柳毅

（河北省保定市產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)所，河北保定071051）

牛乳中摻防腐添加物的檢驗(yàn)及評(píng)價(jià)

柳毅

（河北省保定市產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)所，河北保定071051）

牛乳；防腐劑；檢驗(yàn)；評(píng)價(jià)

生鮮牛乳屬高危險(xiǎn)性食品原料，乳中微生物種類多、數(shù)量大，會(huì)使牛乳變味，還可能造成巴氏滅菌失敗，導(dǎo)致成品如中細(xì)菌超標(biāo)，保質(zhì)期縮短，危害人體健康。一些企業(yè)或個(gè)人往往在牛乳中添加防腐劑或非法防腐添加物。有些防腐添加物是合法的添加劑，而有些則是對(duì)消費(fèi)者健康構(gòu)成嚴(yán)重危害的化學(xué)物質(zhì)，是國(guó)家法規(guī)嚴(yán)格禁止添加的（如甲醛、過(guò)氧化氫）。本文介紹在牛乳中摻的常見(jiàn)防腐劑（苯甲酸或苯甲酸鈉、水楊酸或水楊酸鈉、甲醛和過(guò)氧化氫等）的檢測(cè)方法和評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)。

1　苯甲酸、水楊酸的檢驗(yàn)

1.1儀器、試劑

250mL蒸餾燒瓶、直型水冷冷凝管、鐵臺(tái)、萬(wàn)能夾、酒精燈、溫度計(jì)、蒸發(fā)皿、試管、水浴鍋等。1:4的硫酸溶液、飽和氯化鈉溶液、10%氫氧化鈉、濃硫酸、濃氨水、硝酸鉀、1%三氯化鐵、10%氫氧化鈉、1:1醋酸溶液、10%硫酸銅溶液、硫化銨溶液（20mL濃氨水中通入硫化氫至不再吸收為止，然后向此溶液中再加入濃氨水20mL，用蒸餾水稀釋至100mL，此試劑不宜保存，應(yīng)在臨用時(shí)配制）。

1.2操作步驟

在蒸餾燒瓶中加入25mL待檢乳樣、4mL 1:4的稀硫酸和80mL飽和氯化鈉溶液，加入一小塊沸石然后裝成蒸餾裝置。用酒精燈加熱蒸餾燒瓶，同時(shí)收集餾出液至約50～60mL，停止加熱，餾出液留作檢驗(yàn)苯甲酸和水楊酸。

1.3苯甲酸的檢驗(yàn)

苯甲酸經(jīng)硝化后可形成3，5-二硝基苯甲酸，該化合物經(jīng)還原后可產(chǎn)生紅棕色的3，5-二氨基苯甲酸。取10mL餾出液與0.5mL10%的氫氧化鈉于蒸發(fā)皿中，蒸干，冷卻后在殘?jiān)屑尤?mL濃硫酸和0.1g硝酸鉀，沸水浴上加熱20min，放冷。向蒸發(fā)皿中加入蒸餾水2mL及濃氨水10mL（用試紙檢驗(yàn)，應(yīng)呈顯著堿性），煮沸后放冷，將溶液轉(zhuǎn)移到試管中，傾斜試管，小心沿管壁加入新制備的硫化銨溶液約5mL，應(yīng)使液體分成兩層，勿使混合。如果在液體交界處有紅棕色輪帶出現(xiàn)，證明有苯甲酸存在。

1.4水楊酸的檢驗(yàn)取1mL上述蒸餾液，加入4～5滴10%的氫氧化鈉溶液、4～5滴1:1的醋酸溶液及1滴10%的硫酸銅溶液，混合均勻后加熱煮沸30s，放冷。

1.5評(píng)價(jià)與判斷若有磚紅色出現(xiàn)，可確證為有水楊酸及其鹽存在。

2　苯甲酸和山梨酸的薄層色譜檢驗(yàn)

2.1儀器、試劑薄層掃描儀、烘箱、水浴鍋、薄層板、展開(kāi)缸或展開(kāi)槽、定量點(diǎn)樣器、分液漏斗、三角瓶等。展開(kāi)劑[正丁醇-氨水-無(wú)水乙醇（7:1:2）、異丙醇-氨水-無(wú)水乙醇（7:1: 2）]、顯色劑（0.04%溴甲酚紫和50%乙醇溶液，用0.1mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)pH值為8）、配制山梨酸和苯甲酸標(biāo)樣濃度為0.1mg/L、聚酰胺粉、鹽酸、乙醚、氯化鈉、無(wú)水硫酸鈉。

2.2檢驗(yàn)方法（1）樣品制備。取2.5g樣品于25mL具塞量筒中，加6mol/L鹽酸0.5mL酸化，用30mL乙醚分2次提取，將上層醚液移入分液漏斗中，用4%氯化鈉酸性溶液3毫升洗2次，靜止15min，分液，將醚液通過(guò)無(wú)水硫酸鈉（脫水）與50mL梨形燒瓶中，在40℃水浴中揮干，加入0.5mL乙醇溶解殘?jiān)鼈溆?。?）鋪板。稱取14g聚酰胺粉，加水30mL，迅速調(diào)成糊狀于涂布器中，將10cm×20cm薄層板涂成0.3mm厚，在空氣中干燥15min，再置105℃烘箱中活化1h備用。（3）點(diǎn)樣。以距底邊1.5cm為基線，從距左邊緣1cm基線處依次間隔1cm點(diǎn)5個(gè)混合標(biāo)樣點(diǎn)，兩個(gè)樣品點(diǎn)，點(diǎn)樣量為2μL，標(biāo)樣濃度分別為0.1ng、0.2ng、0.4ng、0.8ng、1.0ng。（4）展開(kāi)。在展開(kāi)缸或展開(kāi)槽中，先用正丁醇-氨水-無(wú)水乙醇溶液飽和5min，展開(kāi)10min，然后用異丙醇-氨水-無(wú)水乙醇溶液飽和5min，展開(kāi)15min。用顯色劑為0.04%溴甲酚紫和50%乙醇溶液噴霧顯色。（5）采用薄層掃描儀定性、定量分析。400～650nm可見(jiàn)光波長(zhǎng)掃描，“反射”方式檢測(cè)，狹縫為1.4mm×9mm，掃描速率為20mm/min。確定最佳吸收值。以五個(gè)標(biāo)樣點(diǎn)掃描測(cè)定峰面積積分做標(biāo)準(zhǔn)曲線，然后掃描樣品峰面積，通過(guò)回歸計(jì)算得出樣品含量。

2.3評(píng)價(jià)與判斷山梨酸、苯甲酸的參考比值依次為0.82、0.73。

3　甲醛的檢驗(yàn)

甲醛是一種毒性很強(qiáng)，破壞生物細(xì)胞蛋白質(zhì)原生質(zhì)的物質(zhì)，可引起人體過(guò)敏、腸道刺激反應(yīng)、食物中毒等疾患。在食品生產(chǎn)、加工與運(yùn)輸環(huán)節(jié)，一般不容易被甲醛污染。某些食物本底存在幾毫克甚至十幾毫克微量的甲醛不足以對(duì)人體造成危害。由于甲醛可以改變一些食品的色感和味覺(jué)并有防腐作用，在無(wú)知或金錢利益的驅(qū)使下，近年來(lái)一些不法分子在食品中加入甲醛作防腐劑，當(dāng)經(jīng)過(guò)甲醛處理的食品與水接觸后立即釋放出甲醛，嚴(yán)重威脅人體的健康?，F(xiàn)場(chǎng)快速檢驗(yàn)食品中甲醛，對(duì)于食品安全具有十分重要的意義。

近代分析儀器能夠準(zhǔn)確對(duì)一些微量組分進(jìn)行定性、定量分析，技術(shù)方法可靠，依據(jù)充分。取樣品7mL，加pH值為6的乙酸-乙酸銨緩沖液2mL，再加乙酰丙酮1mL，振蕩，離心5min，除去蛋白質(zhì)后，在412nm處用分光光度計(jì)比色?？捎谜？瞻讟悠泛吞砑訕?biāo)準(zhǔn)系列濃度的樣品對(duì)照分析。

方法評(píng)價(jià)：該方法檢測(cè)限為0.5mg/L，線性范圍在0.5～5.00mg/L，測(cè)量精度≤5%。

4　過(guò)氧化氫的檢驗(yàn)

4.1儀器、試劑試管、漏斗、40%三氯乙酸、釩酸銨溶液（1.0g礬酸銨溶于100mL 1:3的稀硫酸中）。

4.2檢驗(yàn)方法在試管中加入5mL待檢乳，向其中滴加40%的三氯乙酸溶液，邊加邊搖，至牛乳中蛋白質(zhì)結(jié)塊凝固，放置5min后過(guò)濾。向?yàn)V液中加入2～3滴礬酸溶液，搖勻，如出現(xiàn)穩(wěn)定的紅色，表示有過(guò)氧化氫存在。

4.3評(píng)價(jià)與判斷過(guò)氧化氫容易分解，所以此項(xiàng)檢驗(yàn)的準(zhǔn)確性與待檢乳的存放時(shí)間有關(guān)。

[1]王錦榮，等.不同天然食品防腐劑對(duì)生鮮牛乳貯存效果的影響[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué).2009（36）.

[2]陳敏，等.食品摻偽檢驗(yàn)技術(shù)[M].化學(xué)工業(yè)出版社，2007，1:96.

10．3969/J.ISSN．1671-6027．2016．10.017

柳毅（1982～），河北省石家莊市人，碩士研究生，工程師，研究方向?yàn)槭称钒踩?/p>