常靜秋

兩種微柱凝膠卡和試管法在臨床血型鑒定中的應(yīng)用評價

常靜秋

【摘要】目的探討兩種微柱凝膠卡和試管法在臨床血型鑒定中的應(yīng)用。方法 選取500份患者標本，同時采用進口、國產(chǎn)微柱凝膠檢測卡以及傳統(tǒng)的試管法進行血型鑒定，然后對凝集強度進行比較分析。結(jié)果 卡式法比試管法的操作更加標準化，靈敏度、特異性、客觀性等方面具有更顯著的優(yōu)勢；進口和國產(chǎn)微柱凝膠卡的血型鑒定結(jié)果差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。結(jié)論 卡式法鑒定血型操作簡便，結(jié)果清晰準確，進口和國產(chǎn)微柱凝膠卡的鑒定結(jié)果相似，國產(chǎn)微柱凝膠檢測卡費用更低。

【關(guān)鍵詞】微柱凝膠卡；試管法；血型鑒定

作者單位： 225300 泰州市第三人民醫(yī)院

Evaluation of Two Kinds of Micro Column Gel and Tube Method in Clinical Blood Typing

CHANG Jingqiu, Third People's Hospital of Taizhou City, Taizhou 225300, China

[Abstract]Objective To evaluate the two micro gel cards and test tube method in clinical blood Identification. Methods 500 patients samples were selected for ABO blood group identification by imported, domestic micro column gel card and test tube method. Results Imported micro gel test more standardized than the operating tube method, the sensitivity, specificity, objectivity, and so has a more significant advantage; blood test results of imported micro gel cards and domestic micro-column gel card difference between the two methods no statistically significant(P>0.05). Conclusion Micro-column gel card identifying blood type operation simple, clear and accurate results, while similar identification results of domestic and imported micro gel cards, and less costly.

[Key words]Micro-gel card, Tube method, Blood test

隨著檢驗技術(shù)的發(fā)展，微柱凝膠血型鑒定卡在ABO血型鑒定中得到了廣泛的使用。相對于傳統(tǒng)的手工試管法，卡式法標本用量少，操作簡單，結(jié)果易于判讀[1]。在中國，長期以來使用進口微柱凝膠卡，成本較高。隨著國產(chǎn)微柱凝膠卡的市場投放，許多醫(yī)院開始使用國產(chǎn)微柱凝膠卡?，F(xiàn)選取我院500份標本進行血型

鑒定，通過對比分析進口、國產(chǎn)微柱凝膠卡和試管法在鑒定血型中的效果，探討這些鑒定結(jié)果的一致性和存在的差異。現(xiàn)進行如下報道。

表1　進口與國產(chǎn)微柱凝膠卡對A、B以及RhD抗原凝集強度鑒定結(jié)果[n(%)]

1　資料與方法

1.1一般資料

選擇本院2015年5～6月入院的需要進行常規(guī)血型鑒定的500例患者標本作為研究對象。

1.2儀器與試劑

國產(chǎn)微柱凝膠卡(長春博迅生物技術(shù)有限責任公司)及專用TD-3A血型血清學用離心機（長春博研科學儀器有限責任公司），進口瑞士達亞美公司DiaclonABO/D正反定型卡、ID-Diluent2（2號稀釋液）及專用離心機（ID-Centrifuge）?？笰、抗B、單克隆抗D、ABO反定型用紅細胞試劑為上海血液生物有限責任公司生產(chǎn)。

1.3標本來源

我院2015年5月～6月住院患者500名，抽取靜脈EDTA-K2抗凝血2 ml。1.4檢測方法

1.4.1進口微柱凝膠卡 將被測血標本采用低離子介質(zhì)（2號稀釋液）配制成2%的紅細胞懸浮液，微柱凝膠卡正定型孔和ctl孔各加入20 μl。反定型孔加入1%反定型細胞50 μl，再加入患者血漿50 μl，放置于專用離心機離心觀察結(jié)果。

1.4.2國產(chǎn)微柱凝膠卡 將被測血標本用生理鹽水配制成0.8%的紅細胞懸浮液，微柱凝膠卡正定型孔和對照孔各加入50 μl。反定型孔加入1%反定型細胞50 μl，再加入患者血漿50 μl，放置于專用離心機離心觀察結(jié)果。

1.4.3試管法 按照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》[2]第三版血型鑒定試管法操作規(guī)程進行。

1.5凝集度評定標準

參考文獻血型鑒定結(jié)果由人工判讀，凝集判斷標準見[3]。當正反定型結(jié)果一致才能認為是正確結(jié)果，否則為亞型、病理狀態(tài)、標本或血型卡不合格等情況。

1.6統(tǒng)計學方法

利用統(tǒng)計學處理軟件SPSS 17.0進行處理分析，采用χ2檢驗對數(shù)據(jù)資料進行對比分析，以P＜0.05為結(jié)果具有統(tǒng)計學意義。

2　結(jié)果

2.1微柱凝膠卡法與試管法鑒定結(jié)果比較

在檢測的500例患者標本中，RhD陰性4例，ABO血型有2例結(jié)果不一致。經(jīng)查，其中1例是因為微柱凝膠卡在運輸過程中受到震蕩和倒置，使用前未進行離心恢復，撕去卡上的錫紙膜時產(chǎn)生了交叉污染，從而導致血型鑒定正反不一致。選擇正確儲存且離心后的檢測卡重新鑒定，結(jié)果正反定型與試管法一致。1例為纖維蛋白原異常增高致反定型凝集假陽性。經(jīng)滴加生理鹽水，去除假凝集，重新檢測后，結(jié)果一致[4]。經(jīng)分析對比及重新檢測，500例標本卡式法和試管法血型結(jié)果一致，微柱凝膠卡法比試管法具有更高的敏感性和特異性、結(jié)果易重復，并且更加安全快速。

2.2進口與國產(chǎn)微柱凝膠卡鑒定結(jié)果比較

進口與國產(chǎn)微柱凝膠卡的A抗原凝集強度、B抗原凝集強度以及RhD凝集強度結(jié)果差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。如表1所示。

3　討論

微柱凝膠卡法是一種廣泛應(yīng)用于血型鑒定、交叉配合、間接抗人球蛋白實驗中的檢驗方法。其原理是通過在微柱中加入凝膠，紅細胞膜抗原與相應(yīng)的抗體在凝膠介質(zhì)中發(fā)生免疫反應(yīng)，利用凝膠的分子篩作用，通過調(diào)節(jié)凝膠孔徑，只允許單個的紅細胞通過，而紅細胞的凝塊不能通過，利用重力的作用將凝集的紅細胞和游離的紅細胞分離[5]，從而區(qū)分有無凝集。由于凝膠間隙只讓未凝集的紅細胞通過，這就使得卡式檢測具有較高的靈敏性，對于一些由于紅細胞抗原減弱而導致血型鑒定困難的標本，卡式法的陽性度更強。另一方面，凝膠卡中加入了抗人球蛋白以促進紅細胞的特異性凝集，因此卡式法的特異性明顯高于試管法[6]。微柱凝膠技術(shù)屬于微試管柱凝集技術(shù)，這種方法具有準確率和靈敏度高、操作簡單、標本用量少、結(jié)果可長期保存、可標準化等優(yōu)點。采用標準化定量工作，減少了操作人員的隨意性，且重復性好。由于采用了凝膠分子篩技術(shù)，使結(jié)果一目了然，避免了操作者的主觀影響[7]。

本研究結(jié)果表明，微柱凝膠卡法比試管法的陽性度更強，特異性更高，操作更加標準化，并且還可以長期保存。進口微柱凝膠卡法和國產(chǎn)微柱凝膠卡法的鑒定結(jié)果比較差異無統(tǒng)計學意義，但是進口微柱凝膠卡法的費用相對較高。綜上所述，微柱凝膠卡在血型鑒定中操作更簡單、靈敏度高、結(jié)果清晰直觀，可長期保存。國產(chǎn)微柱凝膠卡與進口微柱凝膠卡沒有顯著差異，費用相對更低，值得廣泛地被推廣于臨床應(yīng)用。同時，微柱凝膠卡保存時要注意溫度和濕度，為了保證結(jié)果的準確性和穩(wěn)定性，使用前應(yīng)先將檢測卡離心，規(guī)范操作，加樣過程中避免交叉污染，以確保結(jié)果的準確性，從而充分發(fā)揮微柱凝膠卡的臨床價值。另外，某些疾病引起自身冷凝集、血漿中的纖維蛋白原增多、抗原減弱等會導致檢測中出現(xiàn)假陽性、假陰性，應(yīng)結(jié)合臨床和血清學特點，查明原因，并進行相關(guān)試驗，聯(lián)合其他血型檢測方法，從而作出正確的血型鑒定[8]。

[1]袁曉華，胡惠萍. 國產(chǎn)微柱凝膠卡對血型鑒定的結(jié)果分析[J]. 國際檢驗醫(yī)學雜志，2013（12）：1585-1586.

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[3] 蘭炯采，負中橋，陳靜嫻. 輸血免疫血液學實驗技術(shù)[M]. 北京：人民衛(wèi)生出版社，2011：77-79.

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doi：10.3969/j.issn.1674-9308.2015.25.018

【文章編號】1674-9308（2015）25-0027-03

【文獻標識碼】B

【中圖分類號】R446