白洪達(dá)　程志強(qiáng)　吉林省通榆縣草原管理站　137200姜明達(dá)　吉林省通榆縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心　137200

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動(dòng)物檢疫病料的采取和保存

白洪達(dá)程志強(qiáng)吉林省通榆縣草原管理站137200
姜明達(dá)吉林省通榆縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心137200

動(dòng)物傳染病的種類繁多，病情復(fù)雜，單靠臨床診斷常難以確診，往往需要依靠血清學(xué)、病原學(xué)或病理組織學(xué)檢驗(yàn)等方法協(xié)助診斷。為了達(dá)到早期確診，應(yīng)采取病料送獸醫(yī)檢驗(yàn)部門檢驗(yàn)。

1采取檢驗(yàn)病料的原則

（1）取材動(dòng)物的選擇。如有多數(shù)動(dòng)物發(fā)病或死亡，應(yīng)從癥狀和病變明顯的病例采取。

（2）取材時(shí)間。為了提高檢出率和防止污染，應(yīng)自發(fā)病初期、癥狀明顯且未經(jīng)抗生素治療的動(dòng)物機(jī)體采??；取材時(shí)間應(yīng)在死后數(shù)小時(shí)內(nèi)，尤其在夏季不應(yīng)超過6小時(shí)。動(dòng)物死亡過久，一則尸體腐敗，影響微生物學(xué)檢驗(yàn)和病理檢驗(yàn)，另外動(dòng)物死后其腸道內(nèi)的正常菌群特別是梭菌很快侵入血流和組織內(nèi)，易引起誤診。

（3）無菌操作。要求做到采病料的器械經(jīng)煮沸或高壓滅菌處理。盛病料的容器應(yīng)經(jīng)滅菌處理，且一種病料只能放在一個(gè)容器（如小食品袋）內(nèi)。采集實(shí)質(zhì)器官時(shí)應(yīng)在切開肌肉或腦、胸、腹腔后，立即采取，以保持病料的新鮮和不受污染。應(yīng)先采病料后檢查病變。病料塊可適當(dāng)大些，保證病料內(nèi)部不被污染，以便化驗(yàn)室人員從病料內(nèi)部采取供微生物檢驗(yàn)用的病料。

（4）取材部位的選擇。根據(jù)臨床上懷疑的傳染病，采取相應(yīng)的檢材，如疑為狂犬病，應(yīng)采取腦和脊髓。對(duì)難以確定的病種，則可根據(jù)臨床癥狀和病變?nèi)〔幕虿扇∪砀鞣N器官組織。

2　病料采取的方法

（1）供微生物學(xué)檢驗(yàn)的病料的采取方法。膿汁、鼻汁、陰道分泌物、胸或腹水：液體量多且較稀薄時(shí)，可用滅菌注射器抽取，放入滅菌的青霉素、鏈霉素小瓶?jī)?nèi)；如腋汁黏稠不易抽取，可向膿腫內(nèi)注入1～2mL滅菌生理鹽水或磷酸緩沖液，然后反復(fù)抽取。分泌物黏稠且量少時(shí)，可用滅菌棉棒蘸取后，放入滅菌試管或小瓶中。乳汁：先對(duì)乳房皮膚進(jìn)行清洗并消毒，棄掉最初擠出的3～4股乳汁，自患側(cè)乳區(qū)擠出10mL左右的乳汁置于滅菌容器中。血液及血清：大動(dòng)物自頸靜脈采取約10mL，小動(dòng)物可自心臟采取。為了防止血液凝固，應(yīng)加入抗凝劑，如5％檸檬酸鈉液。做血清學(xué)檢驗(yàn)用的血清，應(yīng)將盛血容器豎放，形成高層或斜面（牛、羊、鹿血液），于室溫下或溫箱內(nèi)放置1～2小時(shí)，待凝固后放入4℃冰箱內(nèi)，收集析出的血清，放入滅菌小瓶?jī)?nèi)?；?qū)⒉傻玫难悍烹x心管中，直立凝固后，經(jīng)1000轉(zhuǎn)/分離心5～20分鐘，血清即可析出。實(shí)質(zhì)臟器：應(yīng)在剖開胸腹腔后立即采取。如果剖開后暴露時(shí)間太長(zhǎng)而有被污染的可能，則應(yīng)在采取部位用酒精棉或燒紅的鐵篦燒烙后于燒烙部中間采取6～10cm2的臟器塊，分別置于滅菌容器或塑料食品袋內(nèi)。腸管及腸內(nèi)容物：可將欲采腸管的上下兩端用線結(jié)扎后剪斷。也可用鐵篦或酒精棉球燒烙后，剪一小口，用滅菌棉擦拭刮取腸黏膜及其內(nèi)容物，放入滅菌容器中。腦與脊髓：按病理解剖開顱術(shù)要求打開頭蓋骨，采取腦、脊髓放入滅菌容器或保存液中保存。

（2）供病理組織學(xué)檢驗(yàn)的材料。當(dāng)懷疑是某種傳染病時(shí)，應(yīng)注意選擇典型病變部位連同鄰近的正常組織一并采取。取材用的刀剪要鋒利，切面要求整齊，盛放的容器要大些，以免因擠壓而造成臟器變形。

2　病料的保存

（1）細(xì)菌檢驗(yàn)病料的保存。無菌采取的臟器標(biāo)本，可放在無菌容器內(nèi)，于低溫下保存。有污染的可能時(shí)，應(yīng)將標(biāo)本放在滅菌的30％甘油緩沖鹽水或飽和鹽水中，容器加塞封閉。飽和鹽水的配制：蒸餾水100mL，加入氯化鈉38～40g，加熱充分溶解，待冷后用數(shù)層紗布過濾，高壓滅菌后備用。30％甘油緩沖鹽水的配制：中性純甘油30mL、氯化鈉0.5g、磷酸氫二鈉1g，加中性蒸餾水至100mL，混合后高壓滅菌備用。

（2）病毒檢驗(yàn)病料的保存。通常將標(biāo)本放在50％甘油緩沖鹽水或其他運(yùn)輸培養(yǎng)基內(nèi)。

50％甘油緩沖鹽水的配制。氯化鈉2.5g、磷酸氫二鈉10.74g、磷酸二氫鈉0.46g，加中性蒸餾水100mL，溶解后再加入中性純甘油150mL、中性蒸餾水50mL，混合，0.67兆帕高壓滅菌30分鐘后備用。

雞蛋生理鹽水。先將新鮮雞蛋的表面用碘酊消毒，打開后將內(nèi)容物傾入滅菌三角瓶?jī)?nèi)，按10％的量加入滅菌生理鹽水 （全蛋液9份，滅菌生理鹽水1份），搖勻后用滅菌紗布過濾，濾液在56～58℃下加熱30分鐘，每日1次共3次，冷卻后備用。

（3）血清學(xué)檢驗(yàn)病料的保存。血清可放在滅菌玻瓶或青霉素小瓶中，于4℃條件下保存，不要反復(fù)凍融。為了防腐，在血清中可加入5％石炭酸溶液1～2 滴/mL，或加入0.01％的疊氮鈉防腐。

（4）病理檢驗(yàn)病料的保存。將采取的臟器塊立即浸入10％甲醛溶液 （市售福爾馬林10mL，加清水30mL）中固定。也可用95％酒精固定。保存液的量以能浸沒臟器塊為宜。