馬傳江，曹廣尚，楊培民，逯　雙（山東中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院藥學(xué)部，濟(jì)南　250011）

綿馬貫眾的鑒定、化學(xué)成分及藥理作用研究進(jìn)展Δ

馬傳江＊，曹廣尚，楊培民#，逯雙（山東中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院藥學(xué)部，濟(jì)南250011）

目的：為進(jìn)一步研究綿馬貫眾提供參考。方法：以“綿馬貫眾”“貫眾”“化學(xué)成分”“鑒別測(cè)定”“藥理作用”“Dryopteris crassirhizoma”“Chemical composition”“Pharmacological actions”等為

，組合查詢2003年1月－2016年2月在PubMed、中國(guó)知網(wǎng)、萬方、維普等數(shù)據(jù)庫(kù)中的相關(guān)文獻(xiàn)，對(duì)綿馬貫眾的鑒別測(cè)定、化學(xué)成分及藥理作用進(jìn)行綜述。結(jié)果：共檢索到相關(guān)文獻(xiàn)152篇，其中有效文獻(xiàn)47篇。綿馬貫眾又稱貫眾、東北貫眾，藥源植物品種廣泛、復(fù)雜，偽品、混淆品眾多，多從性狀、顯微、理化及含量測(cè)定等方面對(duì)綿馬貫眾進(jìn)行鑒別。綿馬貫眾主要化學(xué)成分為間苯三酚類、萜類、黃酮類、甾醇及揮發(fā)油等，具有抗病毒、抗菌、驅(qū)蟲、止血等藥理作用。結(jié)果：目前多對(duì)間苯三酚類成分綿馬貫眾素進(jìn)行含量測(cè)定，對(duì)其他活性成分含量測(cè)定及提取純化工藝鮮有報(bào)道，今后可結(jié)合藥理作用對(duì)其活性成分進(jìn)一步提取并測(cè)定含量。綿馬貫眾最突出的藥理作用為抗病毒和抗菌，但其發(fā)揮藥效的作用機(jī)制研究并不明確，下一步可通過完善抗病毒藥物的篩選系統(tǒng)對(duì)其進(jìn)行研究。

綿馬貫眾；鑒別測(cè)定；化學(xué)成分；藥理作用；研究進(jìn)展

綿馬貫眾為鱗毛蕨科植物粗莖鱗毛蕨（Dryopteris crassirhizoma Nakai）的干燥根莖和葉柄殘基，又稱為貫眾、東北貫眾，主產(chǎn)于我國(guó)東北黑龍江、吉林、遼寧三省山區(qū)[1]。其味苦，性微寒，有小毒，歸肝、胃經(jīng)，具有清熱解毒、止血、殺蟲的功效，臨床用于時(shí)疫感冒、風(fēng)熱頭痛、溫毒發(fā)斑、瘡瘍腫毒、崩漏下血、蟲積腹痛等多種疾病的治療[2]。貫眾藥源植物品種廣泛，偽品、混淆品眾多，鮮有研究鑒定其品種資源并對(duì)其藥學(xué)指標(biāo)進(jìn)行綜合報(bào)道的。筆者以“綿馬貫眾”“貫眾”“化學(xué)成分”“鑒別測(cè)定”“藥理作用”“Dryopteris crassirhizoma”“Chemical composition”“Pharmacological actions”等為關(guān)鍵詞，組合查詢2003年1月－2016年2月在PubMed、中國(guó)知網(wǎng)、萬方、維普等數(shù)據(jù)庫(kù)中的相關(guān)文獻(xiàn)。結(jié)果，共檢索到相關(guān)文獻(xiàn)152篇，其中有效文獻(xiàn)47篇?，F(xiàn)對(duì)綿馬貫眾的鑒別與測(cè)定、化學(xué)成分及藥理作用進(jìn)行綜述，以期為進(jìn)一步研究綿馬貫眾提供參考。

1　綿馬貫眾的鑒別與測(cè)定

綿馬貫眾藥理作用眾多、應(yīng)用廣泛，但因貫眾藥源植物品種廣泛、復(fù)雜，臨床使用的貫眾并非都為《中國(guó)藥典》收載的正品。汪敏等[3]報(bào)道，曾用作貫眾的原植物有11科18屬58種；20世紀(jì)80年代的調(diào)查結(jié)果表明，用作貫眾的藥源植物有27種；而截至2009年，仍有7種植物被作為貫眾的藥源植物在使用。高增平等[4]經(jīng)過對(duì)來自18個(gè)省市的23份商品貫眾樣品的性狀和顯微鑒定表明，其原植物來源有5種?！吨袊?guó)藥典》對(duì)貫眾的品種規(guī)定也有多次改動(dòng)，1995年版、2000年版、2005年版僅收錄綿馬貫眾一種，2010年版及2015年版又增加紫萁貫眾[5-6]。目前臨床大部分使用的貫眾來自不同地區(qū)不同科屬的蕨類植物，因各品種具有的活性成分不盡相同，所以無法達(dá)到與綿馬貫眾同等的藥效作用，從而不利于病情治療。因此，如何鑒定綿馬貫眾以區(qū)別于其他貫眾品種，使其更好應(yīng)用于臨床，具有重要意義。

1.1性狀鑒別

通過比較綿馬貫眾與其他品種貫眾的形狀、大小、顏色、表面、氣味、質(zhì)地等性狀特征，以鑒別出綿馬貫眾。其應(yīng)呈長(zhǎng)倒卵形，略彎曲，上端鈍圓或截形，下端較尖，有的縱剖為兩半，長(zhǎng)7～20 cm，直徑4～8 cm；表面黃棕色至黑褐色，密被排列整齊的葉柄殘基及鱗片，并有彎曲的須根；質(zhì)堅(jiān)硬，斷面略平坦，深綠色至棕色，有黃白色維管束5～13個(gè)，環(huán)列，其外散有較多的葉跡維管束；氣特異，味初淡而微澀，后漸苦、辛[7]。而其偽品紫萁貫眾、狗脊蕨、莢果蕨貫眾、峨嵋蕨貫眾、烏毛蕨、蘇鐵蕨等貫眾品種的性狀均與綿馬貫眾有較大的差別[8-10]。

1.2顯微鑒別

通過比較綿馬貫眾與其他品種貫眾橫切片的維管束形狀、數(shù)目、排列特征、分泌物的有無等顯微特征確定綿馬貫眾。其葉柄殘基應(yīng)呈扁圓形，長(zhǎng)3～5 cm，直徑0.5～1.0 cm；表面有縱棱線，質(zhì)硬而脆，斷面略平坦，棕色，有黃白色維管束5～13個(gè)，環(huán)列；每個(gè)葉柄殘基的外側(cè)常有3條須根，鱗片條狀披針形、全緣，常脫落[1，11]。高增平等[4]將各樣品的葉柄基部橫切片置于顯微鏡下觀察其顯微特征，以鑒別貫眾原植物來源。

1.3理化鑒別

利用薄層色譜（TLC）法可測(cè)定出綿馬貫眾間苯三酚衍生物等抗病毒的有效成分，紫外光譜（UV）可測(cè)定貫眾品種特定的最大吸收波長(zhǎng)，因此可將TLC、UV技術(shù)應(yīng)用于綿馬貫眾的鑒別。周小菲[12]采用TLC法鑒別綿馬貫眾間苯三酚類成分，梁洪華等[13]采用TLC法鑒別抗感顆粒中的綿馬貫眾。

1.4含量測(cè)定

建立方法對(duì)綿馬貫眾的有效成分進(jìn)行含量測(cè)定，可明確綿馬貫眾的用藥基礎(chǔ)。柳芳等[14]采用高效液相色譜（HPLC）法測(cè)定具有抗艾滋病毒和抗瘧活性的黃酮類成分去甲氧基莢果蕨素，并建議將去甲氧基莢果蕨素的含量納入綿馬貫眾藥材及飲片的質(zhì)量控制指標(biāo)中。肖國(guó)君、周鵬、司云珊等[15-17]采用HPLC法、反相（RP）-HPLC法測(cè)定綿馬貫眾中綿馬貫眾素的含量；高增平等[18]采用可見分光光度法測(cè)定總間苯三酚的含量；陳建新等[19-20]采用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法、液相色譜-電噴霧串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定綿馬貫眾抗禽流感病毒活性部位，并推測(cè)其結(jié)構(gòu)成分。

2　綿馬貫眾的化學(xué)成分

2.1間苯三酚類化合物

綿馬貫眾的活性成分主要是間苯三酚衍生物類，具有抗菌、抗病毒、抗腫瘤、抗瘧等活性。目前從該植物中分得15個(gè)間苯三酚類單體化合物，主要有白綿馬素AP、白綿馬素PP、白綿馬素AA和綿馬貫眾素ABBA、綿馬酸ABA以及綿馬酸BBB、綿馬酸PBB、綿馬酸PBP、黃綿馬酸AB、黃綿馬酸BB、黃綿馬酸PB等[1，19，21]。根據(jù)所含苯環(huán)的個(gè)數(shù)，可將已分離得到的該類化合物分為6大類型，單環(huán)類含有5種類型6個(gè)化合物；二環(huán)間苯三酚類主要代表物有albaspidin AA、albaspidin AP、albaspidin PP、aspidin AB、flavaspidicacid AB、flavaspidicacid PB、nomavaspidieacid AB、aemulin BB；三環(huán)間苯三酚類主要代表物有filixieacid ABA、trisnavaspidieacid ABB、filixieacid BBB、filixieacid ABB；四環(huán)、五環(huán)和六環(huán)類化合物數(shù)目都較少，其中四環(huán)主要代表物有dryocrassin ABBA、dryocrassin ABBP、dryocrassin ABAA；五環(huán)類迄今為止人們分離得到并鑒定出結(jié)構(gòu)的只有1個(gè)化合物，即penta-albaspidin BBBBB；六環(huán)類有3個(gè)化合物，即hexa-albaspidin BBBBBB、hexa-flavaspidicacid BBBBBB、ABBBBB（A：acetyl；B：butyryl；P：propionyl）[22-23]。

2.2萜類化合物

迄今為止，已從綿馬貫眾分離得到13種萜類化合物，倍半萜結(jié)構(gòu)化合物只有4個(gè)，即albicanol、albicanyl-acetate、a-cadiene和conicumol，剩余均為五環(huán)三萜類苷元，結(jié)構(gòu)屬于何伯烷型和異何伯烷型。主要為雁齒烯、東北貫眾醇、東北貫眾醇乙酸酯、tris-norhopane、17-α-H-trisnorhopan-21-one、17-β-H-trisnorhopan-21-one、鐵線蕨酮、異鐵線蕨酮、羊齒三萜、異羊齒三萜、fem-7-ene、ferna-7-9（11）-diene、羊齒三萜酮、neohop-12-ene、neohop-13（18）-ene、22-hydroxyhopane、hop-22（29）-ene[24-25]。

2.3黃酮類化合物

該類化合物發(fā)現(xiàn)的數(shù)量不多，代表性的有4種，分別為crassirhizomoside A，B，C和sutchuenoside A，其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是：5位和4位羥基取代，3位和7位分別連有1個(gè)單糖形成苷。主要含貫眾苷、異槲皮素、異槲皮苷、紫云英苷等多種黃酮類物質(zhì)。研究證實(shí)，該黃酮類化合物具有抗菌、抗癌、抗氧化，并影響心腦血管等作用[23，25-26]。

2.4其他類

袁麗鵬等[27]首次在綿馬貫眾石油醚部位分離出膽甾-4-烯-3-醇、海綿甾醇、木栓內(nèi)酯、西瑞香素。研究表明，該植物中還含有β-谷甾醇、菜油甾醇、質(zhì)體藍(lán)素[25]、茶烯-b、鐵線蕨酮等化學(xué)成分[28]。

3　綿馬貫眾的藥理作用

3.1抗病毒作用

黃海英等[29]采用雞胚體外抗病毒實(shí)驗(yàn)方法評(píng)價(jià)綿馬貫眾抗鼠肺病毒FM1株的療效，結(jié)果表明，綿馬貫眾對(duì)甲型流感病毒FM1株有預(yù)防及直接抗病毒作用。徐程等[30]研究表明，綿馬貫眾乙醇提取物、乙醚提取物和水提取物均有抗甲型流感病毒FM1株的作用。孫科峰等[31]研究表明，綿馬貫眾水、乙醇兩種提取物對(duì)流感病毒（FM1株）、呼吸道合胞病毒（Long）、副流感病毒（Ⅰ型、Ⅲ型）、腺病毒（AD3）均有一定抗病毒作用。楊潔等[32]采用體外細(xì)胞培養(yǎng)法、染料攝入法檢測(cè)板蘭根、黃芪、貫眾、紫花地丁、大黃這5種中藥抗病毒作用，結(jié)果表明這5種中藥提取物均具有明顯的抗呼吸道合胞病毒（RSV）、抗柯薩奇病毒A16、柯薩奇病毒B1、柯薩奇病毒B3、柯薩奇病毒B4的作用。王國(guó)霞[33]選用中草藥進(jìn)行體外抗病毒試驗(yàn)，評(píng)價(jià)其抗H9N2亞型禽流感病毒的活性，結(jié)果表明，貫眾具有直接滅活病毒的作用。張強(qiáng)等[34]通過建立人工感染雞傳染性法氏囊病病毒（IBDV）模型，驗(yàn)證了綿馬貫眾可溶性粉對(duì)IBDV有較好的治療效果。

3.2抗菌作用

趙薇等[35]研究認(rèn)為，貫眾經(jīng)乙醇粗提并且乙酸乙酯萃取部分中含有多種活性組分，具有較強(qiáng)的抑制及殺滅金黃色葡萄球菌作用。王錚等[36]研究顯示，與系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）模型組比較，貫眾總多糖組（15、30 mg/kg）可顯著改善SLE模型小鼠體質(zhì)量下降（P＜0.05），降低小鼠抗自身抗體和總免疫球蛋白G（IgG）水平，抑制尿蛋白的升高，改善腎病理?yè)p傷，表明貫眾總多糖對(duì)空腸彎曲桿菌CJ-S131誘導(dǎo)的紅斑狼瘡樣綜合征小鼠有保護(hù)作用。陳紅云等[37]研究報(bào)道，貫眾對(duì)痢疾桿菌、傷寒桿菌、大腸埃希菌、變形桿菌、綠膿桿菌、柘草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌及部分皮膚真菌均有不同程度的抑制作用。

3.3驅(qū)蟲作用

許正敏等[38]應(yīng)用鉤蚴體外方法，觀察貫眾對(duì)鉤蚴的毒性作用，結(jié)果表明，貫眾對(duì)犬鉤蚴的發(fā)育有明顯的抑制作用。彭亮等[39]研究表明，貫眾在抑菌的同時(shí)也能驅(qū)蛔蟲和弓形蟲。宋偉[40]研究報(bào)道，貫眾對(duì)動(dòng)物血吸蟲病的實(shí)驗(yàn)治療有顯著療效，對(duì)日本血吸蟲、豬蛔蟲、綿羊肺線蟲、肝吸蟲的活動(dòng)有不同程度的抑制作用，能驅(qū)除牛肝蛭等。

3.4止血作用

胡栢惠等[41]報(bào)道，運(yùn)用貫眾配伍他方治療崩漏、月經(jīng)過多、產(chǎn)后惡露不絕等婦科出血證，屢用屢有效，表明其有止血作用。

3.5其他活性

綿馬貫眾還具有抗瘧、抗炎鎮(zhèn)痛、抗腫瘤、抗氧化、抗白血病等作用[40，42-45]。

4　結(jié)語(yǔ)

迄今為止，研究綿馬貫眾藥理文獻(xiàn)的年限較久遠(yuǎn)，特別是近年來只針對(duì)綿馬貫眾的研究較少。而貫眾品種資源豐富，研究囊括多種原植物，別名眾多，臨床用藥品種不一，因此對(duì)其正品研究鑒別測(cè)定方法以規(guī)范臨床用藥具有重要意義。為規(guī)范臨床用藥，以《中國(guó)藥典》規(guī)定的“綿馬貫眾”名稱對(duì)本藥進(jìn)行系統(tǒng)整理，研究發(fā)現(xiàn)目前多采用傳統(tǒng)手段，從性狀、顯微及理化等方面對(duì)綿馬貫眾進(jìn)行鑒別；但對(duì)多來源藥材，或是已失去原本性狀的藥材，較難分辨其真?zhèn)渭捌焚|(zhì)好壞，因此需要與現(xiàn)代新鑒定技術(shù)[46-47]結(jié)合進(jìn)行藥材鑒定。綿馬貫眾活性成分主要包括間苯三酚類、萜類、黃酮類等，目前多對(duì)間苯三酚類物質(zhì)綿馬貫眾素進(jìn)行含量測(cè)定，對(duì)其他活性成分含量測(cè)定及提取純化工藝鮮有報(bào)道，今后可結(jié)合藥理作用對(duì)其活性成分進(jìn)一步提取并測(cè)定含量。綿馬貫眾最突出的藥理作用為抗病毒和抗菌，但其發(fā)揮藥效的作用機(jī)制并不明確，下一步可通過完善抗病毒藥物的篩選系統(tǒng)對(duì)其進(jìn)行研究，有助于其進(jìn)一步合理開發(fā)，實(shí)現(xiàn)藥材資源的有效利用。

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（編輯：余慶華）

R282；R285

A

1001-0408（2016）28-4013-03

10.6039/j.issn.1001-0408.2016.28.38

山東省高校中醫(yī)藥抗病毒協(xié)同創(chuàng)新中心資助項(xiàng)目（No.XTCX2014C-02）

＊副主任藥師。研究方向：中藥制劑。電話：0531-68617981。E-mail：mcj77777@163.com

教授，博士生導(dǎo)師。研究方向：中藥制劑。電話：0531-68617607。E-mail：jnypm7777@163.com

（2015-12-16

2016-05-19）