羅云秀，何安兵，羅仁峰，王群，劉愛華，彭秀蘭，童文先，李曉光，田倩，王虎，劉民強

（武漢市五醫(yī)院腫瘤科，湖北武漢430050）

CIK細胞免疫治療對消化系統(tǒng)晚期惡性腫瘤患者的生活質(zhì)量及免疫狀態(tài)的影響

羅云秀，何安兵，羅仁峰，王群，劉愛華，彭秀蘭，童文先，李曉光，田倩，王虎，劉民強

（武漢市五醫(yī)院腫瘤科，湖北武漢430050）

目的評估細胞因子誘導(dǎo)殺傷細胞(CIK)治療晚期消化系統(tǒng)惡性腫瘤對患者生活質(zhì)量及免疫功能的影響。方法選擇2010年1月至2014年12月武漢市五醫(yī)院腫瘤中心治療的64例晚期消化系統(tǒng)腫瘤患者，采用自體單采CIK細胞回輸治療，評估治療前后患者的生活質(zhì)量(KPS評分、睡眠、疼痛、飲食)、輔助檢查(腫瘤標志物、肝功能、腫瘤大小、腹腔積液)及淋巴細胞亞群狀況，并觀察治療的毒副作用。結(jié)果64例患者CIK細胞治療后的KPS評分、睡眠、疼痛、飲食、腫瘤標志物水平有改善，與治療前比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；患者的肝功能，腫瘤大小、腹腔積液、淋巴細胞亞群治療后無明顯改善，與治療前比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)；11例次出現(xiàn)寒顫發(fā)熱等不良反應(yīng)。結(jié)論CIK治療晚期消化系統(tǒng)惡性腫瘤，毒副作用小，可以一定程度的改善患者KPS評分、睡眠、疼痛、飲食及腫瘤標志物水平。肝功能、腫瘤負荷、腹腔積液、免疫功能狀態(tài)在治療后無明顯獲益。

細胞因子誘導(dǎo)殺傷細胞；免疫治療；消化系統(tǒng)腫瘤；生活質(zhì)量；免疫功能

消化系統(tǒng)惡性腫瘤是最常見的惡性腫瘤，其發(fā)病率及死亡率處于惡性腫瘤的前三位。隨著手術(shù)、放療、化療、靶向治療等綜合治療手段的有效應(yīng)用，其生存率取得一定的進步，對于晚期消化系統(tǒng)惡性腫瘤患者，原則以最佳姑息減癥治療為主。隨著分子生物及分子免疫技術(shù)的發(fā)展，腫瘤生物治療以其毒副作用小、特異性殺傷的作用特點逐漸成為惡性腫瘤治療的第四種治療模式，其中，細胞因子殺傷(CIK)生物治療近年來在國內(nèi)臨床應(yīng)用廣泛，本研究主要觀察晚期消化系統(tǒng)惡性腫瘤患者接受CIK細胞治療后的生活質(zhì)量和免疫功能狀態(tài)改善情況。

1 資料與方法

1.1 CIK細胞的制備CIK細胞由深圳中美康士細胞生物有限公司提供，在中美康士生物科技有限公司的生物細胞中心GMP實驗室進行誘導(dǎo)培養(yǎng)，換液及輸注前均進行無菌檢測，檢測結(jié)果均陰性可靜脈輸注，細胞活性＞98%。

1.2 病例選擇經(jīng)院倫理委員會批準，選取本院2010年1月至2014年12月住院病例64例。入選標準：經(jīng)病理、影像等確診的Ⅳ期消化系統(tǒng)惡性腫瘤患者；KPS≥50分，預(yù)計生存時間≥4周；患者有能力履行知情同意并簽署知情同意書。排除標準：嚴重自身免疫性疾病或使用免疫抑制劑者；嚴重凝血功能異常或有活動性出血者；嚴重感染未控制或高熱患者；1個月內(nèi)發(fā)生心肌梗塞患者；頑固性或持續(xù)性癲癇患者；嚴重過敏體質(zhì)患者。

1.3 治療方法CIK細胞在培養(yǎng)第12、13、14天，分別通過輸血器直接靜脈輸注，回輸細胞數(shù)為(1～3)×109/次。

1.4 生活質(zhì)量評估及輔助檢查客觀評價生活質(zhì)量評估包括患者KPS評分、睡眠、疼痛、進食等情況。睡眠和飲食采用EORTC QLQ-C30單項條目評分；疼痛采用NRS及FACES法進行評分。輔助檢查包括腫瘤標志物[癌胚抗原(CEA)、腫瘤抗原125 (CA125)、甲胎蛋白(AFP)、腫瘤抗原199(CA199)]、肝功能、腹腔積液、腫瘤大小等變化情況；根據(jù)irRC標準進行影像療效評價[1]。

1.5 免疫功能評價流式細胞儀檢測治療前后患者的淋巴細胞亞群CD3、CD4、CD8情況，并進行比較。

1.6 統(tǒng)計學(xué)方法應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行數(shù)據(jù)分析，計量數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差(±s)表示，治療前后比較采用配對t檢驗或配對非參數(shù)檢驗，以P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 患者的基本情況64例患者共接受128個療程(1～14個療程/人)CIK細胞免疫治療，其中肝癌患者22例，結(jié)腸癌13例，胃癌12例，患者年齡、性別分布見表1。

表1 CIK細胞生物治療患者基本情況

2.2 輸注不良反應(yīng)及處理CIK細胞輸注過程中11例次發(fā)生寒顫、高熱等不適，輸注30 min～2 h發(fā)生，持續(xù)時間2～6 h，癥狀自行緩解或給予解熱鎮(zhèn)痛、抗過敏治療后緩解。

2.3 免疫功能改善情況接受CIK細胞治療后患者淋巴細胞亞群較治療前均有所升高，但差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，見表2。

表2 CIK細胞生物治療前后淋巴細胞亞群情況(%,±s)

表2 CIK細胞生物治療前后淋巴細胞亞群情況(%,±s)

時間CD3+CD3+CD4+CD3+CD8+CD3+CD4+/CD4+CD8+治療前治療后t值P值55.0±12 58.8±12 -0.652 0.52 17.7±10.1 20.8±10.2 0.542 0.54 17.9±9.1% 19.7±9.5 -0.425 0.67 1.9±2.5 2.1±2.1 -0.067 0.94

2.4 CIK輸注對生活質(zhì)量和輔助檢查的影響CIK治療后患者的生活質(zhì)量(KPS、睡眠、疼痛、飲食)均有改善，特別是治療前KPS≥70分、輕度疼痛、腫瘤負荷較小的患者改善尤為明顯，治療前后比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。腫瘤標志物在治療后下降，與治療前比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。影像學(xué)療效評價顯示0例完全緩解/部分緩解，45例穩(wěn)定，19例出現(xiàn)腫瘤進展。腹圍測量提示腹腔積液有進展趨勢。肝功能、影像評價、腹腔積液治療前后比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，見表3。

表3 CIK細胞生物治療前后生活質(zhì)量評分和輔助檢查比較(分，±s)

表3 CIK細胞生物治療前后生活質(zhì)量評分和輔助檢查比較(分，±s)

時間治療前治療后檢驗值P值KPS 57.97±4.06 61.09±3.62 -5.351 0.000睡眠1.97±0.78 1.67±0.71 4.524 0.000疼痛2.64±1.92 2.36±1.89 4.339 0.000飲食2.38±0.97 2.16±0.90 2.9 0.005腫瘤標志物148.08±457.20 145.88±458.79 -3.942 0.000肝功能27.38±36.64 27.11±35.79 -1.625 0.104影像14.44±5.17 14.6±35.31 -1.706 0.088腹腔積液83.45±7.41 83.55±7.36 -0.852 0.390

3 討論

CIK細胞制備方法簡單，受物理化學(xué)因素的影響小，抗腫瘤作用確切，在國內(nèi)廣泛應(yīng)用于預(yù)防或減少腫瘤患者術(shù)后復(fù)發(fā)與轉(zhuǎn)移[2]，與放化療聯(lián)合應(yīng)用成為進展期惡性腫瘤患者綜合治療的一部分[3-4]，也應(yīng)用于無法接受手術(shù)、放化療的晚期姑息治療患者[5-6]。對于這些腫瘤晚期患者，一般狀況差、各器官機能減退，難以耐受姑息性放化療，CIK細胞生物治療安全、副反應(yīng)少、抗瘤譜廣，可改善上述患者生活質(zhì)量及生存時間[7]。

CIK細胞抗腫瘤機制明確，對于腫瘤細胞數(shù)量低于10×106以下的患者，能促進腫瘤細胞凋亡、免疫功能重建和康復(fù)，并可通過抑制循環(huán)腫瘤細胞數(shù)量來減少腫瘤腫瘤復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移機會[8]。CIK細胞還可能通過釋放顆粒酶/穿孔素等毒性顆粒，導(dǎo)致腫瘤細胞裂解對腫瘤殘存病灶產(chǎn)生殺傷作用[9]，并增加淋巴細胞亞群比率和提高NK細胞活性，刺激機體T細胞增殖而增強患者免疫監(jiān)視作用間接殺傷腫瘤細胞[10]。對于胃腸道腫瘤，CIK細胞通過抑制胃腸道CD4+CD25+Treg細胞而提高機體免疫功能是治療腸癌術(shù)后腫瘤復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移的重要機制[11]。此外，體外培養(yǎng)的CIK細胞可以分泌多種細胞因子，如細胞因子γ干擾素(IFN-γ)、腫瘤壞死因子α(TNF-α)、白細胞介素-2(IL-2)等，可對腫瘤細胞產(chǎn)生直接抑制作用并通過調(diào)節(jié)機體免疫系統(tǒng)反應(yīng)而間接殺傷腫瘤細胞[12]。

相對于放化療所致消化系統(tǒng)及骨髓造血系統(tǒng)方面的較嚴重的毒副作用，CIK細胞治療僅出現(xiàn)寒顫、高熱等類流感樣反應(yīng)，而且研究認為中等以上程度發(fā)熱是治療有效的表現(xiàn)[13]。Meta分析顯示CIK細胞治療可改善患者的KPS評分、睡眠、腫瘤標志物CEA、AFP、CA199、CA724、淋巴細胞亞群[14-15]，這對于晚期惡性腫瘤患者尤為重要。本項研究顯示部分患者CIK治療后腫瘤標志物水平、KPS評分、睡眠、飲食、疼痛評分較治療前有一定程度的改善，與上述文獻報道一致[14]，但本項研究結(jié)果顯示淋巴細胞亞群在治療后無明顯增高、腫瘤負荷和腹腔積液治療后有加重趨勢，分析認為，這與本組研究對象腫瘤負荷過大、分期晚、基線狀態(tài)差有關(guān)[15]。

綜上所述，應(yīng)用CIK細胞治療不能接受手術(shù)、放化療的晚期消化系統(tǒng)惡性腫瘤患者，可改善患者的睡眠、進食、KPS評分、疼痛情況及腫瘤標志物水平，進而提高患者生活質(zhì)量，在改善患者的肝功能、腫瘤負荷、腹腔積液、免疫功能狀態(tài)方面無明顯獲益。

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Effect of CIK immunotherapy on quality of life and immune function in patients with advanced gastrointestinalcancer for CIK cell.

LUO Yun-xiu,HE An-bing,LUO Ren-feng,WANG Qun,LIU Ai-hua,PENG Xiu-lan,TONG Wen-xian,LI Xiao-guang,TIAN Qian,WANG Hu,LIU Min-qiang.Department of Oncology,Wuhan Fifth Hospital,Wuhan 430050,Hubei,CHINA

ObjectiveTo assess the effects of cytkine induced killer(CIK)immunotherapy on quality of life and immune function in patients with advanced gastrointestinal cancer.MethodsSixty-four patients with advanced gastrointestinal cancer in Wuhan Fifth Hospital from January 2010 to December 2014 were treated with CIK immunotherapy.The quality of life(Karnofsky,sleeping,pain,diet),auxiliary examinations(tumor marker,liver function,tumor size, ascites),and status of leukomonocyte subgroup were evaluated before and after CIK treantment.Side effects were observed during treatment.ResultsIn the 64 patients,Karnofsky,sleeping,pain,diet and tumor marker levels were all improved significantly after CIK treantment,compared with those before CIK treatment(P＜0.05).There was no statistically significant difference between before and after CIK treatment in liver function,tumor size,ascites and leukomonocyte subgroup(P＞0.05).Eleven patients suffered from adverse reactions of fever and chill.ConclusionCIK immunotherapy can improve Karnofsky,sleep,pain,diet,and tumor marker levels for patients of advanced gastrointestinal cancer, with no serious side effects.No significant benefit has been obtained after CIK treatment in liver function,tumor size,ascites and immune function.

Cytkine induced killer(CIK);Immunotherapy;Gastrointestinal tumor;Quality of life;Immune function

R735

A

1003—6350（2016）01—0019—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2016.01.007

2015-06-22)

吳階平醫(yī)學(xué)基金會資助項目(編號：320.6750.12174)

羅云秀。E-mail：ruoshuiluo@163.com