季偉
(遼寧省凌海市余積動物衛(wèi)生監(jiān)督所121206)
影響獸醫(yī)生物制品滅活作用的因素
季偉
(遼寧省凌海市余積動物衛(wèi)生監(jiān)督所121206)
獸醫(yī)生物制品生產(chǎn)中的滅活,是指破壞微生物的生物學(xué)活性、繁殖能力和致病性,但盡可能不影響其免疫原性,被滅活的微生物主要用于生產(chǎn)滅活疫苗;或指破壞診斷血清或待檢血清中的補體活性,以避免補體對診斷試驗的干擾作用。滅活的對象不同,采用的方法也不盡相同。滅活的主要方法有兩類,即物理方法和化學(xué)方法。滅活方法不同,化學(xué)滅活劑的種類又很多,作用機理也不同,因此,滅活效果受多種因素影響。
某些滅活劑只對一部分微生物有明顯的滅活作用,而對另一些微生物則效力很差。如酚類能抑制和殺滅大部分細菌的繁殖體,5%石碳酸溶液于數(shù)小時內(nèi)能殺死細菌的芽孢。真菌和病毒對酚類不太敏感。陽離子表面活性劑抗菌譜廣,效力快,對組織無刺激性,能殺死多種革蘭氏陽性菌和陰性菌,但對綠膿桿菌和細菌芽孢作用弱,其水溶液不能殺死結(jié)核桿菌。因此在選擇滅活劑時,應(yīng)考慮其特異性,即應(yīng)考慮其對微生物的作用范圍。
不同種類的微生物如細菌、病毒、真菌以及革蘭氏陽性菌與革蘭氏陰性菌對各類滅活劑的敏感性并不完全相同;細菌的繁殖體及其芽孢對化學(xué)藥物的抵抗力不同;生長期和靜止期的細菌對滅活劑的敏感程度亦有差別。此外,細菌的濃度也會影響滅活的效果。微生物或毒素的總氮量和氨基氮含量對滅活也有一定影響。一般含氮量越高,甲醛等滅活劑的消耗量就越大,滅活脫毒速度越慢。
以甲醛為例,甲醛濃度越高,滅活脫毒越快,但抗原損失量亦較大。有人證明,加0.5%甲醛溶液脫毒的類毒素,其結(jié)合力僅相當(dāng)于0.2%甲醛溶液脫毒類毒素結(jié)合力2/3。有時可以采用分次加入甲醛溶液進行滅活、脫毒比較緩和的方法。即將甲醛溶液分數(shù)次加入,加量由小至大,pH由低而高,溫度由室溫開始,逐步提高到允許的最高溫度,這樣對于保護抗原的免疫原性有一定好處。
通常情況下,滅活作用隨滅活溫度上升而加速。在低溫時,溫度每上升10℃,細菌死亡率可成倍增加。每升高10℃,金屬鹽類的滅活作用增加2~5倍,石碳酸的殺菌作用增加5~8倍。但是,如果溫度超過40℃或更高,對微生物的抗原性將有不利影響。
滅活時間與滅活劑濃度和作用溫度密切相關(guān)。一般隨著滅活劑濃度及作用溫度升高,滅活時間則縮短。在生物制品生產(chǎn)中,應(yīng)以保證制品安全和效力,采用低滅活劑劑量、低作用溫度和短時間處理為最佳。
在微酸性時滅活速度慢,抗原性保持較好,在堿性時滅活速度快,但抗原性易受破壞。滅活初期損失較快,以后逐漸減慢,尤其甲醛溶液濃度高時,在堿性溶液中抗原性損失更大。pH對細菌的滅活作用有較大影響。pH改變時,細菌的電荷也發(fā)生改變,在堿性溶液中,細菌帶陰電荷較多,陽離子表面活性劑的殺菌作用較大。在酸性溶液中,則陰離子的殺菌作用較強。同時,pH也影響滅活劑的電離度。未電離的分子一般較易通過細菌細胞膜,滅活效果較好。
被滅活的病毒或細菌液中,如果含有血清或其它有機物質(zhì),會影響滅活劑的滅活能力。因為有機物能吸附于滅活劑的表面或者與滅活劑的化學(xué)基團相結(jié)合。受此影響最大的為苯胺類染料、汞制劑和陽離子去污劑。一旦汞制劑與含硫氫基化合物相遇或季銨鹽類與脂類結(jié)合,則明顯降低這些滅活劑的滅活作用。
總之,了解影響滅活作用的因素,在獸醫(yī)實際生產(chǎn)中適當(dāng)避免不正確的操作,使獸醫(yī)生物制品發(fā)揮最大的作用,給養(yǎng)殖業(yè)帶來最高的經(jīng)濟效益。