高婷 付玉華 李曉玲 伏建峰

830000烏魯木齊，蘭州軍區(qū)烏魯木齊總醫(yī)院檢驗(yàn)科（高婷、李曉玲、伏建峰）；830000烏魯木齊，新疆維吾爾自治區(qū)人民醫(yī)院北院檢驗(yàn)科（付玉華）

類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者的血清脂蛋白a水平與炎癥指標(biāo)相關(guān)性分析

高婷 付玉華 李曉玲 伏建峰

830000烏魯木齊，蘭州軍區(qū)烏魯木齊總醫(yī)院檢驗(yàn)科（高婷、李曉玲、伏建峰）；830000烏魯木齊，新疆維吾爾自治區(qū)人民醫(yī)院北院檢驗(yàn)科（付玉華）

目的 通過對類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（RA）患者組與對照組（正常健康者）脂蛋白a（Lp-a）與脂代謝水平的比較，分析RA患者血清中的Lp-a水平與系統(tǒng)性炎癥進(jìn)展的風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)性。 方法 選取30例RA患者（血清類風(fēng)濕因子陽性）與30例正常健康者，年齡為25～80歲，性別分布相同，采集血樣并檢測其脂代謝水平（Lp-a、甘油三酯（TG）、總膽固醇（TC）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）和極低密度脂蛋白膽固醇（VLDL-C））與炎癥反應(yīng)指標(biāo)（腫瘤壞死因子α（TNF-α）、白細(xì)胞介素 6（IL-6）和C反應(yīng)蛋白（CRP）），對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 結(jié)果 與對照組比較，RA患者組的血清 Lp-a水平顯著增高（P＜0.001），HDL-C水平顯著降低（P＜0.05），而TC、TG、LDL-C與VLDL-C水平則無明顯變化，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。同時(shí)，RA患者組的TNF-α、IL-6及CRP水平較對照組均顯著增高（P＜0.05），且TNF-α與Lp-a水平的升高有相關(guān)性（r=0.753，P＜0.001）。 結(jié)論 RA患者常伴有高水平的Lp-a，且Lp-a水平的升高與RA患者的全身性炎癥反應(yīng)增強(qiáng)具有相關(guān)性，Lp-a水平可作為RA患者的風(fēng)險(xiǎn)評價(jià)指標(biāo)。

類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎； 脂蛋白a； 系統(tǒng)性炎癥反應(yīng)； 動脈硬化

0 引 言

類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（rheumatoid arthritis,RA）是慢性系統(tǒng)性炎癥性疾病，常累及關(guān)節(jié)內(nèi)滑液，癥狀主要表現(xiàn)為對稱性多發(fā)關(guān)節(jié)炎，包括大小關(guān)節(jié)與關(guān)節(jié)外癥狀。患者可伴有動脈粥樣硬化與斑塊形成，而心血管疾病（cardiovascular disease，CVD）如心肌缺血、急性心肌梗死、中風(fēng)及冠心病等是RA的常見并發(fā)癥[1]，且CVD因素占RA患者致死率的35%～51%[2]。RA患者常伴有脂蛋白a（lipoprotein(a),Lp-a）水平升高[3]，Lp-a與低密度脂蛋白（low-density lipoprotein, LDL）結(jié)構(gòu)類似，具有膽固醇酯類與載脂蛋白B（apolipoprotein B,ApoB）的核心結(jié)構(gòu)域，載脂蛋白A（ApoA）再以二硫鍵連接于ApoB?；贏poA的片段大小不同，Lp-a已知共有34種亞型。Lp-a的表達(dá)水平和促動脈硬化作用均與ApoA的表型多樣性息息相關(guān)。其中，小分子Lp-a與動脈硬化的發(fā)生更為密切，類似于易被氧化并降低相關(guān)受體黏附作用的小LDL顆粒[4]。此外，因ApoA與纖溶蛋白高度同源，可與纖維蛋白結(jié)合抑制纖溶作用，故易導(dǎo)致斑塊形成從而促進(jìn)動脈硬化[5]。

除運(yùn)送膽固醇外，Lp-a還參與炎癥反應(yīng)與血栓形成。有報(bào)道稱促炎因子與急性時(shí)相反應(yīng)蛋白可導(dǎo)致動脈硬化[6]，Lp-a與急性時(shí)相反應(yīng)蛋白可促進(jìn)血管平滑肌細(xì)胞增殖與單核細(xì)胞的趨化作用。RA患者的系統(tǒng)性炎癥反應(yīng)常與炎癥因子腫瘤壞死因子α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、白細(xì)胞介素 6（interleukin-6，IL-6）及C反應(yīng)蛋白（C-reactive protein,CRP）等升高有關(guān)[7]。高Lp-a是動脈硬化的獨(dú)立風(fēng)險(xiǎn)因子，同時(shí)Lp-a也與炎癥反應(yīng)的發(fā)生過程相關(guān)。因此，本研究將對活動期RA患者與正常健康者的血清Lp-a水平進(jìn)行比較，并探討其與RA患者炎癥反應(yīng)指標(biāo)TNF-α、IL-6及CRP的相關(guān)性，以評估Lp-a水平作為RA患者CVD風(fēng)險(xiǎn)評價(jià)指標(biāo)的可行性。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選取2014年3月至2015年9月在新疆維吾爾自治區(qū)人民醫(yī)院住院并明確診斷為RA的患者30例（RA患者組），納入對象患者均符合1987年美國風(fēng)濕學(xué)會的RA診斷標(biāo)準(zhǔn)，年齡為25～80歲，平均年齡為（52.4±8.3）歲；其中男性14例，女性16例。對照組納入對象為與RA患者組性別與年齡分布相一致的無RA人群，男性14例，女性16例，平均年齡為（51.9±10.1）歲。兩組人群的排除標(biāo)準(zhǔn)均包括糖尿病、高血壓、妊娠及哺乳期婦女、其他自身免疫病、腫瘤、腎衰竭、肝衰竭與遺傳學(xué)家族性高脂血癥患者，服用降脂藥物人群，吸煙者以及酗酒者。所有實(shí)驗(yàn)流程均經(jīng)新疆維吾爾自治區(qū)人民醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)實(shí)行，納入研究對象均簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 脂代謝指標(biāo)檢測

對RA患者組和對照組人群進(jìn)行快速血樣采集后，血樣標(biāo)本均在4 h內(nèi)完成離心處理并檢測脂代謝指標(biāo)。其中，Lp-a的測定采用熒光免疫透射比濁法，儀器為雅培1600自動生化分析儀（美國雅培公司）；總膽固醇（total cholestrol,TC）的測定采用膽固醇氧化酶法，甘油三酯（triglyceride,TG）的測定采用甘油磷酸鹽氧化酶法，高密度脂蛋白膽固醇（highdensity lipoprotein cholesterol,HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C）與極低密度脂蛋白膽固醇（verylow-densitylipoprotein cholosterol,VLDL-C）的測定采用沉淀分析法，均通過西門子2400自動分析儀（德國西門子公司）完成。所有操作均按儀器及試劑操作說明書進(jìn)行，并采用標(biāo)準(zhǔn)酶試劑盒比對。

1.2.2 炎癥指標(biāo)檢測

CRP的測定采用免疫透射比濁法，所用儀器及試劑為西門子BNII特種蛋白分析儀及配套試劑（德國西門子公司）；炎癥因子TNF-α及IL-6的測定均采用酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）法檢測，對應(yīng)的ELISA試劑盒購自深圳晶美公司，所有步驟均嚴(yán)格按照操作說明書進(jìn)行，最后按標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算得出TNF-α及IL-6的含量。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，數(shù)據(jù)均以均值±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，RA患者組與對照組比較采用非配對性t檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Lp-a與炎癥指標(biāo)相關(guān)性分析采用Pearson's回歸分析。

2 結(jié)果

2.1 RA患者組與對照組脂代謝特征比較

對RA患者組與對照組血清Lp-a與脂代謝指標(biāo)水平進(jìn)行檢測并比較，結(jié)果如表1所示。可見RA患者組的血清Lp-a水平顯著高于對照組（P＜0.001），而HDL水平則顯著低于對照組（P＜0.05），差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。其他指標(biāo)如TC、TG、LDL-C及VLDL-C水平則無明顯變化，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。相關(guān)性分析結(jié)果表明，Lp-a水平與HDL-C水平無相關(guān)性（r=0.053，P＞0.05）。

表1 RA患者組與對照組間脂蛋白a水平與脂代謝指標(biāo)的比較（mg/dl）

2.2 RA患者組與對照組炎癥指標(biāo)比較

對RA患者組與對照組血清中炎癥指標(biāo)TNF-α、IL-6及CRP進(jìn)行檢測并比較，結(jié)果表明，RA患者組TNF-α、IL-6及CRP水平分別為（97.1±12.3）pg/ml、（28.6±3.8）pg/ml、（32.0±6.3）mg/L，而對照組TNF-α、IL-6及CRP水平分別為（17.1±10.2）pg/ml、（2.4± 0.8）pg/ml、（4.3±1.8）mg/L，RA患者組均顯著高于對照組（P＜0.05），提示這幾個(gè)指標(biāo)均為RA活動期時(shí)炎癥反應(yīng)的重要因素。鑒于前文已證實(shí)Lp-a水平在RA活動期時(shí)顯著升高，故可考慮對Lp-a與炎癥指標(biāo)進(jìn)行相關(guān)性分析。

2.3 Lp-a與RA患者炎癥指標(biāo)相關(guān)性分析

對RA患者血清中炎癥相關(guān)指標(biāo)（TNF-α、IL-6、及CRP）與Lp-a水平變動的相關(guān)性進(jìn)行分析，線性回歸分析結(jié)果如圖1所示，可見TNF-α與Lp-a升高在RA患者中相關(guān)性更為顯著（r=0.753，P＜0.001），IL-6也與Lp-a升高具有相關(guān)性（r=0.364，P＜0.05），而CRP與Lp-a則無相關(guān)性（r=0.049，P＞0.05）。

3 討論與結(jié)論

本研究證實(shí)RA患者的血清Lp-a水平升高，由于高水平Lp-a與CVD的風(fēng)險(xiǎn)已被證實(shí)，可見RA患者的Lp-a水平與其CVD發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)密切相關(guān)。既往報(bào)道認(rèn)為RA患者的Lp-a水平高于對照組，這與本研究結(jié)果相一致。有學(xué)者認(rèn)為Lp-a的合成增加或消耗減少及血管內(nèi)外分布異常均可導(dǎo)致RA患者的脂蛋白水平異常[8]。Lp-a與LDL-C的脂質(zhì)部分類似，其致動脈硬化的機(jī)制也可能類似，由于RA發(fā)病時(shí)網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞系統(tǒng)被過度激活，巨噬細(xì)胞吸附脂質(zhì)作用增強(qiáng)，故高Lp-a水平可能是動脈硬化的原因之一。RA患者的脂蛋白異常與動脈硬化有關(guān)，包括低HDL-C、高Lp-a及TG水平[9]。本研究結(jié)果也表明RA患者脂代謝特征為低HDL-C、高Lp-a及TG水平。有報(bào)道稱服用抗脂蛋白抗體可導(dǎo)致RA患者HDL-C降低，而本研究中RA患者無抗脂蛋白藥物服用史，HDL-C水平顯著低于對照組可能與RA患者急性時(shí)相反應(yīng)蛋白升高，導(dǎo)致HDL-C生理功能被抑制有關(guān)。

圖1 脂蛋白a與炎癥指標(biāo)的相關(guān)性回歸分析

RA患者主要表現(xiàn)為全身性系統(tǒng)性炎癥反應(yīng)，但高水平Lp-a在RA炎癥反應(yīng)中的作用機(jī)制尚未完全明了。Lp-a可結(jié)合并攜帶具有促炎作用的氧化磷脂[10]，其ApoA亞基抑制纖溶蛋白調(diào)控的谷氨酸纖維蛋白原向賴氨酸纖維蛋白原轉(zhuǎn)化的正反饋過程[11]，從而抑制纖溶作用、增進(jìn)凝塊、促進(jìn)血栓形成，同時(shí)也通過阻斷組織因子抑制劑來促進(jìn)凝血[12]。低HDL-C水平意味著心臟保護(hù)作用減弱，而LDL-C水平升高，意味著RA患者CVD風(fēng)險(xiǎn)增加[13]。本研究中RA患者的血清HLD-C水平降低，但未見TC、TG、LDL-C與VLDL-C水平發(fā)生變化，這可能與樣本數(shù)較少有關(guān)，后續(xù)可擴(kuò)大統(tǒng)計(jì)樣本量，以增加結(jié)果可靠性。

RA患者的全身性炎癥反應(yīng)導(dǎo)致了CVD相關(guān)的心血管損傷[14]。TNF-α是炎癥反應(yīng)的主要調(diào)控因子，IL-6也是炎癥反應(yīng)時(shí)的重要效應(yīng)因子[15]。本研究首次分別分析了Lp-a與TNF-α及IL-6在RA發(fā)病時(shí)的相關(guān)性，表明Lp-a水平升高與RA患者的系統(tǒng)性炎癥反應(yīng)有關(guān)。此外，CRP是急性炎癥反應(yīng)的敏感指標(biāo)之一，但本研究未見其與Lp-a具有直接相關(guān)性。這可能與影響CRP升高的因素較多有關(guān)，后續(xù)還需對多種影響因素進(jìn)行排查。已經(jīng)證實(shí)伴有低HDL-C水平時(shí)，CVD風(fēng)險(xiǎn)顯著增加[16]。因RA患者動脈硬化可經(jīng)超聲檢查進(jìn)行早期診斷[17]，故后續(xù)研究可結(jié)合影像學(xué)檢查對Lp-a及炎癥指標(biāo)與RA患者的發(fā)病影響進(jìn)行分析。高水平的LDL-C與RA患者的急性時(shí)相反應(yīng)有關(guān)，可導(dǎo)致代謝綜合征發(fā)生[18]。此外，急性時(shí)相反應(yīng)還與動脈硬化時(shí)內(nèi)皮細(xì)胞激活及促凝因子有關(guān)[19]。故還需對RA患者的炎癥指標(biāo)變化繼續(xù)進(jìn)行深入研究。RA患者動脈硬化及CVD的發(fā)生意味著心衰風(fēng)險(xiǎn)增加，這主要因心臟舒張功能不全引起射血功能下降所致[20-21]。本研究發(fā)現(xiàn)的Lp-a與炎癥指標(biāo)的協(xié)同變化，對RA患者的CVD預(yù)后具有較顯著的參考意義。

RA患者的炎癥反應(yīng)可導(dǎo)致心血管功能損傷，因此，對RA進(jìn)行早期診斷可盡早控制CVD相關(guān)風(fēng)險(xiǎn)因素。本研究結(jié)果表明，Lp-a水平在RA活動期時(shí)顯著升高，且與炎癥因子的變化密切相關(guān)，故Lp-a可作為RA患者CVD風(fēng)險(xiǎn)的篩查工具。

利益沖突 無

[1]Solomon DH,Goodson NJ,Katz JN,et al.Patterns of cardiovascular risk in rheumatoid arthritis[J].Ann Rheum Dis,2006,65(12):1608-1612.DOI:10.1136/ard.2005.050377.

[2]Sattar N,Mccarey DW,Capell H,et al.Explaining how"high-grade" systemic inflammation accelerates vascular risk in rheumatoid arthritis[J].Circulation,2003,108(24):2957-2963.DOI:10.1161/01. CIR.0000099844.31524.05.

[3]García-Gómez C,Nolla JM,Valverde J,et al.Conventional lipid profile and lipoprotein(a)concentrations in treated patients with rheumatoid arthritis[J].J Rheumatol,2009,36(7):1365-1370.DOI: 10.3899/jrheum.080928.

[4]Boekholdt SM,Arsenault BJ,Mora S,et al.Association of LDL cholesterol,non-HDL cholesterol,and apolipoprotein B levels with risk of cardiovascular events among patients treated with statins:a meta-analysis[J].JAMA,2012,307(12):1302-1309.DOI:10.1001/ jama.2012.366.

[5]Toms TE,Panoulas VF,Kitas GD.Dyslipidaemia in rheumatological autoimmune diseases[J].Open Cardiovasc Med J,2011,5:64-75. DOI:10.2174/1874192401105010064.

[6]Avouac J,Meune C,Chenevier-Gobeaux C,et al.Inflammation and disease activity are associated with high circulating cardiac markers in rheumatoid arthritis independently of traditional cardiovascular risk factors[J].J Rheumatol,2014,41(2):248-255.DOI:10.3899/ jrheum.130713.

[7]Stagakis I,Bertsias G,Karvounaris S,et al.Anti-tumor necrosis factor therapy improves insulin resistance,beta cell function and insulin signaling in active rheumatoid arthritis patients with high insulin resistance[J].Arthritis Res Ther,2012,14(3):R141.DOI:10. 1186/ar3874.

[8]Dursunogˇlu D,Evrengül H,Polat B,et al.Lp(a)lipoprotein and lipids in patients with rheumatoid arthritis:serum levels and relationship to inflammation[J].Rheumatol Int,2005,25(4):241-245.DOI:10.1007/s00296-004-0438-0.

[9]焦艷,金蓉,張宗華,等.缺血性腦卒中患者頸動脈狹窄程度與同型半胱氨酸相關(guān)性分析[J].國際生物醫(yī)學(xué)工程雜志,2015,38 (2):91-94.DOI:10.3760/cma.j.issn.1673-4181.2015.02.007. Jiao Y,Jin R,Zhang ZH,et al.Correlation study of carotid artery stenosis and the degree of homocysteine in ischemic stroke patients [J].Int J Biomed Eng,2015,38(2):91-94.DOI:10.3760/cma.j.issn. 1673-4181.2015.02.007.

[10]Tsimikas S,Brilakis ES,Miller ER,et al.Oxidized phospholipids, Lp(a)lipoprotein,and coronary artery disease[J].N Engl J Med,2005, 353(1):46-57.DOI:10.1056/NEJMoa043175.

[11]Feric NT,Boffa MB,Johnston SM,et al.Apolipoprotein(a)inhibits the conversion of Glu-plasminogen to Lys-plasminogen:a novel mechanism for lipoprotein(a)-mediated inhibition of plasminogen activation[J].J Thromb Haemost,2008,6(12):2113-2120.DOI:10. 1111/j.1538-7836.2008.03183.x.

[12]Nordestgaard BG,Chapman MJ,Ray K,et al.Lipoprotein(a)as a cardiovascular risk factor:current status[J].Eur Heart J,2010,31(23): 2844-2853.DOI:10.1093/eurheartj/ehq386.

[13]Mcentegart A,Capell HA,Creran D,et al.Cardiovascular risk factors,including thrombotic variables,in a population with rheumatoid arthritis[J].Rheumatology(Oxford),2001,40(6):640-644.DOI:10.1093/rheumatology/40.6.640.

[14]Briggs G.The relationship between rheumatoid arthritis and heart failure[J].J Manag Care Med,2011,12(4):35-40.

[15]張進(jìn)進(jìn),范力星,余元倫,等.間充質(zhì)干細(xì)胞移植對燒傷大鼠的炎癥調(diào)節(jié)作用初探[J].國際生物醫(yī)學(xué)工程雜志,2015,38(1):19-24.DOI:10.3760/cma.j.issn.1673-4181.2015.01.005. Zhang JJ,Fan LX,Yu YL,et al.Immunosuppression effects of MSCs transplantation in rat burn models[J].Int J Biomed Eng,2015,38(1): 19-24.DOI:10.3760/cma.j.issn.1673-4181.2015.01.005.

[16]Ago■ton-Coldea L,Rusu LD,Zdrenghea D,et al.Lipoprotein(a)and lipid and non-lipid risk factors in coronaries risk assessment[J].Rom J Intern Med,2008,46(2):137-144.DOI:10.1890/04-0546.

[17]Park YB,Ahn CW,Choi HK,et al.Atherosclerosis in rheumatoid arthritis:morphologic evidence obtained by carotid ultrasound[J]. Arthritis Rheum,2002,46(7):1714-1719.DOI:10.1002/art.10359.

[18]Hurt-Camejo E,Paredes S,Masana L,et al.Elevated levels of small, low-density lipoprotein with high affinityforarterialmatrix components in patients with rheumatoid arthritis:possible contribution of phospholipase A2 to this atherogenic profile[J]. Arthritis Rheum,2001,44(12):2761-2767.DOI:10.1002/1529-0131(200112)44:12＜2761::AID-ART463＞3.0.CO;2-5.

[19]Tuttolomondo A,Di Raimondo D,Pecoraro R,et al.Atherosclerosis as an inflammatory disease[J].Curr Pharm Des,2012,18(28):4266-4288.DOI:10.2174/138161212802481237.

[20]Nicola PJ,Maradit-Kremers H,Roger VL,et al.The risk of congestive heart failure in rheumatoid arthritis:a population-based study over 46 years[J].Arthritis Rheum,2005,52(2):412-420.DOI: 10.1002/art.20855.

[21]Davis JM 3rd,Roger VL,Crowson CS,et al.The presentation and outcome of heart failure in patients with rheumatoid arthritis differs from that in the general population[J].Arthritis Rheum.2008,58(9): 2603-2611.DOI:10.1002/art.23798.

Correlation between lipoprotein(a)and inflammation markers in rheumatoid arthritis patients

Gao Ting,Fu Yuhua,Li Xiaoling,Fu Jianfeng
Department of laboratory,Urumqi General Hospital of Lanzhou Military Region,Urumqi 830000,China(Gao T,Li XL, Fu JF);Department of laboratory,the North Yard of Xinjiang People's Hospital,Urumqi 830000,China(Fu YH) Corresponding author:Fu Jianfeng,Email:13319805828@qq.com

Objective To compare the lipoprotein(a)(Lp-a)and lipid metabolism level in rheumatoid arthritis(RA)patients and control group(healthy subjects),and evaluate the correlation between Lp-a levels and systemic inflammation in patients with RA.Methods Blood samples from 30 RA patients with positive rheumatoid factor and 30 healthy controls were collected,with same distribution of gender and age in both groups.Lipid metabolism level such as Lp-a,triglyceride(TG),total cholesterol(TC),high-density lipoprotein cholesterol(HDL-C), low-density lipoprotein cholesterol(LDL-C),very low-density lipoprotein cholesterol(VLDL-C)and inflammation markers such as tumor necrosis factor α(TNF-α),interleukin 6(IL-6)and C reactive protein(CRP)were detected and analyzed statistically.Results LP-a levels were higher in RA patients than that of control group(P＜0.001),HDL-C levels were lower in RA group(P＜0.05),while TC,TG,LDL-C and VLDL-C levels showed no difference(P＞0.05).The TNF-α、IL-6 and CRP levels of RA patients were higher than that of control group(P＜0.05),and the association between higher Lp-a level and TNF-α were confirmed(r=0.753,P＜0.001).Conclusions High levels of Lp-a are often observed in RA patients,and a rising Lp-a level are associated with systematic inflammation reaction.Lp-a may be a risk factor for RA progress.

Rheumatoid arthritis;Lipoprotein(a);Systematic inflammation reaction;Atherosclerosis

伏建峰，Email:13319805828@qq.com

10．3760/cma．j．issn．1673-4181．2016．02．010

2015-12-12）