費(fèi)珵雯 龔瑜 史玉玲

·綜述·

自然殺傷T細(xì)胞在銀屑病發(fā)病中的研究進(jìn)展

費(fèi)珵雯 龔瑜 史玉玲

自然殺傷T細(xì)胞是一種兼具自然殺傷細(xì)胞和T細(xì)胞特性的獨(dú)特淋巴細(xì)胞群，可同時(shí)表達(dá)T細(xì)胞和自然殺傷細(xì)胞表面標(biāo)記。自然殺傷T細(xì)胞可識別由CD1d分子提呈的抗原，快速分泌大量細(xì)胞因子，并可調(diào)控T細(xì)胞的分化，在自身免疫性疾病中發(fā)揮重要的調(diào)節(jié)作用?；谀壳皩τ阢y屑病病理過程的研究，發(fā)現(xiàn)尋常性銀屑病皮損處淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞浸潤明顯，尤其是T淋巴細(xì)胞和樹突細(xì)胞在表皮或真皮浸潤為銀屑病的重要病理特征，表明免疫系統(tǒng)參與該病的發(fā)生和發(fā)展。目前認(rèn)為，銀屑病是遺傳和環(huán)境等多種因素相互作用的多基因遺傳性炎癥性皮膚病，發(fā)病機(jī)制與免疫介導(dǎo)有關(guān)。

銀屑?。蛔匀粴鸗細(xì)胞；細(xì)胞因子類；病理學(xué)；免疫

Fund programs:National Natural Science Foundation of China（81301356）;Shanghai Municipal Natural Science Foundation （13ZR1432200）;Medical Guide Project of Shanghai Municipal Science and Technology Commission（134119b0700）

不同于傳統(tǒng)T細(xì)胞，自然殺傷T細(xì)胞（NKT細(xì)胞）是一個(gè)復(fù)雜的T淋巴細(xì)胞亞群，同時(shí)表達(dá)T細(xì)胞受體（TCR）和 NK 細(xì)胞標(biāo)志物如：CD16、CD56、CD57、CD94 和 CD161［1］。在對 NKT 細(xì)胞認(rèn)識的過程中，NKT細(xì)胞的定義被不斷修正和完善。目前NKT細(xì)胞定義被分為廣義和狹義兩種。廣義NKT細(xì)胞是指具有固有免疫應(yīng)答功能的特異性T細(xì)胞；狹義NKT細(xì)胞是指Ⅰ型NKT細(xì)胞中的恒定型自然殺傷T細(xì)胞（iNKT）細(xì)胞。它們通過分泌細(xì)胞因子影響1型輔助性T細(xì)胞（Th1）/Th2以及17型輔助性T細(xì)胞（Th17）/Treg（調(diào)節(jié)性T細(xì)胞）網(wǎng)絡(luò)的平衡，在自身免疫性疾病如銀屑病、白癜風(fēng)、SLE等疾病中發(fā)揮重要作用。

1 概述

1.1 分類：Montalvillo E根據(jù)眾多研究將NKT細(xì)胞分為以下亞型：Ⅰ型（經(jīng)典NKT細(xì)胞群）、Ⅱ型（非經(jīng)典NKT細(xì)胞群）和NKT細(xì)胞樣細(xì)胞（不依賴CD1d的NK1.1+的細(xì)胞群）［2］。

Ⅰ型NKT細(xì)胞：根據(jù)NK1.1分子的表達(dá)水平，小鼠Ⅰ型NKT細(xì)胞可以分為兩個(gè)亞群，即Vα14?Jα 18+NK1.1+CD1d依賴性NKT細(xì)胞（又稱為iNKT細(xì)胞或經(jīng)典NKT細(xì)胞）以及Vα14?Jα18+NK1.1?CD1d依賴性NKT細(xì)胞［3］。小鼠iNKT又可分為CD4+CD8?iNKT細(xì)胞和CD4?CD8?iNKT細(xì)胞。 Cameron等［4］研究顯示，小鼠的iNKT細(xì)胞在通過胸腺內(nèi)選擇后一般較少表達(dá)CD8分子。人iNKT細(xì)胞表達(dá)TCR Vα24 Jα18，其中約50%表達(dá)CD8α，另外有一小部分表達(dá)CD8β。

Ⅱ型NKT細(xì)胞：為Vα14?Jα18?CD1d依賴性NKT細(xì)胞。Ⅱ型NKT細(xì)胞雖然為CD1d依賴性，但在小鼠體內(nèi)卻不能識別α半乳糖神經(jīng)鞘胺醇。許多研究用硫酸腦苷酯負(fù)載的CD1d四聚體檢測小鼠Ⅱ型NKT細(xì)胞［5］。Ziegler等［6］的研究顯示，γδTCR+T淋巴細(xì)胞也屬于Ⅱ型NKT細(xì)胞，人類Ⅱ型NKT細(xì)胞的表型為Vα1?Vβ?CD8α+CD8β+。

Ⅲ型NKT細(xì)胞：為不依賴CD1dNK1.1+的一群T淋巴細(xì)胞。這一細(xì)胞群具有異質(zhì)性，大部分為CD8陽性。然而除了表達(dá)NK1.1之外，Ⅲ型NKT細(xì)胞更傾向于歸入T淋巴細(xì)胞，又被稱為NKT樣T細(xì)胞。

1.2 分布與功能

1.2.1 NKT細(xì)胞的分布：Han 等［7］認(rèn)為，NKT細(xì)胞是由一群特定的細(xì)胞發(fā)育而來。有研究認(rèn)為其發(fā)育由傳統(tǒng)主流T細(xì)胞調(diào)節(jié)。T細(xì)胞存在的部位中均有NKT細(xì)胞分布，包括肝臟、脾、子宮、腸、肺、淋巴結(jié)、骨髓及外周血中。人類肝臟中NKT細(xì)胞占50%［8］，人類外周血中NKT細(xì)胞數(shù)量僅有0.2%。Lin等［9］研究發(fā)現(xiàn)，在人和小鼠的臍帶血中也存在NKT細(xì)胞。

1.2.2 NKT細(xì)胞的功能：NKT細(xì)胞是一種獨(dú)特的免疫相關(guān)細(xì)胞，其功能多樣，在固有免疫和適應(yīng)性免疫應(yīng)答中起橋梁作用。

腫瘤免疫：NKT細(xì)胞通過自身的TCR識別腫瘤細(xì)胞上的CD1d分子提呈的糖脂類抗原，并依賴CD95/CD178產(chǎn)生殺傷作用［10］。另外NKT細(xì)胞通過分泌IL?2激活抗腫瘤免疫細(xì)胞，進(jìn)一步發(fā)揮抗腫瘤效應(yīng)［11］。同時(shí)NKT細(xì)胞通過表達(dá)CD40與樹突細(xì)胞上的CD40L相互作用，并促進(jìn)iNKT細(xì)胞分泌IL?12等細(xì)胞因子，發(fā)揮其免疫調(diào)節(jié)的功能［12］。

移植免疫：NKT細(xì)胞分泌的IL?4、IL?10和IL?13等免疫抑制性細(xì)胞因子在自體和異體移植中發(fā)揮免疫耐受作用。

自身免疫：NKT細(xì)胞通過分泌IFN?γ誘導(dǎo)下游的效應(yīng)細(xì)胞和效應(yīng)分子，同時(shí)和其他細(xì)胞因子共同作用誘導(dǎo)樹突細(xì)胞的活化和成熟［13］。多項(xiàng)研究表明，iNKT在SLE等自身免疫性疾病中出現(xiàn)數(shù)量或功能上失衡［14］。

2 NKT細(xì)胞在銀屑病發(fā)病中的作用

銀屑病是一種多基因遺傳背景下的慢性復(fù)發(fā)性炎癥性皮膚病，其發(fā)病機(jī)制有：遺傳因素、免疫因素（細(xì)胞因子和趨化因子之間的相互作用）、環(huán)境因素、內(nèi)分泌等多種因素的共同作用。

銀屑病皮損處病理顯示：角質(zhì)形成細(xì)胞（KC）有過度增殖伴角化不全，提示銀屑病患者中NKT細(xì)胞與KC的互相作用可能在銀屑病發(fā)病機(jī)制中起重要作用。研究表明，存在于銀屑病患者中的NKT細(xì)胞主要表達(dá)CD94、CD158a、CD158b、NKB1和CD161，而KC表達(dá)CD1。有研究發(fā)現(xiàn)，雖然正常皮膚KC也表達(dá)CD1d，但銀屑病患者皮損中KC表達(dá)過量，表達(dá)CD1d的KC和人類NKT細(xì)胞互相作用會引起NKT細(xì)胞分泌大量IFN?γ，但不產(chǎn)生IL?4，KC上的CD1d表達(dá)增加。通過這一現(xiàn)象可以推測，IFN?γ會加強(qiáng)銀屑病皮損KC上CD1d的表達(dá)，而表達(dá)在KC上的CD1d能激發(fā)機(jī)體CD161+NKT細(xì)胞產(chǎn)生大量IFN?γ。同時(shí)有學(xué)者發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞間黏附分子對IFN?γ的產(chǎn)生有作用。有學(xué)者多次觀察到，銀屑病皮損處CD161+NKT細(xì)胞與表達(dá)CD1d的KC有直接的互相作用。根據(jù)以往研究，葡萄糖苷酰鞘胺醇能引起鼠表皮高度增殖，因此推測，在銀屑病皮損鱗屑與KC分化中產(chǎn)生的一些糖脂，包括葡萄糖苷酰鞘胺醇和表達(dá)在KC上的CD1d結(jié)合，然后再提呈給NKT細(xì)胞發(fā)生互相作用，使NKT細(xì)胞和KC發(fā)生改變，在這過程中，NKT細(xì)胞的TCR和NK細(xì)胞受體的協(xié)同作用非常關(guān)鍵［15］。有學(xué)者發(fā)現(xiàn)，銀屑病患者中Vα24Vβ 11NKT細(xì)胞數(shù)相對較少，他們認(rèn)為，在銀屑病中起作用的NKT細(xì)胞為非傳統(tǒng)恒定TCR鏈的NKT細(xì)胞，即一些不同TCR鏈的其他亞群［16］。

多個(gè)研究小組均發(fā)現(xiàn)，CD161+、CD94+T細(xì)胞主要存在于CD1d+的角質(zhì)形成細(xì)胞層，而不是遠(yuǎn)處的非皮損組織［17］。同時(shí)在銀屑病皮損處發(fā)現(xiàn)CD161+NKT細(xì)胞增多，皮損處CD1d特異性TCR Va24+Vb11+NKT細(xì)胞在皮損處也增多，這些均表明T細(xì)胞免疫應(yīng)答的失調(diào)營造了形成銀屑病皮損的微環(huán)境［18］。

有研究顯示，NKT細(xì)胞數(shù)量在銀屑病外周血中較正常對照組有所降低，這些研究主要用CD161、CD3等來標(biāo)記NKT細(xì)胞［19］。 繆旭等［20］的一項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)，銀屑病患者治療后，外周血中NKT細(xì)胞較治療前增加，但仍然較健康對照組減少，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。但Langewouters等［21］用CD94+CD161+標(biāo)記外周血NKT細(xì)胞卻得出相反的結(jié)果。因?yàn)镹KT細(xì)胞是CD1d特異性T淋巴細(xì)胞，CD161、CD94這些表面標(biāo)記均不是特異性結(jié)合NKT細(xì)胞，某些NK細(xì)胞及CD8+的細(xì)胞也表達(dá)這些表面標(biāo)記分子。據(jù)報(bào)道，α半乳糖神經(jīng)鞘胺醇為目前發(fā)現(xiàn)的NKT細(xì)胞結(jié)合效能最強(qiáng)的糖脂抗原，其可載入CD1d分子抗原結(jié)合槽內(nèi)，應(yīng)用該糖脂和分子建立的CD1d四聚體技術(shù)是當(dāng)前檢測NKT細(xì)胞的權(quán)威方法［22?23］。對于α半乳糖神經(jīng)鞘胺醇結(jié)合CD1d四聚體特異性標(biāo)記的iNKT細(xì)胞的相關(guān)研究在銀屑病外周血中的研究尚無報(bào)道。此外，由于α半乳糖神經(jīng)鞘胺醇是NKT細(xì)胞的特異性配體，并且已廣泛用于觀察NKT活化后的功能研究。

3 結(jié)語

NKT細(xì)胞確實(shí)參與了銀屑病的發(fā)病及病理改變，在銀屑病的發(fā)生發(fā)展中起著舉足輕重的作用。該病的嚴(yán)重程度也和Th1/Th2以及Th17/Treg失衡有關(guān)。因此，可以通過干預(yù)NKT細(xì)胞達(dá)到調(diào)節(jié)T淋巴細(xì)胞免疫水平的目的，恢復(fù)Th1/Th2以及Th17/Treg比例，最大限度的恢復(fù)T細(xì)胞免疫平衡，以最終實(shí)現(xiàn)控制銀屑病的目的。因此，深入了解NKT細(xì)胞及其分泌的細(xì)胞因子在銀屑病發(fā)病機(jī)制中的作用，有利于提供新的治療靶點(diǎn)。

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Natural killer Tcells in the pathogenesis of psoriasis

Fei Chengwen,Gong Yu,Shi Yuling.Department of Dermatology,Tenth People’s Hospital of Tongji University,Shanghai 200072,China

Shi Yuling,Email:cjcad@qq.com

Natural killer T（NKT）cells are a unique lymphocyte subpopulation that share properties and express surface markers of both NK cells and T cells.NKT cells can recognize antigens presented by CD1d molecules,secrete numerous cytokines rapidly,regulate T cell differentiation,and play an important regulatory role in autoimmune diseases.Recent pathological studies have shown obvious infiltration of lymphocytes and monocytes in skin lesions of psoriasis vulgaris.Moreover,the infiltration of T lymphocytes and dendric cells in the epidermis or dermis is an important pathological feature of psoriasis,suggesting that the immune system participates in the occurrence and development of psoriasis.At present,it is considered that psoriasis is a polygenic inflammatory dermatosis caused by the interaction of multiple factors such as genetic and environmental factors,with the pathogenesis being related to immune mediation.

Psoriasis;Natural killer T?cells;Cytokines;Pathology;Immunity

國家自然科學(xué)基金（81301356）；上海市自然科學(xué)基金（13ZR1432200）；上海市科委引導(dǎo)項(xiàng)目（134119b0700）

10.3760/cma.j.issn.1673?4173.2016.06.005

200072上海，同濟(jì)大學(xué)附屬第十人民醫(yī)院皮膚科

史玉玲，Email:cjcad@qq.com

本文主要縮寫：NKT細(xì)胞：自然殺傷T細(xì)胞，TCR：T細(xì)胞受體，iNKT：恒定型自然殺傷T細(xì)胞，α?GalCer：α?半乳糖神經(jīng)鞘胺醇，KC：角質(zhì)形成細(xì)胞

2016?01?08）