粟理禮

(廣西壯族自治區(qū)南溪山醫(yī)院，廣西 桂林　541002)

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干化學法與智能顯微鏡檢聯(lián)合檢測尿液紅細胞和白細胞的應用價值*

粟理禮

(廣西壯族自治區(qū)南溪山醫(yī)院，廣西 桂林541002)

摘要：目的探討干化學法與智能顯微鏡檢法聯(lián)合檢測尿液紅細胞(RBC)和白細胞(WBC)的臨床應用價值。方法通過2種方法檢測住院患者22842例中段尿液，對尿液RBC和WBC的檢測結果進行比較。結果尿液干化學法與智能顯微鏡檢RBC和WBC的結果P均<0.01，差異具有統(tǒng)計學意義。2種方法檢測RBC(3+)符合率為95.1%，(2+)符合率為82.2%，(1+)符合率為49.0% ，(-)符合率為95.1%；WBC(3+)符合率為97.9%，(2+)符合率為90.2%，(1+)符合率為64.2%，(-)符合率為89.4%。尿液干化學法RBC陽性率為19.4%，WBC陽性率為16.0%，智能顯微鏡檢RBC陽性率為16.8%，WBC陽性率為21.5%。結論2種方法聯(lián)合檢測尿液RBC和WBC具有快速、簡便、易于規(guī)范化和標準化的優(yōu)點，提高了工作效率及尿液檢測結果的準確性。

關鍵詞：尿液干化學法；智能顯微鏡檢；紅細胞；白細胞

臨床中采用尿液自動化分析儀進行檢測已得到廣泛的認可，該方法具有標本用量少、速度快、項目多、重復性好等優(yōu)點。而傳統(tǒng)人工顯微鏡檢由于存在一定的局限性，已經(jīng)不能滿足當前需要[1]，近年來隨著科技的進步，檢驗儀器得以迅速發(fā)展，尿常規(guī)的檢測已經(jīng)進入了自動化的時代，顯微鏡形態(tài)學鏡檢自動化劃時代的突破，機器視覺做鏡檢(智能顯微鏡檢)，可以在一定程度上代替人工顯微鏡檢，從而提高工作效率和檢出率。而單純應用干化學法對尿常規(guī)進行檢測，因方法學影響因素干擾而具有較多假陰性和假陽性，傳統(tǒng)人工顯微鏡檢速度慢、重復性差。本研究用AVE-752全自動尿液干化學分析儀與AVE-764B全自動尿液有形成分分析儀測定尿常規(guī)，分析尿液干化學法與智能顯微鏡檢檢測尿液RBC和WBC兩種方法統(tǒng)計學差異結果符合率?，F(xiàn)報告如下。

1材料與方法

1.1材料搜集本院2014年6月至2015年5月住院患者22842例，男12201例，女10641例，年齡1月至103歲?；颊哂靡淮涡詽崈舾稍锏乃芰夏虮羧≈卸文蛞杭s50 ml，取10 ml置于有蓋一次性塑料尿管中并盡快送檢，2h內(nèi)完成檢測。

1.2儀器和試劑AVE-752全自動尿液干化學分析儀，AVE-764B全自動尿液有形成分分析儀。兩個檢測系統(tǒng)均使用原裝配套試劑。

1.3檢測方法

1.3.1干化學分析法嚴格遵守儀器操作規(guī)范流程進行，用高、低值兩種質控品進行室內(nèi)質量控制，若在控，尿液標本去蓋，放入自動進樣器進行檢測。

1.3.2智能顯微鏡檢法嚴格遵守儀器操作規(guī)范流程進行，樣本進行檢測前將儀器焦距校準，采用配套質控品對室內(nèi)質量進行控制，確保儀器正常運行。由干化學法檢測過的尿液經(jīng)儀器自動傳輸至樣裝置，轉移到AVE-764B尿液有形成分分析儀，儀器自動混勻后進行自動顯微鏡檢，通過全自動顯微鏡和數(shù)碼圖像采集單元的配合，采用計算機圖像處理與識別軟件，自動跟蹤、識別和分類計數(shù)尿液有形成分，再通過檢驗人員進行輔助判別及確認后得出最終檢測結果。

1.4判斷標準

1.4.1AVE-752全自動尿液干化學分析儀法檢測結果所對應的RBC數(shù)分別為：(-)為<5 cell /μl、(1+)約5~10 cell /μl、(2+)約50 cell /μl、(3+)約300 cell /μl；WBC數(shù)分別為：(-)為<10 cell /μl、(1+)約25 cell /μl、(2+)約75 cell/μl、(3+)約500 cell/μl。

1.4.2AVE-764B全自動尿液有形成分分析儀法RBC：男性0~4.5 cell /μl，女性0~7.5 cell /μl；WBC：男性0~5.75 cell/μ l，女性0~13.5 cell /μl；超出此范圍為陽性[2]。

1.5統(tǒng)計學處理采用SPSS17.0軟件進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計學分析，構成比的比較采用χ2檢驗，以P≤0.05為具有統(tǒng)計學意義。

2結果

22842例住院患者尿液標本RBC和WBC尿液干化學法與智能顯微鏡檢法檢測結果見表1，2。

表1　尿液干化學法與智能顯微鏡檢RBC的結果比較(n)

注：χ2=318.6，P<0.01。

表2　尿液干化學法與智能顯微鏡檢WBC的結果比較(n)

注：χ2=79.6，P<0.01。

尿液干化學法與智能顯微鏡檢RBC、WBC的結果P均<0.01，差異具有統(tǒng)計學意義。2種方法檢測RBC(3+)符合率為95.1%，(2+)符合率為82.2%，(1+)符合率為49.0% ，(-)符合率為95.1%；WBC(3+)符合率為97.9%，(2+)符合率為90.2%，(1+)符合率為64.2%，(-)符合率為89.4%。尿液干化學法RBC陽性率為19.4%，WBC陽性率為16.0%，智能顯微鏡檢RBC陽性率為16.8%，WBC陽性率為21.5%。

3討論

造成尿液干化學法與智能顯微鏡檢RBC、WBC的結果差異具有統(tǒng)計學意義的主要原因是干化學法對RBC和WBC等屬于間接檢測，對RBC及WBC形態(tài)特征和血尿來源無法進行判斷，另外由于儀器和試劑的質量問題以及受到其他干擾因素的影響，出現(xiàn)假陽性和假陰性所致。智能顯微鏡檢誤認的主要原因是圓形草酸鈣、真菌孢子在形態(tài)上與RBC相似；小圓上皮細胞、鱗狀上皮細胞脫核，滴蟲等成分與WBC相似，出現(xiàn)假陽性。對這些雜質較多的樣本，檢驗人員要認真閱圖，加以甄別、判定以改正。有時受尿的滲透壓、pH、尿液在膀胱中儲存過久以及病理情況的影響而尿中RBC、WBC破壞，出現(xiàn)假陰性。因此，當出現(xiàn)兩種方法進行測定的結果不相符合的同時，應由臨床醫(yī)師視病情情況進行綜合判斷，避免出現(xiàn)誤診和漏診。

本研究結果顯示，尿液干化學法檢測RBC的陽性率較智能顯微鏡檢法高(干化學法為19.4%，智能顯微鏡檢法為16.8%)，WBC的陽性率低(干化學法為16.0%，智能顯微鏡檢法為21.5%)，與柯慶喜等[3]報道一致。干化學法檢查尿RBC主要是通過尿試紙帶里面的四甲基聯(lián)苯胺，與尿液里面具有氧化酶樣的活性物質(血紅蛋白及肌紅蛋白等)發(fā)生作用，使得四甲基聯(lián)苯胺脫氫由無色變?yōu)樗{色，其能夠對完整的或者破壞的RBC均有反應，也能夠對游離的血紅蛋白發(fā)生反應[4]。部分腎病患者尿液中含有對熱不穩(wěn)定酶、肌紅蛋白、菌尿等，造成了干化學法檢測顯示假陽性[5]；次氯酸鹽、甲醛或含有過氧化物的清潔劑也可引起假陽性。若尿液標本中含有大量維生素C，pH值<5，高比重尿、高蛋白等，也可以造成假陰性的出現(xiàn)。另外當RBC膜的脆性增大時，容易出現(xiàn)假陰性，通過智能顯微鏡觀察可發(fā)現(xiàn)完整的RBC。腎病患者RBC在腎臟或泌尿道被破壞，或者尿pH值偏高以及尿滲透壓過低等，也可導致假陽性。干化學法對WBC進行檢測主要是通過中性粒細胞胞質中的脂酶對試劑條帶模塊內(nèi)的吲哚酚酯起到作用，使得吲哚酚酯釋放出吲哚酚，吲哚酚與重氮鹽發(fā)生反應出現(xiàn)紫色，利用其顯色深淺轉換為WBC個數(shù)。不過該方法僅可以對胞質中脂酶的粒細胞進行檢測，無法判斷缺乏脂酶的WBC。因此，在尿液中出現(xiàn)單核細胞或淋巴細胞時，就可導致假陰性。另外當尿蛋白>5 g/L或者是尿液中含有大劑量先鋒藥物Ⅳ或慶大霉素等藥物時，也可導致結果偏低或假陰性出現(xiàn)。尿液被尿素、甲醛、陰道分泌物以及高濃度膽紅素等污染時，則會出現(xiàn)假陽性。AVE-764B尿液有形成分分析儀主要是采用“機器視覺”技術，通過CCD對流動計數(shù)池內(nèi)尿液有形成分的圖像進行攝取，并傳輸至計算機圖像采集卡對圖像進行采集，由計算機自動識別，對可疑的細胞進行人工判讀審核，人機結合對尿液內(nèi)有形成分的形態(tài)做出識別再分類計數(shù)，最終得出單位體積內(nèi)尿液中有形成分的數(shù)量[6]。RBC和WBC相似的部分尿液有形成分是導致RBC及WBC檢測假陽性的主要干擾因素。因此，當存在相似的干擾因素時，應當仔細閱圖，認真進行甄別和判定，確保結果的準確性和可靠性。

綜上所述，尿液干化學法可以對RBC破壞后的血紅蛋白進行檢測，有利于腎病和溶血性疾病的診斷，當智能顯微鏡檢無法判斷破壞的尿液RBC形態(tài)時，高靈敏度的干化學法能夠提供一定的參考價值，對智能顯微鏡檢的不足起到了彌補作用。但是，單純依賴干化學法可能會導致誤診和漏診的發(fā)生，本研究顯示RBC(2+)符合率為82.2%、(1+)符合率為49.0%，WBC(1+)符合率為64.2%、(-)符合率為89.4%，正好說明誤診和漏診的存在。而智能顯微鏡檢能檢測尿中淋巴細胞、單核細胞及其他細胞成分，又彌補了干化學法的不足。所以將干化學法與智能顯微鏡檢法有機地結合起來，不僅實現(xiàn)了檢測全自動化，簡化分析過程，縮短檢測時間，提高工作效率；同時降低假陽性及假陰性，有效地保證尿液紅細胞白細胞檢測結果的準確性。為臨床診斷、治療提供可靠的實驗數(shù)據(jù)，大大提高其臨床應用價值。

參考文獻：

[1]叢玉隆,馬駿龍.尿液有形成分鏡檢與自動化檢測方法學利弊和互補分析[J].中國檢驗醫(yī)學雜志,2009,32(6):609-611.

[2]叢玉隆,馬駿龍,岳秀玲,等.中國健康人尿液顯微鏡檢測法有形成分結果調(diào)查[J].臨床檢驗雜志,2006,24(2):81-84.

[3]柯慶喜,余紅嵐,譚益.2種方法用于尿液紅細胞和白細胞檢查的比較[J].檢驗醫(yī)學與臨床,2012,9(16):2059-2060.

[4]周淑芬,趙杰.尿液有形成分兩種儀器檢測結果的分析與比較[J].中國醫(yī)學檢驗雜志,2011,12(4):167.

[5]馬駿龍,叢玉隆.菌尿對尿液分析儀測定尿紅細胞的影響[J]．中華醫(yī)學檢驗雜志,1999,22(4):205-206.

[6]楊艷麗,任健康.AVE-763尿沉渣智能分析儀應用性能評價[J].國際檢驗醫(yī)學雜志,2006,28(8):765-766.

Investigation in the clinical significance of combining dry chemical andintelligent microscope methods to detect the RBC and WBC in urine

SULi-li

(Nanxishan Hospital of Guangxi Zhuang Autonomous Region, Guilin 541002, China)

Abstract:Objective：To investigate the clinical significance of combining dry chemical and intelligent microscope methods to detect the RBC and WBC in urine. Methods：These two ways were used to detect the WBC and RBC of midstream urine from 22842 samples in hospital, and the results were compared with each other.Results：The P values of WBC and RBC obtained by the two methods were <0.01, which was considered to be significant. The accordance rate of RBC(3+),(2+),(1+),(-)was 95.1%, 82.2%，49.0%，95.1%, and WBC(3+), (2+),(1+),(-)was 97.9%, 90.2%, 64.2%, 89.4%. The positive rates of RBC and WBC detected by dry chemical method were 19.4% and 16.0%, and the positive rates of RBC and WBC acquired by intelligent microscope were 16.8% and 21.5%.Conclusion： Using the two methods to detect WBC and RBC in urine can improve working efficiency and veracity, because of the advantages of rapidness, simpleness and standardization of these two methods.

Key words:urine dry chemical method; intelligent microscope; white blood cell; red blood cell

(收稿日期2015-11-18)

doi:10.3969/j.issn.1004-7115.2016.03.013

中圖分類號：R446

文獻標識碼：A

文章編號：1004-7115(2016)03-0279-03

*作者簡介：粟理禮(1966-)，男，湖南邵陽人，本科，主管技師，主要從事臨床檢驗工作。