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1例全自動加樣儀引起抗HIV拖帶陽性分析

陳紅霞

(咸寧市中心醫(yī)院輸血科，湖北 咸寧 437100)

關(guān)鍵詞：全自動加樣儀；假陽性；HIV

我們在本院輸血患者輸血前經(jīng)血感染性疾病篩查抗HIV時，發(fā)現(xiàn)1份抗HIV抗體強陽性樣本，由于儀器混合時振蕩幅度太大，使血液濺出和永久性加樣針的拖帶，導(dǎo)致污染了鄰近1個孔位和另2份相同加樣針加樣的樣本，造成假陽性?，F(xiàn)將本例的發(fā)現(xiàn)和分析情況報道如下。

1材料與方法

1.1標(biāo)本本院計劃輸血患者在輸血前空腹采集的標(biāo)本，促凝管2~3ml。

1.2儀器初檢儀器是由北京科美有限公司提供的chemclin600全自動化學(xué)發(fā)光儀，復(fù)檢儀器是匯松MB全自動酶免洗板機和酶標(biāo)儀。

1.3試劑初檢為北京科美有限公司提供的化學(xué)發(fā)光檢測試劑盒(批號：20131216)，復(fù)檢為廈門英科新創(chuàng)科技有限責(zé)任公司提供的ELESA試劑盒(批號：2013105819)。

1.4方法嚴格按照儀器標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程和試劑說明書操作。初復(fù)檢分別為不同的經(jīng)過培訓(xùn)合格上崗人員操作，所有試劑均有“批批檢”合格證書并在有效期內(nèi)使用，室內(nèi)質(zhì)控均在控。加樣方向均為豎向A至H，橫向1至12。

2試驗判斷

2.1初檢第1次用化學(xué)發(fā)光法進行試驗，共13個樣本，第3根針共加樣3份樣本。該板上有3份樣本試驗結(jié)果呈陽性，1份灰值，同時第3根針加樣樣本平均計算結(jié)果依次遞減。見表1。

2.2初檢第2次用化學(xué)發(fā)光法重做，實驗前對儀器運行多次開機前維護，對加樣針進行多次沖洗和擦拭干凈，調(diào)低振蕩器振幅，實驗結(jié)果見表2。

表1　第1次初檢結(jié)果

表2　第2次初檢結(jié)果

2.3復(fù)檢用手工加樣對上述4份樣本用ELESA法進行實驗，結(jié)果見表3。

表3　復(fù)檢結(jié)果

2.4結(jié)果分析按照HIV初篩試驗結(jié)果上報要求，立即通知臨床對上述患者重新抽樣各用一次性加樣針手工分裝成2份，其中1份用于本實驗室進行化學(xué)發(fā)光法實驗，實驗前對儀器多次運行開機前維護，結(jié)果見表4。

表4　結(jié)果分析

2.5確認實驗將分裝另1份送咸寧市疾病預(yù)防控制中心確認，其中3號樣本經(jīng)確認為抗HIV陽性，其他3份均為陰性。

3結(jié)果

3號樣本為抗HIV陽性，7號和11號樣本為加樣針拖帶污染，加樣孔和試管中樣本同時受到污染，2號樣本為震蕩時加樣孔污染。

4討論

目前的全自動分析系統(tǒng)使用永久性加樣針，均難以避免樣本污染問題。特別當(dāng)遇到高濃度的抗原或抗體，沿加樣方向被污染的可能多個孔，甚至連試管中樣本也被污染，說明加樣針的沖洗還不能做到完全徹底，振蕩器振幅太大也可能造成樣本濺出污染到鄰近孔位。有研究表明以抗HIV拖帶最為嚴重，抗HCV次之，TP和HBsAg最低，除HBsAg外，其他幾項的拖帶率逐年上升[1]，因此設(shè)法避免這種情況的發(fā)生成為大家關(guān)注的問題。

為了排除拖帶污染造成的假陽性，筆者認為可以從以下幾個方面著手：樣本的處理很關(guān)鍵，離心時間不能過短，肉眼觀察到血清中有纖維蛋白漂浮時用一次性加樣針挑出；儀器維護要做到位，定期用0.1N的NaCl沖洗加樣器管道，清除日常維護無法徹底清除的管壁附著物，增加加樣儀吸取血漿或血清樣本后的洗針液量[2]；增加洗針次數(shù)，調(diào)節(jié)洗針液面高度，增大有效清洗面積，用酒精消毒加樣針[3]；實驗過程中要密切觀察，振蕩器振幅是否適宜，加樣針是否有堵塞，加樣針外壁是否干凈，洗針液和洗板液是否足量；檢測結(jié)果發(fā)布前，要認真審核，充分考慮到拖帶污染的可能性，當(dāng)同一行/列沿加樣針加樣出現(xiàn)連續(xù)陽性或(和)同一加樣針加樣的樣本連續(xù)呈陽性時，應(yīng)通知臨床科室重新抽樣檢測。

衛(wèi)生部規(guī)定血站所采集的血液的原始記錄必須保存10年，血液檢測的全血標(biāo)本保存期應(yīng)在全血有效期內(nèi)，血清或血漿標(biāo)本的保存期應(yīng)在全血有效期滿后半年。由輸血引發(fā)的醫(yī)療糾紛呈上升趨勢，很多臨床機構(gòu)應(yīng)保存受血者輸血前檢查樣本血漿或血清，以備必要時查詢[4]，筆者建議要充分考慮拖帶污染情況的可能性，應(yīng)在實驗前分裝樣本血漿或血清留樣。

參考文獻：

[1]劉如萱.加樣針污染致不同項目拖帶情況分析[J].檢驗醫(yī)學(xué)與臨床2011，8(4)：480

[2]修淑麗，李燕，吳碩，等.陽性拖帶現(xiàn)象產(chǎn)生的原因和解決方法[J].中國輸血雜志，2006，19(3):218

[3]楊明清.全自動酶免分析系統(tǒng)加樣中攜帶污染問題及其解決方案[J].國外醫(yī)學(xué)(輸血及血液血分冊)，2003，26(4)：348

[4]姜華，代秀桃，付軍，等.淺談輸血科怎樣面對舉證倒置[J].醫(yī)藥論壇雜志，2003，24(24)：70

(收稿日期：2015-06-02)

DOI:10.16751/j.cnki.2095-4646.2016.01.0085

中圖分類號：R446.6

文獻標(biāo)識碼：B

文章編號：2095-4646(2016)01-0085-02