劉 紅王寶輝王 宇張俊毅王祥艷孫艾楠程顏彬趙李宏

（1 白求恩醫(yī)科大學制藥廠，吉林 長春 130012；2 吉林省成大方圓醫(yī)藥連鎖有限公司，吉林 長春 130041）

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苯環(huán)喹溴銨藥理毒理的研究進展

劉 紅1王寶輝1王 宇1張俊毅1王祥艷1孫艾楠1程顏彬1趙李宏2

（1 白求恩醫(yī)科大學制藥廠，吉林 長春 130012；2 吉林省成大方圓醫(yī)藥連鎖有限公司，吉林 長春 130041）

【摘要】變應性鼻炎和慢性阻塞性肺病是當前兩種發(fā)病率高、發(fā)病人群廣泛、病程纏綿且危害顯著的呼吸系統(tǒng)疾病。作為有針對性的新一代治療藥物，苯環(huán)喹溴銨是我國自主研發(fā)的具有自主知識產權的國家一類新藥，具有廣闊的應用前景。

【關鍵詞】苯環(huán)喹溴銨；藥理；毒理；研究進展

變應性鼻炎（allergic rhinitis，AR）又稱為過敏性鼻炎，是特應性個體接觸致敏源后導致的，包含IgE介導的炎性介質釋放和多種免疫活性細胞因子、細胞因子參與的鼻黏膜慢性反應性疾病。主要臨床癥狀包括流涕、鼻塞、鼻癢和打噴嚏，是全球最常見的慢性疾病之一，既影響患者的生活質量，又增加整個社會的經濟負擔［1］。慢性阻塞性肺?。╟hronic obstructive pulmonary disease，COPD）是一以氣流受限為特征的疾病，常呈現(xiàn)進行性發(fā)展，與肺部對有害氣體或有毒顆粒的異常炎性反應有關。根據WHO發(fā)布的研究成果表明，到2020年COPD將成為世界慢性疾病致病和死亡原因的第三位［2］。

作為針對上述疾病的、新一代的治療藥物，苯環(huán)喹溴銨（bencycloquidium bromide，BCQB）的化學名為3-｛（2-環(huán)戊基-2-羥基-2-苯基）乙氧基｝-1-甲基-溴化-1-氮雜雙環(huán)｛2，2，2｝辛烷［2］。它是北京嘉事聯(lián)博醫(yī)藥科技有限公司研發(fā)的具有自主知識產權的創(chuàng)新型化合物，其臨床上可用于慢性阻塞性肺?。?］和變應性鼻炎［1］，屬于國家1.1類新藥［4］。本文通過查閱相關文獻，就新藥BCQB藥理學和毒理學部分的最新研究情況，進行綜述。

1 藥理作用

1.1抗超敏性、變應性鼻炎：李娟等以10%的2，4二異氰酸甲苯酯（TDI）橄欖油溶液進行豚鼠雙側鼻腔給藥，建立豚鼠超敏性鼻炎的模型組；以橄欖油溶液代替10%的TDI橄欖油溶液進行豚鼠雙側鼻腔給藥作為溶媒對照組；再將治療組分為BCQB大、中、小3個劑量組和硫酸阿托品組，共計6個組。2周后的結果顯示，經鼻給予BCQB的治療組能明顯緩解超敏性鼻炎豚鼠鼻癢、噴嚏和清涕等癥狀，降低豚鼠鼻黏膜中的組胺濃度，減少鼻黏膜中的嗜酸粒細胞，對豚鼠超敏性鼻炎有明顯的治療作用［5］。在另一組實驗中，李娟等實驗人員以卵清白蛋白（Ova）和Al（OH）3建立大鼠變應性鼻炎模型作為模型組；再將BCQB分為大、中、小3個劑量組，倍氯米松組以及溶媒對照組共計6個組，以大鼠的癥狀、鼻黏膜組織形態(tài)、單側鼻分泌物重量、血清和鼻分泌物中Ova特異性IgE為考察指標進行分析比較。2周后的結果顯示，與模型組相比，給予BCQB的各劑量組大鼠鼻炎癥狀明顯改善，大中劑量組大鼠鼻黏膜的組織形態(tài)改變明顯減輕，大劑量組大鼠血清和鼻黏膜中的Ova特異性IgE水平及鼻分泌物量均明顯降低，治療作用明顯［6］。

1.2抗炎止癢：李娟等［7］使用二甲苯誘導小鼠建立耳腫脹模型，使用冰醋酸誘發(fā)小鼠建立毛細血管通透性亢進模型，使用磷酸組胺誘導豚鼠建立致癢模型，經鼻給予大、中、小3個劑量的BCQB，以溶媒、阿托品、氯雷他定和強的松龍為對照。結果顯示，BCQB能較好地抑制二甲苯所誘發(fā)的小鼠耳殼炎性腫脹程度，明顯降低冰醋酸誘發(fā)的小鼠毛細血管通透性亢進，緩解磷酸組胺的致癢作用，而且表現(xiàn)出一定的量效關系。

1.3對中樞神經系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)和呼吸系統(tǒng)的作用：李娟等［8］將BCQB分成大、中、小3個劑量組，經鼻黏膜給藥，考察小鼠的精神神經活動、激怒反應、自主活動、支氣管分泌和小腸蠕動情況，同時考察記錄Beagle犬血壓、心電圖、心率、心律以及呼吸頻率和幅度。結果顯示，BCQB對小鼠的中樞神經系統(tǒng)有一定的抑制作用（后可緩解），能減少支氣管的腺體分泌，降低小腸的蠕動；而對麻醉的Beagle犬的血壓、心電圖、心率、心律以及呼吸頻率和幅度均無明顯的影響。

1.4選擇性拮抗乙酰膽堿受體（M受體）亞型中M1、M3受體：李娟等［9］將表達單一的M受體亞型的中國倉鼠卵巢細胞株（CHO）：CHOM1（表達M1受體）、CHOM2（表達M2受體）、CHOM3（表達M3受體），與［3H］-二苯羥乙酸奎寧酯（［3H］-QNB）進行飽和實驗，以及競爭性抑制藥和［3H］-QNB與M受體亞型的競爭結合實驗，計算3株細胞分別與［3H］-QNB的解離平衡常數(shù)（Kd值）和抑制常數(shù)（Ki值）。再通過離體膀胱肌條實驗，評價BCQB干預乙酰膽堿對膀胱肌條作用，計算競爭性拮抗作用強度值（pA2值）。結果顯示，BCQB對3種細胞的抑制強度為CHOM3＞CHOM1＞CHOM2，對CHOM3和CHOM1的抑制能力相似，均明顯高于對CHOM2的抑制能力，即可選擇性拮抗M1和M3受體亞型；此外，BCQB還有拮抗乙酰膽堿對離體膀胱肌條的收縮作用。

1.5對小鼠學習記憶能力的影響：李娟等［10］選取雄性昆明小鼠，隨機分為溶媒組，BCQB高、中、低3個劑量組（5.86、2.93、1.47 mg/kg）及戊乙奎醚組（2.25 mg/kg），按5 μL/10 g劑量給藥，經鼻，每天1次，持續(xù)1個月，采用Morris水迷宮和跳臺實驗作為評價方法。結果顯示，BCQB長期經鼻給藥，對小鼠的學習和記憶能力沒有影響，原因可能與BCQB不能透過血腦屏障相關。

1.6對大鼠肝微粒體細胞色素P450（CYP450）酶的抑制作用：孫魯寧等［11］采用探針底物法考察了BCQB對大鼠肝微粒體CYP450酶的抑制作用。具體方法為，將CYP450酶6種亞型的7種特異性探針底物非那西?。–YP1A2）、S-美芬妥英（CYP2C11）、右美沙芬（CYP2D1/2）、甲苯磺丁脲（CYP2C6）、氯唑沙宗（CYP2E1）、咪達唑侖（CYP3A1/2）和睪酮（CYP3A1/2）分別與大鼠肝微粒體及系列濃度的BCQB溶液進行溫孵反應，合并處理后的微粒體溶液，采用LC-MS/MS法同時測定底物代謝產物的含量，計算IC50值，并用探針底物法進行驗證。結果顯示，BCQB對CYP2D1/2可能有抑制作用，對其他亞型無抑制作用。

1.7對大鼠肝臟CYP450酶的誘導作用：孫魯寧等［4］將BCQB分為低、中、高3個劑量組（范圍1、3、9 mg/kg），對比空白組，對大鼠連續(xù)給藥后，處死取肝制備微粒體。以大鼠肝臟臟器系數(shù)、肝微粒體CYP450蛋白含量和肝微粒體CYP1A1/2、CYP3A1/2酶活性為考察指標，采用HPLC-MS/MS法和底物法進行檢測。結果顯示，BCQB3個劑量組與空白組在肝臟臟器系數(shù)、CYP450蛋白含量和CYP1A1/2酶活性上午明顯差異，而且對CYP3A1/2酶的活性也未高于空白組，即對大鼠肝臟CYP450酶均無誘導作用。

2 毒理作用

2.1生殖毒性：李練兵等［12］將BCQB分成低中高3個劑量組（范圍27、162、972 μg/kg，相當于人臨床擬用劑量的6.36和216倍）和1個溶劑對照組，以大鼠一般狀況、體質量變化、交配率、受孕率、生育率、出生存活率、著床率、吸收胎率、出生體質量、離乳體質量和生殖系統(tǒng)組織學檢查為指標進行考察。結果顯示，BCQB在27～162 μg/kg范圍內對大鼠無明顯生殖毒性作用；但是給予972 μg/kg劑量條件下，對大鼠精子顯示出了一定的生殖毒性作用。

2.2急毒作用：李正等［13］采用將BCQB經鼻給藥已經禁食12 h的大鼠，給藥容量標準為0.1 μg/g，劑量范圍為163.84～500.00 mg/kg，組間劑量比為1∶0.8。給藥持續(xù)14 d，期間觀察結果顯示，給藥后1～30 min，大劑量組大鼠開始出現(xiàn)全身肌肉痙攣、呼吸加快急促、全身無力、運動困難、四肢抽搐以及死亡，而且約80%的大鼠死亡時間在30 min以內，其余存活大鼠在給藥8 h后恢復正常，2周內再無死亡現(xiàn)象出現(xiàn)；對死亡大鼠解剖顯示，裸眼下心、肝、脾、肺、腎和腦等器官無明顯異常。

2.3慢毒作用：李正等［13］采用Bliss法求出急毒試驗中大鼠的半數(shù)致死量（LD50），并以LD50的1/100、1/200和1/400作為BCQB的大（3.00 mg/kg）、中（1.50 mg/kg）和?。?.75 mg/kg）劑量，另設溶劑對照組，考察BCQB對大鼠的慢性毒性。結果顯示，大鼠鼻黏膜給藥的LD50為300.38 mg/kg，95%可信限為263.58～342.31 mg/kg。各劑量組連續(xù)給藥6個月，期間大鼠的一般特征、精神狀態(tài)、毛發(fā)、體質量、臟器系數(shù)、腎功能、肝功能、血液生化、血液學、大體解剖和組織病理學檢查均未出現(xiàn)明顯的毒性作用，僅僅在大、中劑量組有一定的毒性反應，小劑量則無明顯改變。因為小劑量已經是臨床給藥劑量的167倍，所以，BCQB噴鼻劑仍然是安全的。

2.4對血糖、肌酸酐、血尿素氮和腎功能的影響：Li 等［14］選取66只beagle犬（雌雄各半），以考察BCQB的亞慢性毒性及體內毒物代謝。采取經鼻給藥途徑，給藥劑量分為低（2.5 mg/kg）、中（5.0 mg/kg）、高（10.0 mg/kg）3種，持續(xù)時間為91 d。結果顯示，BCQB的3個給藥劑量均能降低雄性、雌性Beagle犬的血糖水平，其中，中、高劑量組在經歷91 d的重復給藥后，血糖水平降低更為顯著。與此相反，BCQB的中、高給藥劑量組有升高雌性Beagle犬肌酸酐的趨勢，同時，高劑量給藥組有升高雄性、雌性Beagle犬血尿素氮的趨勢。此外，相對于單劑量給藥方式，經歷91 d的重復性給藥后，BCQB在腎臟中的濃度最高。

2.5皮膚致敏作用：李娟選取健康豚鼠來考察BCQB對局部給藥皮膚的致敏作用。將豚鼠于試驗前24 h時，剪去背部兩側毛（范圍3 cm×3 cm），分成陽性對照組、BCQB空白溶媒對照組和BCQB組，分別涂2% 2，4-二硝基氯苯0.5毫升/只、空白溶媒0.5毫升/只和48 mg/mLBCQB0.5毫升/只，再用油紙和紗布分別覆蓋，膠布固定6 h后，去除受試物，同樣操作分別于第7天、14天時重復。結果與陽性對照組相比，BCQB組受試豚鼠皮膚并未出現(xiàn)紅斑、紅腫等過敏性反應［1］。

2.6鼻黏膜刺激作用：李娟選取健康家兔來考察BCQB對鼻黏膜局部給藥皮膚的刺激作用。將家兔分成生理鹽水組、溶媒對照組和BCQB組，連續(xù)給藥1周，每天分2次給藥，確保藥物與黏膜接觸時間至少達到4 h。結果與生理鹽水組相比，BCQB組受試家兔鼻黏膜僅有輕度干燥，無其他明顯病理改變，無刺激性作用［1］。

2.7對家兔瞳孔的影響：李娟選取健康的、對光反射呈陽性的家兔來考察BCQB給藥后，對瞳孔大小的影響。將已經禁食12 h的家兔分成1%阿托品對照組、溶媒對照組和BCQB大、中、小3個劑量組，給藥后分別于15 min、1 h和2 h光照家兔雙側瞳孔，用游標卡尺測量瞳孔大小。結果顯示，BCQB經鼻給藥對家兔瞳孔大小有明顯的影響，但是持續(xù)時間較短，中小劑量組2 h后可恢復，對家兔瞳孔的對光反射無影響［1］。

3 小 結

綜合上述藥理、毒理學研究資料，可以看出苯環(huán)喹溴銨對M1、M3受體的拮抗作用具有高度的選擇性，能有效降低M1、M3受體密度［1］，發(fā)揮抗敏作用，能有效治療變應性鼻炎和慢性阻塞性肺病，而且不良反應和不良反應少，安全性高。目前，苯環(huán)喹溴銨的鼻用噴霧劑正處于Ⅲ期臨床研究階段［11］，未來一定會成為臨床的一線用藥。

參考文獻

［1］ 李娟.苯環(huán)喹溴銨的藥效學研究與安全性評價［D］.重慶:重慶醫(yī)科大學，2008.

［2］ 董新威.M3受體阻斷藥苯環(huán)喹溴銨對小鼠氣道炎癥和重塑的作用［D］.杭州:浙江大學，2011.

［3］ 鄧萬定，金方，張啟明.高效液相色譜法測定苯環(huán)喹溴銨在Calu-3細胞中的攝?。跩］.中國藥學雜志，2013，48（14）:1187-1190.

［4］ 孫魯寧，丁黎，嚴拯宇，等.苯環(huán)喹溴銨對大鼠肝臟CYP450酶誘導作用的研究［J］.中國藥學雜志，2013，48（17）:1262-1267.

［5］ 李娟，周遠大.苯環(huán)喹溴銨對豚鼠鼻超敏反應的影響［J］.中國醫(yī)院藥學雜志，2007，27（11）:1545-1548.

［6］ 李娟，周遠大，陳小平.苯環(huán)喹溴銨對大鼠變應性鼻炎的治療作用［J］.中國新藥與臨床雜志，2008，27（3）:191-194.

［7］ 李娟，周遠大，陳小平.苯環(huán)喹溴銨抗炎止癢作用的初步觀察［J］.中國新藥雜志，2007，16（15）:1182-1184.

［8］ 李娟，周遠大.苯環(huán)喹溴銨的一般藥理學研究［J］.重慶醫(yī)科大學學報，2007，32（5）:506-510.

［9］ 李娟，何海霞，周遠大，等.苯環(huán)喹溴銨的毒蕈堿樣乙酰膽堿受體亞

中圖分類號：R9

文獻標識碼：A

文章編號：1671-8194（2016）04-0043-02

Research Progress of Pharmacological Effects and T oxicological Information of Bencycloquidium Bromide

LIU Hong1， WANG Bao-hui1， WANG Yu1， ZHANG Jun-yi1， WANG Xiang-yan1， SUN Ai-nan1， CHENG Yan-bin1， ZHAO Li-hong2
（1 Pharmaceutical Factory Norman Bethune University of Medical Science， Changchun 130012， China； 2 Jilin Province Chengda Fangyuan Pharmaceutical Co，Ltd.， Changchun 130041， China）

［Abstract］At present， allergic rhinitis and chronic obstructive pulmonary disease are the two kinds of respiratory diseases， with the features of high incidence， widespread population incidence， long course and remarkable harm. As a new generation of targeted therapeutic drug， bencycloquidium bromide is an independent intellectual property rights and national class of drug that would get broad application prospect.

［Key words］Bencycloquidium bromide； Pharmacological effects； Toxicological information； Research progress