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鄰苯二甲酸二丁酯對(duì)卵巢功能的影響研究進(jìn)展

李虹1, 李文2

(1. 第二軍醫(yī)大學(xué)附屬上海長(zhǎng)征醫(yī)院, 上海, 200003; 2. 上海市第七人民醫(yī)院, 上海, 200137)

關(guān)鍵詞:鄰苯二甲酸二丁酯；卵巢；生殖毒性

鄰苯二甲酸二丁酯屬于一類內(nèi)分泌干擾物，是人工合成的一種常用增塑劑，具有廣泛的應(yīng)用價(jià)值，其在使用過程中能不斷地釋放入空氣、飲用水中。研究發(fā)現(xiàn)，鄰苯二甲酸二丁酯廣泛存在于人的血清、脂肪和精液中，對(duì)人類的健康具有較大的威脅。鄰苯二甲酸二丁酯對(duì)雄性生殖系統(tǒng)的影響的研究報(bào)道較多，但是其對(duì)雌性生殖系統(tǒng)毒性作用的報(bào)道較少[1-5]，為了更好地研究該類物質(zhì)對(duì)雌性生殖系統(tǒng)毒性作用的影響，現(xiàn)綜述鄰苯二甲酸二丁酯對(duì)卵巢功能影響的研究進(jìn)展。

1研究現(xiàn)狀

鄰苯二甲酸二丁酯屬于鄰苯二甲酸酯類化合物，是一種雌激素類環(huán)境干擾物，且具有抗雄激素作用。鄰苯二甲酸酯類化合物是日常生活中常使用的一類增塑劑，其依靠氫鍵或范德華力與塑料分子發(fā)生結(jié)合，而這種作用力很弱，在使用過程中遇有機(jī)溶劑或水時(shí)易解離出來[6]。研究[7-9]表明，鄰苯二甲酸酯類化合物是一類致癌作用、致突變作用和再生有毒物質(zhì)，人和動(dòng)物可通過呼吸、飲食和皮膚對(duì)其進(jìn)行吸收。鄰苯二甲酸二丁酯的研究較多還是集中在對(duì)雄性生殖系統(tǒng)的損害方面，其能導(dǎo)致雄性動(dòng)物睪酮的合成減少，引起精子的生成發(fā)生障礙，導(dǎo)致睪丸生精上皮發(fā)育出現(xiàn)異常，精曲小管發(fā)生萎縮，使間質(zhì)細(xì)胞增生，增加隱睪的發(fā)生率等。近年來，鄰苯二甲酸二丁酯的雌激素類環(huán)境干擾物作用引起的卵巢功能異常受到越來越多學(xué)者的關(guān)注，Sen N等[10]研究表明，與人類相關(guān)劑量的鄰苯二甲酸二丁酯可破壞小鼠卵巢功能。喬麗麗等[11]研究認(rèn)為性早熟女童受鄰苯二甲酸二丁酯污染的程度均比正常兒童嚴(yán)重得多，而且鄰苯二甲酸二丁酯對(duì)子宮、卵巢的體積有影響。

2擬雌激素作用

環(huán)境內(nèi)分泌干擾物(EDCs)是一類環(huán)境中天然存在的或污染的、能模擬或干擾人和動(dòng)物內(nèi)分泌機(jī)能的各類化合物的總稱，其中最重要的一類是環(huán)境雌激素，該類化合物能改變體內(nèi)雌激素水平或與雌激素受體發(fā)生結(jié)合，模仿雌激素的生理作用，對(duì)細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)途徑產(chǎn)生影響，產(chǎn)生類雌激素效應(yīng)[12]。研究[13-14]表明，鄰苯二甲酸二丁酯屬于環(huán)境內(nèi)分泌干擾物，具有擬雌激素活性，雖然其和天然雌激素的結(jié)構(gòu)存在較大的差異，但其對(duì)機(jī)體內(nèi)的雌激素受體具有親和力，能發(fā)生結(jié)合并產(chǎn)生雌激素效應(yīng)，對(duì)生殖內(nèi)分泌具有較大的毒性，干擾體內(nèi)多種性激素的正常生理功能。靳秋梅等[15]研究認(rèn)為鄰苯二甲酸二丁酯可影響小鼠卵巢的內(nèi)分泌功能及卵泡的發(fā)育、成熟，在體內(nèi)可能具有類雌激素作用。Park MA等[16]研究表明鄰苯二甲酸二丁酯可以干擾內(nèi)分泌系統(tǒng)并能刺激雌激素受體(ER)陽(yáng)性的腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)。人乳腺癌MCF-7細(xì)胞富含雌激素受體，是檢測(cè)雌激素樣活性最常用的細(xì)胞株，可在雌激素作用下增殖，對(duì)擬雌激素活性的檢測(cè)具有靈敏性高、快速、簡(jiǎn)單等特點(diǎn)。靳秋梅等[17]通過MCF-7細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，苯二甲酸二丁酯可促進(jìn)雌激素依賴性乳腺癌MCF-7細(xì)胞的增殖，可能具有擬雌激素作用。Bhatia H等[18]研究表明, 7 d連續(xù)暴露亞急性濃度的鄰苯二甲酸二丁酯可導(dǎo)致成年雌性默里尼姆塞爾彩魚產(chǎn)生擬雌激素作用。

3對(duì)甾體激素合成過程中關(guān)鍵酶的影響

卵巢顆粒細(xì)胞和卵巢膜細(xì)胞是雌二醇和孕酮合成和分泌必不可少的細(xì)胞，運(yùn)載低密度脂蛋白的膽固醇是這兩種激素合成的前體物質(zhì)[19]。當(dāng)?shù)兔芏戎鞍着c特定部位的受體發(fā)生特異性結(jié)合可使膽固醇進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，經(jīng)胞漿內(nèi)的類固醇激素合成急性調(diào)節(jié)蛋白的作用而進(jìn)入到線粒體內(nèi)，線粒體內(nèi)膜上的膽固醇側(cè)鏈裂解酶(P450scc)將膽固醇催化為孕烯雌酮，再經(jīng)過微粒體酶3β-羥基類固醇激素脫氫酶作用而生成孕酮[20]。膜細(xì)胞內(nèi)的孕酮是經(jīng)過彌散作用進(jìn)入的，主要經(jīng)過17α-羥化酶催化后變?yōu)樾巯┒⑦M(jìn)入顆粒細(xì)胞，胞內(nèi)的17β-羥基類固醇脫氫酶可將其轉(zhuǎn)化為睪酮，細(xì)胞色素P450芳香化酶(CYP19)可催化睪酮為雌二醇[21]。雌二醇和孕酮合成的關(guān)鍵酶是P450scc和P450arom，這兩種酶的活性直接影響雌二醇和孕酮在體內(nèi)的水平。王雪金等[22]研究認(rèn)為鄰苯二甲酸二丁酯染毒后顆粒細(xì)胞分泌的雌二醇及孕酮水平下降，鄰苯二甲酸二丁酯可降低顆粒細(xì)胞中P450arom、P450scc mRNA 的表達(dá)，且表達(dá)量與鄰苯二甲酸二丁酯劑量呈反比，提示鄰苯二甲酸二丁酯可引起雌性大鼠生殖系統(tǒng)的功能紊亂，對(duì)其生殖系統(tǒng)具有毒性作用。

朱嘉月等[23]研究表明鄰苯二甲酸二丁酯有可能通過激活大鼠卵巢組織過氧化物酶體增生物激活受體-γ(PPARγ)mRNA 表達(dá)而對(duì)雌性大鼠產(chǎn)生生殖毒性。PPARs是一種核激素受體超家族，其有3種亞型，分別為PPARα、PPARβ和PPARγ, PPARγ在維持正常的卵巢功能、卵泡發(fā)育和排卵等方面都具有重要的作用，且排卵前卵巢中PPARγ是存在的主要亞型。鄰苯二甲酸二丁酯能激活激活卵巢內(nèi)PPARγ，能對(duì)甾體激素生成過程中的關(guān)鍵酶P450arom和P450scc mRNA的表達(dá)進(jìn)行調(diào)節(jié)，影響雌二醇和孕酮的合成和分泌，從而產(chǎn)生雌性生殖毒性，影響卵巢的功能[24]。

4對(duì)細(xì)胞凋亡的影響

細(xì)胞凋亡(apoptosis)是細(xì)胞的一種程序性自殺的過程。卵巢主要的功能細(xì)胞是顆粒細(xì)胞，構(gòu)成了卵泡內(nèi)體細(xì)胞的絕大部分，能調(diào)節(jié)促性腺激素對(duì)卵母細(xì)胞的作用，能為卵母細(xì)胞成熟創(chuàng)造有利的微環(huán)境，對(duì)卵母細(xì)胞成熟和卵泡發(fā)育具有重要的生理意義[25]。Craig ZR等[26]研究表明，鄰苯二甲酸二丁酯濃度依賴性地作用于目標(biāo)卵泡，可改變細(xì)胞周期，調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡因子的表達(dá)，引起細(xì)胞周期阻滯，降低雌二醇(E2)水平，并觸發(fā)閉鎖。王雪金等[27]研究表明鄰苯二甲酸二丁酯可導(dǎo)致大鼠卵巢顆粒細(xì)胞凋亡，且Bcl-2/Bax比例失調(diào)可能是導(dǎo)致其凋亡的機(jī)制。Bcl-2是一種凋亡抑制蛋白，在正常細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)水平高于即將凋亡的細(xì)胞，成長(zhǎng)卵泡的顆粒細(xì)胞中Bcl-2具有較高的表達(dá)水平，而正常卵泡或完全閉鎖的卵泡中其表達(dá)水平較低[28]。Bax是一類促凋亡蛋白，正常情況下其以單聚體形式存在于細(xì)胞質(zhì)中，當(dāng)細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí)其轉(zhuǎn)移入線粒體并發(fā)生寡聚化，導(dǎo)致線粒體膜通透性發(fā)生改變，促進(jìn)細(xì)胞凋亡的發(fā)生，鄰苯二甲酸二丁酯能使小鼠卵巢組織中Bax蛋白表達(dá)增加，Bcl-2蛋白表達(dá)降低，使顆粒細(xì)胞在卵泡發(fā)育時(shí)期就發(fā)生細(xì)胞凋亡，導(dǎo)致卵泡閉鎖[29]。

5對(duì)氧自由基的影響

李玲等[30]研究認(rèn)為鄰苯二甲酸二丁酯染毒可使雌性大鼠卵巢的臟器系數(shù)、血清超氧化物歧化酶(SOD)活力、還原性谷胱甘肽(GSH)含量、孕酮(P)、雌二醇(E2)、子宮一氧化氮合酶(NOS)活力降低，肝臟的臟器系數(shù)和閉鎖卵泡構(gòu)成比升高。SOD和GSH是機(jī)體內(nèi)清除超氧自由基的重要防御系統(tǒng)中的酶，對(duì)脂質(zhì)過氧化作用具有間接抑制作用，能減低氧自由基對(duì)膜的損害作用。SOD在體內(nèi)的分布較廣，能使自由基經(jīng)過歧化反應(yīng)而被清除，減少自由基對(duì)機(jī)體的損傷，GSH能對(duì)誘導(dǎo)氧化應(yīng)激的化學(xué)物質(zhì)引起的細(xì)胞毒作用形成抵抗作用，使細(xì)胞免受氧化應(yīng)激的傷害。鄰苯二甲酸二丁酯染毒能降低SOD活力，使GSH含量下降，導(dǎo)致卵巢脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物和自由基蓄積，對(duì)卵巢造成脂質(zhì)過氧化損傷。

6對(duì)雌激素水平的影響

下丘腦—垂體—卵巢軸是雌性動(dòng)物的一個(gè)完整而協(xié)調(diào)的神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)，該系統(tǒng)的任何一環(huán)節(jié)受到外界的不良因素影響均可對(duì)雌性動(dòng)物的生殖功能產(chǎn)生影響。雌二醇是雌性動(dòng)物體內(nèi)含量最多、作用最強(qiáng)的雌激素，卵巢顆粒細(xì)胞是其主要的合成和分泌場(chǎng)所，其對(duì)雌性動(dòng)物生殖內(nèi)分泌系統(tǒng)具有重要的調(diào)節(jié)作用。下丘腦—垂體—卵巢軸可被雌二醇水平反饋性調(diào)節(jié)，升高的雌二醇水平可導(dǎo)致該軸的平衡被打破，引起雌性動(dòng)物內(nèi)分泌功能失調(diào)。朱嘉月等[31]研究表明鄰苯二甲酸二丁酯可使青春期雌性大鼠血清中雌二醇(E2)水平升高，其作用機(jī)制可能與卵巢甾體激素合成過程中的關(guān)鍵酶 P450arom mRNA 表達(dá)升高有關(guān)。升高的雌二醇水平經(jīng)過下丘腦—垂體—卵巢軸可影響卵巢的功能和形態(tài)，導(dǎo)致雌性動(dòng)物生殖系統(tǒng)發(fā)生紊亂。

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通信作者：李文, 主任醫(yī)師，博士生導(dǎo)師

收稿日期:2015-09-25

中圖分類號(hào):R 339.2

文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A

文章編號(hào):1672-2353(2016)01-190-03

DOI:10.7619/jcmp.201601071