周建德

（昆明鐵路局疾病預(yù)防控制中心 云南昆明 650011）

艾滋病病毒抗體檢測初篩實驗室室內(nèi)質(zhì)量控制措施探微

周建德

（昆明鐵路局疾病預(yù)防控制中心 云南昆明 650011）

目的：為提高艾滋病病毒抗體初篩檢測實驗精度，降低誤檢或漏檢率，提高檢測工作質(zhì)量。方法：我實驗室嚴格按照《艾滋病檢測質(zhì)量管理工作指南》開展艾滋病病毒抗體初篩檢測實驗。結(jié)果：艾滋病病毒抗體初篩檢測結(jié)果準確性符合標準，工作質(zhì)量得到提高。結(jié)論：必須關(guān)注影響艾滋病初篩檢測結(jié)果準確性的因素，采取有效的實驗室室內(nèi)質(zhì)量控制措施，從而提高實驗室檢測水平及工作能力。

艾滋病病毒抗體初篩檢測 質(zhì)量控制 措施探微

隨著社會經(jīng)濟的快速發(fā)展，不同地區(qū)及人們之間交流的逐漸增加，艾滋病防治形勢日漸嚴峻，病情監(jiān)測與抗體檢測工作任務(wù)逐漸加重，而確保檢測結(jié)果的準確性是HIV抗體檢測工作的首要要求［1］。然而HIV抗體檢測實際工作中，其檢測結(jié)果卻受到實驗室環(huán)境、工作人員能力、態(tài)度等因素的影響。因此我們有必要探討提高HIV抗體檢測初篩實驗室的室內(nèi)控制措施。具體報告如下：

1 資料與方法

1.1一般資料

1.1.1 試劑［2］我實驗室檢測工作中采用的試劑有英科新創(chuàng)試劑（廈門英科新創(chuàng)科技有限公司生產(chǎn)）和珠海麗珠試劑（珠海麗珠試劑股份有限公司生產(chǎn)）。同時，實驗室采用的2種試劑經(jīng)過國家衛(wèi)生部批準注冊并且均在規(guī)定的有效期內(nèi)使用，質(zhì)量可靠。

1.1.2 血清來源 本實驗室檢測血清均來源于昆明鐵路公安處看守所羈押人員。

1.1.3 儀器設(shè)備 本實驗室用到的儀器有：酶標儀、移液器、洗板機、生物安全柜、恒溫水浴箱等；所有儀器均經(jīng)過云南省計量測試技術(shù)研究院校準合格并在有效期內(nèi)使用。

1.2 操作及質(zhì)量控制措施

1.2.1 弱陽性外部對照質(zhì)控血清制備 混合HIV抗體檢測呈陽性或陰性的正常人血清，對其進行離心過濾處理3000轉(zhuǎn)/min，離心15min；隨后進行過濾除菌處理（0.2μm生物濾膜）；然后在56攝氏度下持續(xù)加熱30min完成熱滅活處理。用抗體陰性正常血清稀釋抗體強陽性血清，稀釋度保持在OD值處于2-3倍Cut-off值范圍內(nèi)。批量植被后分裝塑料試管保存在-70℃冰箱內(nèi)備用。

1.2.2 嚴格按照試劑盒說明書檢測步驟進行艾滋病病毒抗體初篩檢測。

1.2.3 質(zhì)控措施

1.2.3.1 室內(nèi)設(shè)施與環(huán)境控制 實驗室應(yīng)完全符合《全國艾滋病檢測工作規(guī)范》的要求，并具備清潔區(qū)、污染區(qū)、半污染區(qū)等獨立區(qū)域。實驗室溫度嚴格控制在18-23攝氏度之間。另外，實驗室應(yīng)符合BSL-2要求。

1.2.3.2 儀器設(shè)備控制 檢測用到的實驗設(shè)備應(yīng)齊全，各類防護設(shè)施用品完備；酶標儀、溫度計、移液器、高壓滅菌器等儀器需每年進行1次強制性檢定并在有效期內(nèi)使用。

1.2.3.3 人員控制 實驗室至少要具備三名以上專業(yè)技術(shù)人員，其中：具有中級技術(shù)職稱且有2年以上本工作經(jīng)驗的人員至少1名。并且所有人員都需接受相應(yīng)的省級技術(shù)培訓(xùn)并取得資格證書；每2年至少接受一次省級技術(shù)規(guī)范復(fù)訓(xùn)。另外，專業(yè)技術(shù)人員還應(yīng)取得壓力容器作業(yè)資格證書，具備高壓滅菌器操作資格。

1.2.3.4 檢測方法控制 嚴格按照2009版《全國艾滋病檢測工作規(guī)范》進行檢測。

1.2.3.5 檢測質(zhì)量控制 ①嚴格按照試劑盒說明書設(shè)立陽性和陰性血清對照；②嚴格按照規(guī)范制備外部對照質(zhì)控血清；③根據(jù)外部對照質(zhì)控血清的測定數(shù)據(jù)建立質(zhì)控圖，并對質(zhì)控圖進行仔細分析與總結(jié)，且存檔保存質(zhì)控圖。

1.2.3.6 實驗室管理控制 必須建立嚴格的生物安全管理制度和實驗室管理制度，且各項操作均需具備規(guī)范的作業(yè)指導(dǎo)書。在進行日常管理時應(yīng)該嚴格樣品接收登記記錄、檢測原始記錄、酶標儀打印記錄、廢棄物消毒記錄、儀器維護與使用記錄、儀器維修與檢定記錄等工作，不能遺漏任何一項，同時每天填寫實驗室工作日志。而且，酶標儀打印記錄與樣品結(jié)果報告必須保持一致。另外，實驗室內(nèi)的所有檔案均需要保存15年以上，并且要確保檔案文件的完整性。

2 結(jié)果

檢測過程中未出現(xiàn)異常，質(zhì)控血清測定值未超過±2s；且質(zhì)控血清測定值均勻散落在均值兩側(cè)，未出現(xiàn)連續(xù)幾個值（3-5個）落于一側(cè)的狀況；另外，不存在連續(xù)幾個值（5-7個）按照同一方向分布的情況發(fā)生。

3 討論

艾滋病病毒抗體初篩檢測實驗中導(dǎo)致檢測工作質(zhì)量失控的原因，根據(jù)以往的實踐研究可以發(fā)現(xiàn)，導(dǎo)致質(zhì)量失控的常見原因有：酶標儀等實驗室儀器未能定期檢定；移液器等需要校準的儀器未能及時校準；實驗室溫度過高或者過低，超出規(guī)定范圍；溫育時間不準確，過長或者過短；實驗室所用電源電壓不穩(wěn)致使儀器出現(xiàn)波動；實驗所用試劑質(zhì)量不合格或超過試劑有效期使用；試劑批號出現(xiàn)變化等等［3］。

一旦實驗室檢測中出現(xiàn)以上問題，我們必須要終止檢測，及時采取措施糾正問題，并再進行重復(fù)檢測。然而在檢測中做好質(zhì)量控制管理才是確保檢測工作質(zhì)量的關(guān)鍵。結(jié)合本實驗室工作，我們發(fā)現(xiàn)在實驗中應(yīng)該做好的室內(nèi)質(zhì)量控制管理措施主要有以下三點：

第一，嚴格按照《全國艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范》等有相關(guān)部門制定的規(guī)章制度，結(jié)合自身實驗室的實際情況建立嚴格、規(guī)范、全面、系統(tǒng)的質(zhì)量管理體系。對實驗室環(huán)境、工作人員、儀器、檢測流程等進行嚴格管理要求。

第二，檢測必須要建立質(zhì)控圖，有質(zhì)控圖才能保證在檢測中及時對失控原因進行查找糾正，降低假陽性及假陰性結(jié)果出現(xiàn)機率，提高檢測結(jié)果的準確性。

第三，實驗室工作人員要及時積極參加市級及以上規(guī)格的技術(shù)培訓(xùn)活動及能力驗證考核，不斷提高自己的工作能力水平，充實自己的工作經(jīng)驗。

［1］袁彬，吳蘭，王玲，等.艾滋病初篩實驗室質(zhì)量控制影響因素［J］.中國傷殘醫(yī)學(xué)，2014，（16）：131-132.

［2］常艷萍.基層艾滋病初篩實驗室的質(zhì)量控制［J］.世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘（連續(xù)型電子期刊），2015，（32）：136-136.

［3］胡倫文，雷少華.探討艾滋病初篩實驗室的規(guī)范化建設(shè)和管理［J］.中國衛(wèi)生產(chǎn)業(yè)，2015，（5）：97-98.

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A

1674-2060（2016）02-0079-01