任憶秋王 重劉承軍　王海麗

（1.東昌府區(qū)畜牧獸醫(yī)局，山東聊城 252000；

2.聊城市畜牧獸醫(yī)技術(shù)服務(wù)中心，山東聊城 252000；

3.聊城職業(yè)技術(shù)學(xué)院，山東聊城 25200）

蛋雞腫瘤病的診斷與鑒別技術(shù)概述

任憶秋1王 重1劉承軍2王海麗3*

（1.東昌府區(qū)畜牧獸醫(yī)局，山東聊城 252000；

2.聊城市畜牧獸醫(yī)技術(shù)服務(wù)中心，山東聊城 252000；

3.聊城職業(yè)技術(shù)學(xué)院，山東聊城 25200）

腫瘤性疾病是威脅養(yǎng)禽業(yè)的重要疾病，給養(yǎng)禽業(yè)造成的損失較大。本文就國內(nèi)蛋雞腫瘤病的的流行情況和臨床鑒別進(jìn)行了總結(jié)，為蛋雞養(yǎng)殖者提供參考。

蛋雞；腫瘤病；鑒別；概述

隨著養(yǎng)禽業(yè)規(guī)模養(yǎng)殖的不斷擴(kuò)大，蛋雞腫瘤性疾病呈高發(fā)態(tài)勢，較突出病種有馬立氏克病（MD）、淋巴白血?。ˋL）以及網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生癥（RE），因免疫抑制作用危害，給蛋雞養(yǎng)殖業(yè)造成重大的損失。該疾病具有病死率較高，發(fā)病原因多，臨床癥狀復(fù)雜等特點(diǎn)，特別是腫瘤性疾病混合感染或繼發(fā)其他疾病，生產(chǎn)中往往造成更大經(jīng)濟(jì)損失。

1 蛋雞腫瘤性疾病的流行情況

腫瘤病在我國蛋雞養(yǎng)殖場中均有不同程度的存在，具有野毒毒力增強(qiáng)、發(fā)病日齡提前、混合感染普遍等特點(diǎn)。

1.1 馬立氏克病

近年來，我國發(fā)生MD 免疫失敗和分離強(qiáng)毒力毒株的報道不斷增多，已分離出馬立克氏病超強(qiáng)毒。隨著生產(chǎn)中MDV 毒力的不斷增強(qiáng)，出現(xiàn)馬立克氏病超（特）超強(qiáng)毒亦已變?yōu)榭赡?。研究表明，MDV 毒力逐年變強(qiáng)與飼養(yǎng)密度過大、疫苗免疫壓力上升和非規(guī)范免疫普遍等因素有關(guān)。據(jù)報道，在一定地區(qū)對蛋雞實(shí)施低劑量MD疫苗接種的雞場過度集中，以及生物安全措施存在明顯漏洞時，MDV 的毒力逐漸變異增強(qiáng)，從溫和型向超（特）超強(qiáng)毒演變。高毒力的毒株趨向于在更短的時間內(nèi)導(dǎo)致淋巴細(xì)胞的增生以及延長感染到排毒的時間，且部分免疫雞群仍可暴發(fā)，使用火雞皰疹病毒疫苗（HVT）的保護(hù)效果甚微。在存在免疫抑制病或管理條件差的情況下，甚至CVI988 疫苗的保護(hù)率也有所降低。需要注意的是，盡管部分接種CVI988 疫苗的蛋雞場責(zé)怨MD 腫瘤帶來的死亡率明顯增加，少數(shù)達(dá)到10%。但在這些發(fā)病雞群中，腫瘤通常發(fā)生較晚，18 ～ 24 周齡才開始出現(xiàn)，且大多數(shù)表現(xiàn)為彌漫性的小的腫瘤結(jié)節(jié)而不是大的腫瘤結(jié)節(jié)或腫瘤塊，在形態(tài)上很難與禽白血病病毒（ALV-J）和網(wǎng)狀內(nèi)皮癥病毒（REV）的腫瘤相區(qū)別。據(jù)報道，在腫瘤發(fā)病率較高的雞場送檢的病雞中，不同致瘤病毒的共感染現(xiàn)象相當(dāng)常見，單純MD 感染時腫瘤發(fā)生率小于5%，而MD 與REV 混合感染則腫瘤發(fā)生率卻大大提升，通常在8% 以上。有報道顯示，山東和河北等地腫瘤發(fā)病雞群中，有一半以上同時存在著MDV 和REV 的共感染。另外，我國最近分離到一些ALV - -J 毒株的致病力明顯增強(qiáng)，導(dǎo)致發(fā)病日齡提前，值得對該病加以關(guān)注。在我們對臨床病料的檢測實(shí)例中，多次發(fā)現(xiàn)ALV -J 與REV 存在明顯的共感染現(xiàn)象。目前，REV與其他腫瘤病毒的共感染是相當(dāng)普遍的。實(shí)際上，在流行病學(xué)調(diào)查中，REV 與其他非腫瘤性病毒如雞傳染性貧血病毒（CAV）或呼腸孤病毒（REO）的共感染也非常普遍。REV感染本身固然能誘發(fā)腫瘤，但可能更重要的是，由REV 感染造成的免疫抑制會大大減低其他疫苗如MD 疫苗的免疫效果，也會加強(qiáng)MDV 或ALV 的致腫瘤作用。嚴(yán)重發(fā)生MD 和ALV-J亞型腫瘤的雞群都并發(fā)REV 感染，REV 在腫瘤中檢出率在30%以上，目前已接近50%?；蛟S我們會發(fā)起疑問，為什么近年來在我國雞群中有這么高的REV分離率？這確實(shí)是一個值得我們認(rèn)真對待的問題。目前，由商品胚（非SPF 雞胚）制備的MD 疫苗或雞痘疫苗等活苗存在污染外源病原的現(xiàn)象，特別是一些免疫抑制性病原，如REV、ALV、CAV 等，除本身導(dǎo)致發(fā)病引起腫瘤外，還可造成免疫抑制，影響疫苗的免疫應(yīng)答，進(jìn)而出現(xiàn)免疫失敗。據(jù)報道，目前國內(nèi)活苗中REV 的污染率可達(dá)38. 8%，由其所致的腫瘤情況已有多起報道。因此，一定要選擇正規(guī)生產(chǎn)廠家用SPF 雞胚制備的疫苗，這樣才能盡最大可能降低MD 和其他疾病的發(fā)生。

2 診斷方法

對于單一、典型的病例，根據(jù)病理組織切片，結(jié)合流行病學(xué)特點(diǎn)可對MD 和AL 作出初步鑒別診斷。通常情況下，MD 腫瘤以大小和形態(tài)不一的T 淋巴細(xì)胞瘤為主，發(fā)病高峰在3 月齡以下，雞只出現(xiàn)虹膜炎、四肢麻痹、坐骨神經(jīng)或臂神經(jīng)腫脹等癥狀。ALV的A、B、C 和D 亞型可引發(fā)經(jīng)典的白血病腫瘤，主要為形態(tài)大小均一的B 淋巴細(xì)胞瘤；J 亞型主要導(dǎo)致骨髓樣細(xì)胞瘤，發(fā)病高峰在4～5 月齡以后。需要注意的是，REV 既能誘發(fā)在宏觀上和微觀上都與MD腫瘤相似的T 細(xì)胞淋巴瘤，又可導(dǎo)致與AL 的B 淋巴細(xì)胞瘤和骨髓樣細(xì)胞瘤相似的復(fù)雜形態(tài)的腫瘤，臨床上很難將其與MD 和AL 相區(qū)分，也使得基于臨床癥狀的診斷非常不確實(shí)。目前，國內(nèi)外專家已形成共識，即靠單一的病理學(xué)檢查已很難對家禽腫瘤病作出正確的鑒別診斷，需要依靠綜合應(yīng)用不同的實(shí)驗室檢測方法進(jìn)行確診?？捎糜谠\斷腫瘤病的方法很多，例如常規(guī)病理切片、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）、免疫組化法、核酸探針技術(shù)等。常規(guī)病理切片是用H. E 染色組織切片，鏡下觀察腫瘤組織的細(xì)胞類型，確定是T 淋巴細(xì)胞、B 淋巴細(xì)胞、骨髓樣瘤細(xì)胞還是網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞等。目前，免疫組織化學(xué)已被引入腫瘤病的檢測，該法需要使用單克隆抗體，將固定的組織切片用病毒特異性抗體免疫染色。例如單抗做免疫組化學(xué)染色可檢測MD 轉(zhuǎn)化細(xì)胞上表達(dá)的MDV 抗原，能排除ALV 或REV，對MD腫瘤具有診斷意義。近年來，人們對MDV、ALV 和REV 的檢測還采用了PCR 法，與傳統(tǒng)的診斷方法相比，PCR 技術(shù)具有快速、敏感、特異的特點(diǎn)。對腫瘤組織提取DNA，分別用相應(yīng)的特異性核酸引物做PCR 擴(kuò)增，即可確定雞群中存在哪一種或哪幾種病原感染。此外，核酸探針檢測也可用于疾病的診斷，通過提取腫瘤組織DNA，分別用不同病毒特異性核酸探針作斑點(diǎn)分子雜交，以確定雞群中存在哪一種或哪幾種病原感染。

［1］ 韋平，何秀苗，王桂軍，等.雞腫瘤病快速鑒別診斷技術(shù)的建立［J］.揚(yáng)州大學(xué)學(xué)報：農(nóng)業(yè)與生命科學(xué)版，2002，23（2）：1-5.