崔新廠

（山東省東營市第二人民醫(yī)院 山東東營 257335）

本研究為了分析結(jié)腸癌組織與存活素、血管內(nèi)皮生長因子－C（VEGF－C）的表達(dá)的關(guān)系，特對我院收治的40例患者進(jìn)行分析，現(xiàn)將分析結(jié)果報(bào)告如下：

1 一般材料與方法

1．1 一般材料：選取我院2013年2月至2014年12月在我院實(shí)行外科切除手術(shù)結(jié)腸癌標(biāo)本40例，其中男29例，女11例，年齡27～75歲，中位年齡55．1歲，同時(shí)取癌旁組織邊緣5c m之外的非癌組織標(biāo)本17例為對照組。所選患者均未在手術(shù)前進(jìn)行抗腫瘤治療，均無大腸癌史和家族性腺瘤病，依據(jù)PTNM標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行TNM分期。免抗人存活素多克隆抗體工作的濃度是1：50，其VEGF－C多克隆抗體的工作濃度是1：80，所用SP試劑盒采購于福州買新生物技術(shù)開發(fā)有限公司。

1．2 方法：運(yùn)用SP法進(jìn)行免疫組化染色，切片脫蠟后水化，在室溫下運(yùn)用高壓修復(fù)模式對3%H2O2孵育5分鐘，并滴加VEGF－C一抗和存活素，二者均要放置在冰箱內(nèi)，且在4℃環(huán)境下過夜；同時(shí)滴加鏈霉親和素（以辣根過氧化酶為標(biāo)記）和生物素化二抗，顯色DAB。陰性對照則選用PBS為一抗替代物。1．3 評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)及方法：存活素及血管內(nèi)皮生長因子染色為呈陽性時(shí)，表示腫瘤細(xì)胞中胞質(zhì)內(nèi)有棕黃色顆粒；對每張切片隨機(jī)選取5個(gè)高倍視野（x400），運(yùn)用生物顯微圖像Smartscape2002系統(tǒng)進(jìn)來對存活素和血管內(nèi)皮生長因子中的蛋白表達(dá)進(jìn)行處理分析，表示方法采用平均灰度值，當(dāng)血管內(nèi)皮生長因子和存活素的透光度強(qiáng)且染色強(qiáng)度弱時(shí)，表示其平均灰度值大，此時(shí)的蛋白表達(dá)就少，相反，則蛋白表達(dá)多［1］。

胞漿顏色呈中黃色表示細(xì)胞為陽性，選出高倍視野中5個(gè)陽性細(xì)胞并計(jì)算出其所占的比例：30%＞陽性細(xì)胞≥5%，為＋；5%＞陽性細(xì)胞，為－；60%＞陽性細(xì)胞≥30%，為＋＋；60%≤陽性細(xì)胞，為＋＋＋；為簡化處理數(shù)據(jù)，將其中＋、＋＋、＋＋＋均并作陽性［2］。

1．4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：所有數(shù)據(jù)均使用SPSS16．0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，結(jié)腸癌組織同癌旁組織中存活素和血管內(nèi)皮生長因子的表示情況及其同結(jié)腸癌病理因素的關(guān)系使用t檢驗(yàn)，標(biāo)準(zhǔn)差用表示，存活素及血管內(nèi)皮生長因子的相關(guān)性使用pearson進(jìn)行分析處理，比較差異呈現(xiàn)顯著性表示具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0．05）。

2 結(jié)果

2．1 結(jié)腸癌及癌旁組織中存活素的表達(dá)狀況

2．1．1 結(jié)腸癌中存活素和VEGF－C表達(dá)：癌細(xì)胞組織中存活素和VEGF－C中，呈陽性表達(dá)率是59．8%和65．71%，癌旁組織中VEGF－C和存活素只在極少的上皮細(xì)胞中表達(dá)，呈陽性率是13．29%和13．29%，癌細(xì)胞組織中存活素和VEGF－C陽性表達(dá)率明顯高于癌旁組織（P＜0．05）。

2．1．2 結(jié)腸癌中，存活素和VEGF－C中蛋白表達(dá)的關(guān)系：存活素中蛋白陽性表達(dá)中VEGF－C陽性表達(dá)率為85．72%，存活素中陰性表達(dá)中VEGF－C陽性表達(dá)率為35．69%，存活素中陽性表達(dá)中VEGF－C陽性表達(dá)率明顯高于存活素陰性表達(dá)組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0．05）。觀察Spear man等級(jí)分析可知二者呈現(xiàn)出正相關(guān)系（P＜0．01）。

2．1．3 存活素和VEGF－C中蛋白表達(dá)同臨床病理因素的關(guān)系：存活素中蛋白表達(dá)同VEGF－C表達(dá)相一致，同淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期和侵潤深度的相關(guān)性很強(qiáng)。VEGF－C和存活素蛋白表達(dá)率，侵潤深度方面明顯高于（P＜0．05）；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組陽性率為82．8%和75．9%，淋巴結(jié)非無轉(zhuǎn)移組的陽性率均為18．2%，比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0．05）；spear man等級(jí)分析：存活素和VEGF－C同淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈現(xiàn)出正相關(guān)系（P＜0．01）；TNM分期方面，Ⅲ＋Ⅳ的陽性表達(dá)率分別是80%和88%明顯高于Ⅰ＋Ⅱ期的26．7%和33．3%，比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0．01）。此外，存活素和VEGF－C同患者的年齡、性別和組織分化程度等方面均無明顯關(guān)系（P＞0．05）。具體數(shù)據(jù)如表1。

表1 結(jié)腸癌中存活素和VEGF－C表達(dá)同臨床病理因素關(guān)系狀況

3 討論

存活素屬于近幾年來發(fā)現(xiàn)的凋亡抑制蛋白細(xì)胞中的一種，在成熟分化組織中存活素的表達(dá)通常很低或者無表達(dá)，在許多惡性腫瘤組織中則呈現(xiàn)出高表達(dá)，其同惡性腫瘤的發(fā)生及發(fā)展?fàn)顩r極為密切相關(guān)。存活素同腫瘤細(xì)胞的生長失控、腫瘤的發(fā)生轉(zhuǎn)移、發(fā)展和預(yù)后的關(guān)系也異常密切。VEGF－C在淋巴內(nèi)皮細(xì)胞中的表達(dá)能夠刺激生成腫瘤淋巴管，其在腫瘤淋巴管的生成和轉(zhuǎn)移中發(fā)揮著重要作用。VEGF－C對腫瘤細(xì)胞生長起著促進(jìn)作用，其表達(dá)能夠促使腫瘤細(xì)胞快速增殖，對腫瘤組織血管發(fā)生卻無任何影響；其促進(jìn)腫瘤細(xì)胞生長與腫瘤細(xì)胞中淋巴管內(nèi)生長相關(guān)。研究證實(shí)［3］，在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移方面，存活素同VEGF－C的表達(dá)明顯高于淋巴結(jié)無轉(zhuǎn)移中的表達(dá)；存活素和VEGF－C呈現(xiàn)的高表達(dá)同淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移為正相關(guān)系；同TNM分期和浸潤度的關(guān)系較為密切，因?yàn)榛颊叩纳媛释琓NM分期關(guān)系密切，加上唯一影響預(yù)后的因素是淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。研究中存活素同血管內(nèi)皮生成因子－C表達(dá)呈現(xiàn)出正相關(guān)系，P＜0．01，表明淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和擴(kuò)散中，存活素和VEGF－C起著共同促進(jìn)的作用。

綜上所述，對存活素和血管內(nèi)皮生成因子－C表達(dá)進(jìn)行臨床聯(lián)合檢測能夠?qū)Y(jié)腸癌癌變程度、治療及預(yù)后等提供理論上的重要依據(jù)。

［1］ 蘇永強(qiáng)；鄧述愷．血管內(nèi)皮生長因子及受體在腫瘤發(fā)病機(jī)制中的研究進(jìn)展 ［J］現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生．2014，（02）：235－237．

［2］ 陳玲．結(jié)腸癌組織中Bmi－1表達(dá)變化及意義．［J］現(xiàn)代診斷與治療．2014，（160）：3810－3812．

［3］ 陳偉斌．結(jié)腸癌血管內(nèi)皮生長因子－C及血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體－3的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系 ［J］．實(shí)用臨床醫(yī)學(xué)，2014，（04）：32－34＋139．