南香蘭

不同炮制方法在大黃遺傳毒性減毒中的應(yīng)用價值探究

南香蘭

目的 探究不同炮制方法在大黃遺傳毒性減毒中的應(yīng)用價值。方法 分別使用醋蒸法、醋炒法炮制生大黃，建立污染物致突變性檢測（AMES）實驗檢測其效果，比較結(jié)果差異性。結(jié)果 醋蒸［TA97的S9陰性、陽性值分別為（244.5±9.1）、（250.1±8.0）］的大黃樣品除醋蒸樣品在代謝非活化條件下呈陽性外，菌株TA97、TA98、TA100及TA102的致突變性都呈現(xiàn)陰性結(jié)果，醋炒大黃結(jié)果仍呈陽性。結(jié)論 醋蒸法炮制后能有效降低大黃毒作用，醋炒法炮制后大黃減毒效果不明顯。

炮制；大黃遺傳毒性；減毒

【Abstract】

Objective To explore the application value of different processing methods in the genetic toxicity reduction of rhubarb. Methods Using vinegar steamed method，vinegar fried method of raw rhubarb，the establishment of pollutant mutagenicity test experiment to detect its effect，compare the difference between the results. Results Steaming with vinegar［TA97 S9negative and positive values respectively（244.5±9.1），（250.1±8.0）］ of Rhubarb Samples from vinegar steamed samples in non metabolic activation is positive，strains TA97，TA98，TA100 and TA102 induced mutagenicity showed negative results，vinegar fried rhubarb results is still positive. Conclusion With vinegar steaming method can effectively reduce the large effect of vinegar fried by pornography，vinegar fried method of the effect is not obvious.

【Key words】Processing，Rhubarb genetic toxicity，Attenuated

大黃具有清濕熱、攻積滯、祛瘀、解毒等功效［1］，主要成分為蒽醌類衍生物，能以游離狀態(tài)存在，也可以結(jié)合存在［2］。但大黃在有藥用價值之余也存在一定毒性作用［3］。有研究顯示［4］，大劑量生大黃片可導(dǎo)致受孕雌性大鼠出現(xiàn)虛證表現(xiàn)，增加死胎率。本次研究分別使用醋蒸法、醋炒法炮制200 g生大黃，探究不同炮制方法在大黃遺傳毒性減毒中的應(yīng)用價值。報道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料

將同批次的200 g生大黃中藥材分成2組，每組100 g，分別使用醋蒸法、醋炒法進行炮制。實驗使用試劑有二甲基亞砜、敵克松等。使用菌株為組氨酸營養(yǎng)缺陷型鼠傷寒沙門菌TA97、TA98、TA100及TA102，經(jīng)專家鑒定符合實驗要求。

1.2方法

1.2.1炮制方法 分別使用醋蒸法、醋炒法進行炮制100 g生大黃中藥材。醋蒸法：向100 g生大黃中加入18 g醋，其攪拌均勻后，將醋與生大黃混合物放入鍋中加熱，蒸透30 min后取出，放涼備用。

醋炒法：向100 g生大黃中加入18 g醋，均勻攪拌，醋與生大黃混合物悶透后，將其放入鍋中翻炒，至大黃表面呈焦黃色后取出放涼備用。

1.2.2污染物致突變性檢測（AMES）實驗方法 使用平皿摻入法，大黃濃度梯度分別為每表面皿0.05 mg、0.05 mg、0.10 mg、0.50 mg、2.50 mg、5.00 mg檢測突變性，經(jīng)過2種炮制方法后使用毒性最強的5.00 mg/表面皿的生大黃濃度進行實驗，陽性對照：代謝活化組使用20μg/表面皿的2-AF；TA100非代謝活化使用50 pg/表面皿的疊氮鈉；其它菌株非代謝活化時使用50μg/表面皿的敵克松。陰性對照：0.1 ml/表面皿的二甲基亞砜。

1.3觀察指標(biāo)

觀察記錄使用不同炮制方法后大黃的AMES實驗結(jié)果。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法

根據(jù)SSPS 19.0統(tǒng)計學(xué)軟件對收集到的研究資料和數(shù)據(jù)進行分析處理，計量資料采用t 檢驗，以表示。P＜0.05表明差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2　結(jié)果

生大黃菌株TA97的S9陰性、陽性值分別為（451.3±7.4）、（410.5±6.8），TA98的S9陰性、陽性值分別為（44.5±12.1）、（46.7±10.8），TA100的S9陰性、陽性值分別為（363.2±7.2）、（390.1±5.9），TA102的S9陰性、陽性值分別為（443.7±8.7）、（458.2±9.2）。醋蒸法菌株TA97的S9陰性、陽性值分別為（244.5±9.1）、（250.1±8.0），TA98的S9陰性、陽性值分別為（50.3±6.8）、（41.3±8.6），TA100的S9陰性、陽性值分別為（142.3±9.3）、（162.2±6.0），TA102的S9陰性、陽性值分別為（432.2±7.9）、（242.4±7.6）。醋炒法菌株TA97的S9陰性、陽性值分別為（431.3±8.0）、（397.1±7.2），TA98的S9陰性、陽性值分別為（41.5±9.2）、（37.2±10.3），TA100的S9陰性、陽性值分別為（168.3±8.2）、（177.3±9.4），TA102的S9陰性、陽性值分別為（465.9±8.1）、（422.1±6.8）。醋蒸大黃樣品除醋蒸樣品在代謝非活化條件下呈陽性外，菌株TA97、TA98、TA100及TA102的致突變性都呈現(xiàn)陰性結(jié)果，醋炒大黃結(jié)果仍呈陽性。

3討論

大黃藥性一般情況下較為安全，但大量使用生大黃后易導(dǎo)致中毒，出現(xiàn)惡心嘔吐、腹絞痛等癥狀［5］。進行炮制后應(yīng)用于臨床治療，可降低毒副作用，但炮制方法繁多，尋找有效降低生大黃遺傳毒性的炮制方法尤為重要。

大黃在加工、炮制過程中，以結(jié)合方式存在的蒽醌類物質(zhì)減少，游離狀態(tài)蒽醌類物質(zhì)增大，減弱瀉下作用［6］。醋蒸炮制后，大黃在高溫條件下蒽醌化合物苷鍵出現(xiàn)斷裂，產(chǎn)生毒性較弱的游離態(tài)蒽醌物質(zhì)，降低大黃遺傳毒性［7］。污染物致突變性實驗可用來進行環(huán)境毒理學(xué)實驗分析［8］，本次研究顯示，醋蒸大黃樣品除醋蒸樣品在代謝非活化條件下呈陽性外，菌株TA97、TA98、TA100及TA102的致突變性都呈現(xiàn)陰性結(jié)果，醋炒大黃結(jié)果仍呈陽性。

［1］ 鄒志遠，宋有濤，楊雷，等. 不同炮制方法對大黃的遺傳毒性的減毒效果的研究［J］. 遼寧大學(xué)學(xué)報：自然科學(xué)版，2011，38（4）：338-342.

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Application Value of Different Processing Methods in the Genetic Toxicity of Rhubarb

NAN Xianglan Bureau of Traditional Chinese Medicine，The People's Hospital of Hunchun City，Hunchun Jilin 133300，China

R28

A

1674-9316（2016）17-0147-03

10.3969/j.issn.1674-9316.2016.17.101

吉林省琿春市人民醫(yī)院中藥局，吉林 琿春133300