IU/g的菠蘿蛋白酶0.04%，酶活為200萬IU/g的木瓜蛋白酶0.02%，酶活為5500 U/g的木聚糖酶0.02%，酶活為1萬U/g的β-葡聚糖酶0.02%，酶活為200 U/g的α-半乳糖苷酶0.01%，酶活為3萬U/g的果膠酶0.02%，并按每克豆粕添加植物乳桿菌 1×106cfu，干酪乳桿菌 1×106cfu，酵母 1×106cfu的活性干粉菌劑，攪拌均勻，置于發(fā)酵罐中酶解發(fā)酵48 h，每隔4 h攪拌一次，每次攪拌5 min，即得豆粕液態(tài)酶解發(fā)酵物。

1.6 測定指標(biāo)及方法

1.6.1 生長性能測定 于試驗第28天早晨空腹稱重。前一天20∶00禁食，自由飲水，于次日08：00以個體為單位稱重。試驗期間記錄每天投料量，于試驗結(jié)束統(tǒng)計耗料量，計算整個試驗期間的平均日采食量（ADFI）、平均日增重（ADG）和料重比（F/G）。

體重均勻度以各重復(fù)的變異系數(shù)（CV）反映。于試驗第28天清晨，以個體為單位稱重，以個體重計算各重復(fù)的變異系數(shù)。

變異系數(shù)/%=標(biāo)準(zhǔn)差/平均值×100。

1.6.2 血清生理生化指標(biāo)的測定 于試驗第28天清晨，每個重復(fù)各抽取兩只與平均體重相近的雞進(jìn)行翼下靜脈采血，每只雞采血5 mL置于離心管中，靜置0.5 h待其析出血清后，3000 r/min離心10 min，取上清液待測。采用日立7180全自動生化分析儀測定以下生化指標(biāo)：總蛋白、白蛋白、球蛋白、甘油三脂、總膽固醇、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白含量及堿性磷酸酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶活力。

1.7 統(tǒng)計分析 原始試驗數(shù)據(jù)使用Excel 2007進(jìn)行預(yù)處理，用SPAW 18.0統(tǒng)計軟件One-way ANOVA程序?qū)Y(jié)果進(jìn)行單因素方差分析，采用Duncan’s法進(jìn)行多重比較，P＜0.05為差異顯著。結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 豆粕液態(tài)酶解發(fā)酵物對固始雞 （優(yōu)質(zhì)系）育雛期生長性能的影響 由表2可見，在平均日采食量、料肉比方面，試驗組與對照1組、對照2組無顯著差異（P＞0.05），在平均日增重方面，試驗組較對照2組提高6.31%（P＜0.05），但與對照1組差異不顯著（P＞0.05）。豆粕液態(tài)酶解發(fā)酵物對固始雞育雛期均勻度的影響呈現(xiàn)對照1組優(yōu)于試驗組，試驗組優(yōu)于對照2組的趨勢，但各處理組之間無顯著差異（P＞0.05）。

2.2 豆粕液態(tài)酶解發(fā)酵物對固始雞育雛期血清生化指標(biāo)的影響 由表3可見，試驗組較對照2組血清中總蛋白、堿性磷酸酶和高密度脂蛋白含量分別提高4.00%、61.65%和1.72%，但谷草轉(zhuǎn)氨酶、球蛋白和總膽固醇含量差異不顯著（P＞豆粕0.05）；較對照1組谷草轉(zhuǎn)氨酶、總蛋白、球蛋白、堿性磷酸酶、高密度脂蛋白含量分別提高了6.48% 、15.36% 、18.03% 、47.30% 和 2.16% （P ＜0.05），但白蛋白、總膽固醇、甘油三酯及低密度脂蛋白含量無顯著差異（P＞0.05）。

表2 豆粕液態(tài)酶解發(fā)酵物對固始雞育雛期生長性能的影響

表3 豆粕液態(tài)酶解發(fā)酵物對固始雞育雛期血清生理生化指標(biāo)的影響

3 討論

3.1 豆粕酶解發(fā)酵物對動物生長性能的影響豆粕是一種優(yōu)良的植物性蛋白原料，但因其蛋白分子量較大且含β-伴大豆球蛋白、脲酶以及植酸磷等抗?fàn)I養(yǎng)因子，造成幼齡動物不易消化吸收，因而飼料轉(zhuǎn)化效率較低。豆粕經(jīng)酶解發(fā)酵后，大分子蛋白質(zhì)被分解成小分子蛋白質(zhì)、寡肽、小肽和游離氨基酸（馬文強(qiáng)等，2008），易被幼齡動物胃腸道完整吸收，有利于動物機(jī)體對飼料養(yǎng)分的消化利用（Feng等，2007）。飼喂酶解豆粕或發(fā)酵豆粕的動物在生產(chǎn)性能上都有不同程度的提高（魏金濤等，2013；陳瑜等，2011）。本試驗在育雛期給固始雞飼喂豆粕液態(tài)酶解發(fā)酵物后，較無抗生素日糧組可顯著提高平均日增重（P＜0.05），有提高平均日采食量的趨勢。與含抗生素日糧在平均日采食量、平均日增重以及料肉比方面無顯著差異（P＞0.05）。生產(chǎn)性能達(dá)到了以抗生素作為生長促進(jìn)劑的水平。均勻度是動物養(yǎng)殖過程中重要的經(jīng)濟(jì)指標(biāo)，與生產(chǎn)能力密切相關(guān)。體重均勻度的提高有利于畜禽的飼養(yǎng)管理、同期出欄，從而提高養(yǎng)殖場的生產(chǎn)效益（張樹閣等，2014；伍劍等，2014）。 本研究中，豆粕在液態(tài)情況下，經(jīng)益生菌發(fā)酵和復(fù)合酶的酶解，產(chǎn)生乳酸、維生素及生物活性小肽等，極大豐富了幼齡動物所需要的營養(yǎng)物質(zhì)。添加豆粕液態(tài)酶解發(fā)酵物的試驗組均勻度較對照2組（無抗）有提高的趨勢，與對照1組（含抗）無顯著差異（P＞0.05）。這和楊新建等（2014）報道的在肉雞飼料中添加環(huán)狀芽孢桿菌發(fā)酵產(chǎn)物能使肉雞體重均勻度提高相一致。因此，在無抗生素日糧中添加豆粕酶解發(fā)酵物有利于畜禽均勻度的提高。

3.2 豆粕酶解發(fā)酵物對動物血清生化指標(biāo)的影響 動物血液生化指標(biāo)的改變是組織細(xì)胞通透性發(fā)生改變和機(jī)體新陳機(jī)能發(fā)生改變的反映 （黃紅英等，2007）。血清堿性磷酸酶作為具有遺傳標(biāo)記的同工酶，其活性高低可以反映動物的生長速度和生產(chǎn)性能。血清總蛋白的增加，表明機(jī)體處于蛋白質(zhì)合成狀態(tài)。本試驗中飼喂豆粕液態(tài)酶解發(fā)酵物組的堿性磷酸酶以及血清總蛋白等指標(biāo)均優(yōu)于對照組，且差異顯著（P＜0.05），表明豆粕酶解發(fā)酵物能改善動物的蛋白質(zhì)合成，與動物獲得的生產(chǎn)性能等指標(biāo)的提高相吻合。

4 結(jié)論

對育雛期固始雞飼喂豆粕液態(tài)酶解發(fā)酵物，能提高其生產(chǎn)性能，改善血液生化指標(biāo)，提高整齊度，達(dá)到了以添加抗生素作為生長促進(jìn)劑的生產(chǎn)水平。

[1]陳瑜，張靜波，段謨哲，等.發(fā)酵豆粕在斷奶仔豬濃縮料中的應(yīng)用研究[J].養(yǎng)豬，2011，3：13 ～ 16.

[2]黃紅英，賀建華，范志勇，等.母豬日糧中支鏈氨基酸水平對仔豬血液生化指標(biāo)和部分免疫指標(biāo)的影響[J].飼料工業(yè)，2007，28（21）：24 ～ 26.

[3]馬文強(qiáng)，馮杰，劉欣.微生物發(fā)酵豆粕營養(yǎng)特性研究[J].中國糧油學(xué)報，2008，23（1）：121 ～ 124.

[4]魏金濤，楊雪海，趙娜，等.不同豆粕酶解發(fā)酵物對仔豬生長性能、血液生化指標(biāo)、抗氧化能力的影響研究[J].飼料工業(yè)，2013，18（34）：55 ～ 58.

[5]伍 劍.妊娠母豬營養(yǎng)攝入對窩產(chǎn)仔豬初生重均勻度的影響[J].豬業(yè)科學(xué)，2014，5：70 ～ 72.

[6]楊新建，段素云，王偉青，等.環(huán)狀芽孢桿菌發(fā)酵產(chǎn)物在改善肉雞體重均勻度及健康狀況方面的應(yīng)用研究[J].黑龍江畜牧獸醫(yī)，2014，6：75～77.

[7]張樹閣.雞群均勻度評定體系的構(gòu)建 [J].中國畜牧獸醫(yī)文摘，2014，6（30）：92 ～ 93.

[8]Feng J，Liu X，Liu Y Y，et al.Effects of Aspergillus oryzae fermented soybean meal on growth performance and plasma biochemical pararneters in broilers[J].Anim Feed Sci Technol，2007，134：235 ～ 242.