王南飛（牡丹江市婦女兒童醫(yī)院，黑龍江 牡丹江 157000）

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無創(chuàng)產(chǎn)前診斷胎兒常見染色體非整倍體異常的臨床探討

王南飛
（牡丹江市婦女兒童醫(yī)院，黑龍江 牡丹江 157000）

【摘要】目的 研究分析無創(chuàng)產(chǎn)前診斷胎兒常見染色體非整體異常的臨床檢查。方法 選擇2014年4月至2015年4月在我院進(jìn)行治療的400例孕婦，均進(jìn)行無創(chuàng)產(chǎn)前診斷。結(jié)果 無創(chuàng)產(chǎn)前基本檢查400例患者中，結(jié)果陽性者12例（3.0%），包括21三體綜合征者4例，18三體綜合征者2例，13三體綜合征者1例，性染色體異常者3例，其他染色體異常者2例；結(jié)果陰性者388例（97.0%）。結(jié)論 無創(chuàng)產(chǎn)前診斷胎兒常見染色體非整體異?？捎行Ы档突純撼錾?，可作為一種安全、快捷、易接受的產(chǎn)前診斷方法。

【關(guān)鍵詞】無創(chuàng)產(chǎn)前診斷；胎兒染色體非整倍體異常；基因檢測

染色體非整倍體指的是染色體數(shù)目的增多或降低不是單倍體的整數(shù)倍，常見的有X單體型、某些性染色體三體型、13三體綜合征、18三體綜合征、21三體綜合征［1］。以往常用的檢查方法有臍血穿刺、羊水穿刺、絨毛活檢，均會(huì)造成宮腔內(nèi)感染、胎死宮內(nèi)以及胎兒流產(chǎn)等情況，同時(shí)染色體核型分析檢驗(yàn)時(shí)間較長，很難被孕婦及家屬所接受。胎兒染色體非整倍體無創(chuàng)基因檢查是現(xiàn)階段興起的一種無創(chuàng)產(chǎn)前診斷手段，具有操作簡便、安全可靠、滿意度高等優(yōu)點(diǎn)?，F(xiàn)選擇2014 年4月至2015年4月在我院進(jìn)行治療的400例孕婦，進(jìn)一步探析無創(chuàng)產(chǎn)前診斷的臨床價(jià)值，研究如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：選擇2014年4月至2015年4月在我院進(jìn)行治療的400例孕婦，年齡范圍22～40歲，平均年齡（29.69±4.34）歲。通過彩超檢查發(fā)現(xiàn)胎兒有異?，F(xiàn)象，均同意進(jìn)行無創(chuàng)基因檢查。

1.2 方法：選用EDTA抗凝采血管，收集5.0 mL外周血。采集完畢后，輕微上下?lián)u晃采血管8次，同時(shí)及時(shí)把采血管置放在4 ℃冰箱內(nèi)保存。①在4 ℃條件下以1600 g進(jìn)行離心，時(shí)間為10 min，于冰盒上把上清液分別裝到2個(gè)已經(jīng)編號(hào)的2.0 mL離心管。②在4 ℃條件下以1600 g進(jìn)行離心，時(shí)間為10 min，于冰盒上把上清液分別裝到新編號(hào)的兩個(gè)2.0 mL離心管內(nèi)，每個(gè)離心管收集600 μL血漿，血漿標(biāo)本劑量至少2.0 mL。在各個(gè)離心管上分別貼上相應(yīng)的條碼，同時(shí)粘貼上血漿標(biāo)本編號(hào)，利用封口膜進(jìn)行密封。血漿分離后及時(shí)保存于低溫環(huán)境中，7 d內(nèi)暫存在零下20 ℃的溫度下。挑選合格的送檢標(biāo)本，然后提取游離DNA片段，分別在血漿游離DNA片段的兩端按裝接頭，組成DNA文庫。

1.3 數(shù)據(jù)分析及診斷檢查：按照人類基因組的不同染色體上唯一基因序列片段及特定位點(diǎn)的特征，對比得到檢測的各個(gè)序列位置信息，同時(shí)定位于相應(yīng)的染色體上。并且結(jié)合統(tǒng)計(jì)分析位于每條染色體上的序列條數(shù)，計(jì)算獲得染色體的比例（即為覆蓋深度），作為判斷風(fēng)險(xiǎn)的風(fēng)險(xiǎn)指數(shù)值。存在非整體胎兒DNA母血標(biāo)本異常染色體上的序列條數(shù)與正常二倍體相比較多，通過生物信息工具進(jìn)行放大并分析血標(biāo)本不同染色體含量之間的差異，進(jìn)而有效識(shí)別胎兒染色體非整體異常。診斷依據(jù)，通過無創(chuàng)產(chǎn)前基因檢查顯示陽性，則需要進(jìn)一步進(jìn)行臍血穿刺或羊水穿刺，通過細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)施染色體核型進(jìn)行確診。

2 結(jié) 果

2.1 無創(chuàng)產(chǎn)前基因檢查：無創(chuàng)產(chǎn)前基本檢查400例患者中，結(jié)果陽性者12例（3.0%），包括21三體綜合征者4例，18三體綜合征者2例，13三體綜合征者1例，性染色體異常者3例，其他染色體異常者2例；結(jié)果陰性者388例（97.0%）。

2.2 羊水或臍血染色體核型分析：基因組測序12例陽性患者中，21三體綜合征、18三體綜合征、13三體綜合征者均通過臍血穿刺細(xì)胞培養(yǎng)或者羊水穿刺染色體核型分析，21三體綜合征者4例（其中唐篩高風(fēng)險(xiǎn)者2例，臨街風(fēng)險(xiǎn)者1例，低風(fēng)險(xiǎn)者1例），18三體綜合征者2例，13三體綜合征者1例。其中，1例21三體綜合征及1例18三體綜合征經(jīng)無創(chuàng)產(chǎn)前基因檢查顯示假陽性，實(shí)施染色體核型分析顯示正常。

3 討 論

以往研究曾指出［2］，孕婦血漿內(nèi)游離的CFF-DNA，該部分DNA特定序列能夠被穩(wěn)定的擴(kuò)增、分析，為無創(chuàng)產(chǎn)前診斷創(chuàng)造了有力條件。本次無創(chuàng)產(chǎn)前基因測序，基因組測序12例陽性患者中，21三體綜合征者4例（33.33%），包括唐篩高風(fēng)險(xiǎn)者2例，臨街風(fēng)險(xiǎn)者1例，低風(fēng)險(xiǎn)者1例。說明存在臨街風(fēng)險(xiǎn)、低風(fēng)險(xiǎn)的患者，確診為21三體綜合征的概率比較高?，F(xiàn)階段，諸多醫(yī)療機(jī)構(gòu)對臨街風(fēng)險(xiǎn)、高風(fēng)險(xiǎn)人群予以產(chǎn)前診斷，但低風(fēng)險(xiǎn)人群很容易被忽略，臨床應(yīng)給予高度的重視，避免漏診的發(fā)生。產(chǎn)前診斷指征通常為高齡、孕11～14周B超檢查NT異常、臨街風(fēng)險(xiǎn)、孕中期唐氏生化免疫篩查高危等［3-6］，由此我們建議孕婦在12～24周時(shí)實(shí)施大規(guī)模并行基因組測序，若發(fā)現(xiàn)高危因素，應(yīng)進(jìn)一步采取介入產(chǎn)前診斷，提高診斷的準(zhǔn)確性。無創(chuàng)產(chǎn)前基因檢測診斷胎兒染色體非整倍體異常，具有操作簡便、安全性高、準(zhǔn)確性高、檢測時(shí)間短等諸多優(yōu)點(diǎn)，極大程度的提高了產(chǎn)前診斷的有效率，具有極高的臨床價(jià)值。

參考文獻(xiàn)

［1］邱潔，楊曉華，鄧細(xì)娣，等.無創(chuàng)產(chǎn)前診斷在產(chǎn)前篩查后續(xù)診斷的臨床實(shí)施與綜合效益分析［J］.中國優(yōu)生與遺傳雜志，2013，21（7）: 21-22.

［2］張磊，王威.無創(chuàng)產(chǎn)前基因檢測胎兒染色體非整倍體技術(shù)研究及應(yīng)用進(jìn)展［J］.中國產(chǎn)前診斷雜志，2012，4（3）:32-33.

［3］李玉芝，任景慧，林琳華.大規(guī)模并行基因組測序技術(shù)應(yīng)用于無創(chuàng)產(chǎn)前診斷染色體非整倍體的研究［J］.華中科技大學(xué)學(xué)報(bào)，2012，41（4）:475.

［4］鐘惟娜，鄧學(xué)東.產(chǎn)前超聲檢查在診斷染色體非整倍體異常胎兒中的價(jià)值［J］.中華醫(yī)學(xué)超聲雜志（電子版），2012，9（9）:792-796.

［5］唐坤強(qiáng).中孕期非整倍體染色體異常血清學(xué)篩查不同方案比較［J］.中國醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2015，12（3）:134-137.

［6］金玉霞，苗正友，葛加美，等.應(yīng)用大規(guī)模平行基因組測序技術(shù)無創(chuàng)產(chǎn)前診斷胎兒常見染色體非整倍體異常［J］.中華醫(yī)學(xué)雜志，2014，100（23）:1785-1787.

中圖分類號(hào)：R714.53

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B

文章編號(hào)：1671-8194（2016）13-0139-01