宋開艷，孫濤，何健，任玲

1.喀什地區(qū)林業(yè)技術(shù)推廣站2.喀什地區(qū)林業(yè)有害生物防治檢疫局，新疆喀什844000

喀什紅棗病害致病菌分離鑒定及藥劑防治研究

宋開艷1，孫濤2，何健1，任玲2

1.喀什地區(qū)林業(yè)技術(shù)推廣站2.喀什地區(qū)林業(yè)有害生物防治檢疫局，新疆喀什844000

由于喀什地區(qū)農(nóng)民栽培管理技術(shù)的不到位及投入不足，導致部分紅棗園內(nèi)紅棗果實病害發(fā)生，嚴重制約著喀什地區(qū)紅棗產(chǎn)業(yè)的發(fā)展和林農(nóng)增收。本文通過對紅棗病害的致病菌分離鑒定和室內(nèi)藥劑防治的效果研究，了解紅棗黑斑病、縮果病的發(fā)病原因和規(guī)律，篩選出有效的防治藥劑并進行推廣應用，為今后紅棗病害研究提供理論依據(jù)。

喀什；紅棗；致病菌；分離；防治研究

喀什位于新疆南部，具有充足的光熱資源，無霜期長，晝夜溫差大，降雨少，氣候干燥等獨特的氣候條件，適宜紅棗產(chǎn)業(yè)快速發(fā)展。目前全地區(qū)紅棗種植面積已達200萬畝，但近幾年，由于喀什地區(qū)降水逐步增多，紅棗直播建園矮化密植栽培模式廣泛采用，農(nóng)民栽培管理技術(shù)不到位，投入不足，導致部分棗園紅棗果實病害嚴重發(fā)生，尤其駿棗果實發(fā)病率高達50%以上。通過目前初步判定的紅棗果實病害主要有黑斑病、縮果病、裂果病等，這些病害如不及時有效控制，將嚴重制約著喀什地區(qū)紅棗產(chǎn)業(yè)的發(fā)展和林農(nóng)增收。本文通過致病菌分離鑒定和室內(nèi)藥劑防治效果研究，了解紅棗黑斑病、縮果病的發(fā)病原因和規(guī)律，篩選出防治紅棗黑斑病、縮果病的有效藥劑進行推廣應用，為今后紅棗病害研究提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

紅棗品種：灰棗和駿棗。

品種來源：疏勒縣、岳普湖縣、麥蓋提縣等地的棗園。

1.2 方法

1.2.1 原料的預處理

采回的紅棗樣品，用溫水清洗干凈后放入冰箱保鮮層存放。

1.2.2 病原菌的分離

采用組織塊分離法。挑選紅棗病果10個進行組織分離，用70%酒精進行表面消毒，然后用無菌水進行沖洗3次放入超凈工作臺上。在無菌工作臺中，用解剖刀在病健交界處切取果實組織0.5 cm2先放人70%的酒精中l(wèi)min，再放入升汞中3 min進行消毒，最后用無菌水進行表面沖洗3次后再植入PDA上，置于27℃恒溫箱中培養(yǎng)23d，當培養(yǎng)出的菌落生長到直徑為1cm時，用接種針在菌落邊緣挑取少量菌絲植入另一PDA上培養(yǎng)，重復上述操作即可作為純化菌種備用。

1.2.3 致病性鑒定

（1）把分離純化的菌株返接在紅棗果實上的準備：選取健康無病果實，用清水洗凈后再用70%酒精浸泡1min，用無菌水沖洗后，放在超凈工作臺上吹干備用。每個菌株接種在5個健康紅棗果實上，并且分為有傷、無傷以及空白對照。（2）接種所用病原菌的制備：挑選在PDA上培養(yǎng)4～5d的新鮮菌株，用打孔器（直徑為5mm）打菌餅。（3）返接試驗：把已純化的菌株接種在健康果實上，分有傷和無傷2種接種方式。通過接種觀察病斑發(fā)展速度與發(fā)病程度，判斷菌株致病能力的大小。有傷接種方式：先在每個葡萄果粒上分別用接種針刺破5個孔眼可集中在一起使直徑約為5mm；再把病原菌株接種在傷口處，分別在25℃和5℃條件下培養(yǎng)4～5d。無傷接種方式為取健康紅棗果實直接接種，分別在25℃和5℃條件下培養(yǎng)4～5d。

1.2.4 返接后培養(yǎng)

把接種后的果實放人250mL燒杯內(nèi)培養(yǎng)，蓋口用八層紗布蓋住并用繩子系緊，可以起到保濕、密封、透氣、防污染的作用。

1.2.5 病原茵鑒定

把分離到的各種菌株重新接種在寄主果實上，如果發(fā)病癥狀與貯運中腐爛癥狀相符合，才能作為采后病害病原菌，然后進一步鑒定到屬種。根據(jù)各致病菌株在PDA上的菌落特征，分生孢子及分生孢子梗形態(tài)特征進行鑒定，并且挑取少量菌絲進行鏡檢，然后根據(jù)形態(tài)特征，參照有關(guān)鑒定手冊鑒定到屬[1-4]。

1.2.6 防治藥劑的篩選

采用平皿生長速率法篩選藥劑。80%代森錳鋅可濕性粉劑、40%腈菌唑可濕性粉劑、24%腈苯唑懸浮劑、78%波爾·錳鋅（波爾多液48%、代森錳鋅30%）、福星（氟硅唑乳油）等5種藥劑與PDA培養(yǎng)基混合稀釋成不同濃度（表1）倒入培養(yǎng)皿中，在PDA平板中接種一個病原菌餅，25℃恒溫培養(yǎng)，逐日觀察并記錄結(jié)果。

2 結(jié)果與分析

2.1 致病菌的分離與鑒定

根據(jù)菌株的培養(yǎng)形態(tài)特征和致病力測定結(jié)果，依據(jù)真菌分離物在PDA培養(yǎng)基上的菌落特征，顯微鏡下觀察到的分生孢子及分生孢子梗形態(tài)特征，參照《真菌鑒定手冊》，初步確定引起紅棗黑斑病和縮果病的病原菌為細鏈格孢菌lternaria alternate（Fr.）。

2.2 黑斑病和縮果病癥狀及發(fā)病規(guī)律

2.2.1 黑斑病

8月份果實開始初顯癥狀，病斑凹陷，深褐色至黑色，直徑3～5mm，擴展較慢，遇到雨水較多的天氣，病果將會大量出現(xiàn)，尤其發(fā)生裂果的果實發(fā)病最為迅速，并組織呈倒半圓形，深入果肉3～5 mm，病斑表面長長出黑色霉狀物。采收后保險貯藏或晾曬期感病的，病斑出現(xiàn)的部位不確定，發(fā)病較為迅速。

2.2.2 縮果病

在幼果期和果實膨大期開始發(fā)病，平均氣溫達到23～26℃時為盛發(fā)期，若遇到多雨潮濕天氣，易暴發(fā)成災[5]。發(fā)病初期，現(xiàn)在肩部形成不規(guī)則的變色斑，邊緣清晰，進而果皮呈水漬狀斑塊，土黃色，病果逐漸失水而發(fā)軟萎縮。果肉初為淺土黃色小斑塊，逐漸向果肉深層延伸，嚴重時整個果肉變?yōu)辄S褐色，組織呈海綿狀壞死，味苦。果柄變?yōu)楹稚蚝诤稚?，提前形成離層而脫落。被侵害果實的癥狀通常有暈環(huán)、水漬、提前著色、萎縮和脫落5個階段[6]。

2.3 病原菌侵入途徑和致病溫度

通過致病力測定和返接實驗，發(fā)現(xiàn)細鏈格孢菌在有傷和無傷條件下均可侵入組織，潮濕環(huán)境發(fā)病最為嚴重，低溫和高溫狀態(tài)下均可致病。

2.4 防治藥劑的篩選

經(jīng)平皿生長速率法進行篩選，發(fā)現(xiàn)40%腈菌唑可濕性粉劑2000倍液和福星（氟硅唑乳油）8000倍液對致病菌的抑菌效果最好，抑菌率為96%，78%波爾·錳鋅抑菌500倍液抑菌效果最差，抑菌率為51.38%。詳見表1。

表15 種稀釋成不同梯度的藥劑對致病菌的抑制效果

3 結(jié)論與討論

研究發(fā)現(xiàn)細鏈格孢菌Alternariaalternate能引起紅棗果實黑斑病和縮果病。通過展開室內(nèi)藥劑篩選試驗得出，40%腈菌唑可濕性粉劑2000倍液和福星（氟硅唑乳油）8000倍液對致病菌的抑菌效果最好，適合大力推廣應用。縮果病發(fā)病較早造成果實提前掉落，黑斑病在果實著色期才開始發(fā)病，遇到多雨潮濕天氣，紅棗果實出現(xiàn)裂果，三種病害混合發(fā)生，發(fā)病迅速，防治難度增加，造成紅棗產(chǎn)量和品質(zhì)降低。但不同的棗品種抗病能力不同，駿棗發(fā)病重，灰棗發(fā)病較輕，密植棗園發(fā)病重，間作棗園的發(fā)病率普遍高于單作棗園，綜合管理水平高，樹勢強的發(fā)病輕[7]。

[1]方仲達.植病研究方法[M].北京:農(nóng)業(yè)出版社,1997．

[2]魏景超.真菌鑒定手冊[K].上海:上海科技出版社,1979．

[3]陸家云.真菌病害診斷(第二版)[M].北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,1997．

[4]俞大鈸,植物病理和真菌技術(shù)匯編[G].北京:人民教育出版社,1977．

[5]湯顯春,張立春.中國新疆阿克蘇紅棗病蟲害及其防治措施[G]//干果研究進展(5).北京中國農(nóng)業(yè)科技出版社, 2007:347-356．

[6]張朝紅,劉盂軍.棗縮果病研究進展[J].山西農(nóng)業(yè)科學，2009(1):74-77.

[7]曲曉晨.太谷棗區(qū)縮果病危害及發(fā)病規(guī)律調(diào)查[J].山西林業(yè)，2007(3):38-39．

10.3969/j.issn.1007-3574.2016.03.025

宋開艷（1985年—），新疆喀什人，碩士學歷，研究方向為果樹學。

2016-05-08