劉義華，李　軻，曾　莎，徐　飛，陳雙峰，丁　潔

(聊城市人民醫(yī)院中心實(shí)驗(yàn)室，山東聊城 252000)

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·論著·

外周血維生素D,IL-6水平評價結(jié)直腸癌轉(zhuǎn)移預(yù)后的應(yīng)用

劉義華，李軻，曾莎，徐飛，陳雙峰，丁潔△

(聊城市人民醫(yī)院中心實(shí)驗(yàn)室，山東聊城 252000)

摘要:目的研究外周血VD、IL-6評價結(jié)直腸癌轉(zhuǎn)移預(yù)后的應(yīng)用。方法病理學(xué)證實(shí)結(jié)直腸癌患者91例，檢測外周血VD、IL-6和CEA水平；采用logistic擬合分析其對結(jié)直腸癌轉(zhuǎn)移預(yù)后評估。結(jié)果結(jié)直腸癌患者轉(zhuǎn)移組VD(6.63±3.90)低于非轉(zhuǎn)移組(10.05±3.98)，P<0.001；轉(zhuǎn)移組IL-6水平為16.13(10.15～43.80)高于非轉(zhuǎn)移組為8.25(4.66～12.15)，P<0.001；轉(zhuǎn)移組CEA為9.49(2.38～117.34)高于非轉(zhuǎn)移組為2.31(1.42～5.91)，P<0.001。CEA與轉(zhuǎn)移ROC曲線AUC=0.693，P=0.002，靈敏度為71.05，特異度為64.15；VD、IL-6及CEA擬合ROC曲線AUC=0.824，P<0.001，靈敏度為73.68%，特異度為83.25%。結(jié)論結(jié)直腸癌患者血清VD、IL-6水平與轉(zhuǎn)移預(yù)后有關(guān)，結(jié)合腫瘤抗原檢測可作為判斷結(jié)直腸癌預(yù)后的新的、有效的生物學(xué)指標(biāo)。

關(guān)鍵詞:維生素D；白介素-6；結(jié)直腸癌

全球每年至少有120萬人被診斷為結(jié)直腸癌，約60萬人因此喪生[1]。造成結(jié)直腸癌患者死亡的主要原因包括局部復(fù)發(fā)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。盡管臨床治療措施不斷改進(jìn)，結(jié)直腸癌患者的5年生存率并未得到改觀，Ⅳ期病患的5年生存率僅略大于10%[1]。并且約有一半的結(jié)直腸癌病患在根治術(shù)前已經(jīng)存在轉(zhuǎn)移[2-3]。因此，監(jiān)測結(jié)直腸癌患者復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移對于降低死亡率，延長生存期具有重要意義。

維生素D(VD)是結(jié)直腸癌發(fā)病的影響因素之一。循環(huán)中VD水平降低可增加腫瘤侵襲風(fēng)險[4]，其代謝產(chǎn)物能夠參與腫瘤微環(huán)境的炎性調(diào)控。炎性細(xì)胞因子IL-6是調(diào)控結(jié)直腸癌進(jìn)展的重要指標(biāo)，對腫瘤細(xì)胞增值有促進(jìn)作用。本研究旨在通過檢測結(jié)直腸癌患者VD3、IL-6和癌胚抗原(CEA)水平，探討其在評價結(jié)直腸癌轉(zhuǎn)移預(yù)后的應(yīng)用價值，現(xiàn)報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料收集本院被確診為結(jié)直腸癌患者連續(xù)病例91例，其中男44例，女46例，年齡26～82歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：經(jīng)病理學(xué)確診的結(jié)直腸癌患者，具有完整臨床和病理資料；無免疫相關(guān)疾病或其他原發(fā)腫瘤病史。以本院健康查體人群50例作為對照組，排除自身免疫相關(guān)疾病及長期服用激素者。

1.2方法

1.2.1采集健康志愿者及患者空腹靜脈血3 mL,3 000 r/min(相對離心力1 600 g)離心5 min，分離血清至-70 ℃貯存。

1.2.2實(shí)驗(yàn)室檢測血清VD采用25-羥基總維生素D定量測定試劑盒(LIAISON 25-OH Vitamin D TOTAL Assay,DiaSorin Inc,USA)，利用LIAISON化學(xué)發(fā)光分析儀檢測，試劑盒檢測范圍為4.0～150 ng/mL。Roche Cobas e 601電化學(xué)發(fā)光儀檢測血清IL-6(Roche Diagnostics GmbH，Germany)與CEA(BeckmanCoulter，USA)水平。IL-6檢測范圍1.5～5 000 pg/mL。CEA檢測范圍為0.1～1 000.0 ng/mL。

2結(jié)果

2.1各組VD、IL-6和CEA檢測結(jié)果結(jié)直腸癌組患者血清VD水平(8.70±4.24)ng/mL低于對照組(23.41±4.11)ng/mL，P<0.001差異具有顯著性；結(jié)直腸癌組血清IL-6為 9.95 (5.96～22.13)ng/mL高于對照組2.11(1.66～2.52)，P<0.001(圖1、表1)；兩組年齡、性別均差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。其中，轉(zhuǎn)移組患者VD(6.63±3.90)ng/mL低于非轉(zhuǎn)移組(10.05±3.98)ng/mL，P<0.001；轉(zhuǎn)移組患者IL-6水平為16.13(10.15～43.80)ng/mL高于非轉(zhuǎn)移組為8.25(4.66～12.15)ng/mL，P<0.001；轉(zhuǎn)移組CEA水平為9.49(2.38～117.34)ng/mL高于非轉(zhuǎn)移組為2.31(1.42～5.91)，P<0.001(圖2、表2)。

圖1　　結(jié)直腸癌組與對照組VD、IL-6的表達(dá)

2.2結(jié)直腸癌組CEA、VD及IL-6與發(fā)生轉(zhuǎn)移ROC曲線分析：結(jié)直腸癌患者CEA與轉(zhuǎn)移的ROC曲線分析，AUC=0.693，P=0.002，靈敏度為71.05%，特異度為64.15%；擬合CEA、VD及IL-6的ROC曲線AUC=0.824，P<0.001(圖3)，靈敏度為73.68%，特異度為83.25%。

表1　　結(jié)直腸癌組與對照組參數(shù)比較分析

圖2　　轉(zhuǎn)移組與非轉(zhuǎn)移組VD、IL-6、CEA的表達(dá)

項(xiàng)目VDIL6CEA轉(zhuǎn)移組6.63±3.9016.13(10.15～43.80)9.49(2.38～117.34)非轉(zhuǎn)移組10.05±3.988.25(4.66～12.15)2.31(1.42～5.91)P<0.001*<0.001△<0.001△

﹡：t檢驗(yàn),△：Mann-WhitneyU檢驗(yàn)。

圖3　　VD、IL-6與CEA ROC曲線分析

3討 論

VD被認(rèn)為是結(jié)直腸癌發(fā)病影響因素之一。美國內(nèi)分泌協(xié)會和國家科學(xué)院醫(yī)學(xué)研究所(IOM)將25(OH)D3<20 ng/mL和小于10 ng/mL 分別定義為VD不足與缺乏。有報道指出循環(huán)血VD水平存在種族差異，并且在亞洲人中表達(dá)偏低[5]。我國上海地區(qū)調(diào)查研究推薦VD正常范圍為20～30 ng/mL[6]。流行病學(xué)資料顯示，與健康人群相比，結(jié)直腸癌患者VD水平降低[1]。在本研究中，結(jié)直腸癌患者血清VD水平顯著低于健康對照組，與既往報道相符，支持低水平VD是結(jié)直腸癌的發(fā)病因素。

VD還可以影響腸內(nèi)疾病的預(yù)后。Charalampopoulos等[7]對140例結(jié)直腸癌病例研究結(jié)果表明晚期患者VD水平低于其他期患者。且有研究支持VD較高的結(jié)直腸癌患者有較好的預(yù)后[8]。本研究結(jié)果顯示，轉(zhuǎn)移結(jié)直腸癌患者血清VD水平顯著低于非轉(zhuǎn)移癌患者，支持VD缺乏提示結(jié)直腸癌預(yù)后不良。VD補(bǔ)充或可作為結(jié)直腸癌一級預(yù)防重要的一環(huán)，同時作為檢測指標(biāo)，評估結(jié)直腸癌轉(zhuǎn)移預(yù)后具有一定的臨床意義。

已有研究證明VD代謝產(chǎn)物在體內(nèi)可發(fā)揮抗增值、促凋亡、抑制腫瘤侵襲與轉(zhuǎn)移等多種生物學(xué)作用，并且與炎癥關(guān)系密切。動物試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)VD缺乏能夠明顯加速炎癥進(jìn)展[9]，補(bǔ)充VD與鈣劑則可減輕炎癥[10]。IL-6是被認(rèn)為與結(jié)直腸癌發(fā)生、發(fā)展有關(guān)的炎性細(xì)胞因子。IL-6可以通過STAT3、NF-κB等信號通路發(fā)揮抗凋亡作用，還可以通過影響免疫細(xì)胞功能，調(diào)控炎性相關(guān)的結(jié)腸癌進(jìn)展。IL-6 能促進(jìn)早期癌變細(xì)胞增殖與腫瘤生長[11]。并且，腸癌進(jìn)展期與晚期轉(zhuǎn)移患者外周血IL-6水平升高[12]，提示IL-6 與患者的臨床分期、病情進(jìn)展密切相關(guān)。本結(jié)果示結(jié)直腸癌患者IL-6水平高于健康人，并且在轉(zhuǎn)移結(jié)直腸癌患者中IL-6水平更高，支持高水平IL-6與結(jié)直腸癌轉(zhuǎn)移有關(guān)。

CEA作為廣譜的腫瘤標(biāo)志物被美國國立綜合癌癥網(wǎng)絡(luò)(NCCN)指南推薦用于結(jié)直腸癌患者診療及隨訪各環(huán)節(jié)。既往研究報道腸癌的CEA陽性率低于50%[13]。術(shù)后結(jié)直腸癌患者隨訪中，出現(xiàn)CEA增高意味著較為嚴(yán)重的復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移已經(jīng)存在。單一指標(biāo)的檢測與評估已難以滿足臨床的需要，尋找高靈敏度、高特異度的評估方法對于監(jiān)測結(jié)直腸癌復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移非常重要。本研究對以上檢測指標(biāo)進(jìn)行了擬合分析，CEA、VD、IL-6聯(lián)合檢測對轉(zhuǎn)移的評估優(yōu)于CEA，提示綜合考慮CEA、VD、IL-6對結(jié)直腸癌轉(zhuǎn)移預(yù)后有較好的評估作用，結(jié)直腸癌患者血清VD與IL-6結(jié)合CEA抗原檢測可作為判斷結(jié)直腸癌預(yù)后的新的、有效的生物學(xué)指標(biāo)。

近年來，早期診斷在某些發(fā)達(dá)國家的開展使結(jié)直腸癌病死率下降[1]。目前我國尚缺乏對結(jié)直腸癌病患隨訪監(jiān)測的早期、敏感、綜合檢測指標(biāo)。在結(jié)直腸癌乃至慢性炎性腸病患者診療及隨訪過程中，開展綜合多指標(biāo)的相關(guān)檢測，對評估結(jié)直腸癌復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移風(fēng)險，選擇適當(dāng)臨床干預(yù)，降低結(jié)直腸癌病死率具有非常重要的意義。

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Application of peripheral blood vitamin D and IL-6 levels in evaluating metastasis prognosis of colorectal cancer

LiuYihua,LiKe,ZengSha,XuFei,ChenShuangfeng,DingJie△

(DepartmentCentralLaboratory,LiaochengMunicipalPeople′sHospital,Liaocheng,Shandong252000,China)

Abstract:ObjectiveTo study the application of peripheral blood vitamin D(VD) and interleukin-6 (IL-6) levels in the evaluation the metastasis prognosis of colorectal cancer.Methods91 patients with pathologically confirmed colorectal cancer were detected peripheral blood VD,IL-6 and CEA levels.The Logistic fitting analysis was used to evaluate metastasis prognosis of colorectal cancer.ResultsThe VD level in the colorectal cancer metastases group was lower than that in the non-metastasis group[ (6.63 ± 3.90) vs.(10.05±3.98),P<0.001];the IL-6 level in the colorectal cancer metastases group was 16.13 (10.15-43.80),which was higher than 8.25(4.66-12.15) in the non-metastasis group(P<0.001),the CEA level in the metastasis group was 9.49 (2.38-117.34),which was higher than 2.31(1.42-5.91) in the non-metastasis group(P<0.001).CEA and transfer ROC curve AUC=0.693,P=0.002,with the sensitivity of 71.05 and the specificity of 64.15;VD,IL-6 and CEA fitting ROC curve AUC=0.824,P<0.001,with the sensitivity of 73.68 and the specificity of 83.25.ConclusionThe peripheral blood VD and IL-6 levels in the patients with colorectal cancer are associated with metastasis prognosis,which combined with tumor antigen detection can be used as the novel and effective biological indicators for evaluating the prognosis of colorectal cancer.

Key words:vitamin D;interleukin 6;colorectal cancer

(收稿日期：2015-08-10)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.01.030

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

文章編號：1673-4130(2016)01-0069-03

作者簡介：劉義華，男，主管檢驗(yàn)師，主要從事腫瘤分子診斷研究?！魍ㄓ嵶髡?，Email：dingjie0635@163.com。