張金乾，張　成，劉自成，施萬(wàn)喜，孟建軍，楊　

(1.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院， 甘肅 蘭州 730070； 2．隴東學(xué)院農(nóng)林科技學(xué)院， 甘肅 慶陽(yáng) 745000)

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隴東旱塬冬小麥資源的HMW-GS組成及品質(zhì)比較

(1.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院， 甘肅 蘭州 730070； 2．隴東學(xué)院農(nóng)林科技學(xué)院， 甘肅 慶陽(yáng) 745000)

摘要：采用SDS-PAGE技術(shù)和近紅外反射光譜法，對(duì)隴東地區(qū)382份冬小麥資源的HMW-GS組成和其中315份品種的沉淀值、蛋白質(zhì)和濕面筋含量進(jìn)行了檢測(cè)。結(jié)果表明:隴東旱塬冬小麥資源存在16種亞基變異類(lèi)型，35種組合形式；null，7+8，2+12為各自位點(diǎn)的主要亞基變異類(lèi)型，其中 1，7+9，5+12亞基在育成和引進(jìn)品種(系)中相對(duì)地方品種有明顯提高，且5+10亞基在育成品種(系)中出現(xiàn)頻率也較高(17.02%)；在地方品種中null、7+8、2+12為優(yōu)勢(shì)組合(占79.19%)，而育成和引進(jìn)品種(系)中亞基主要以null、7+9、2+12(23.40%和17.58%)，null、7+8、2+12(21.28%和16.48%)，1、7+8、2+12(10.60%和15.38%)三類(lèi)組合形式存在；具有2*、7+8、5+12組合的小麥品種綜合品質(zhì)較優(yōu)。從供試材料中篩選出8分以上的組合14類(lèi)，89個(gè)品種，其中4類(lèi)組合的23個(gè)品種得分10分。

關(guān)鍵詞：小麥；高分子量麥谷蛋白亞基；育成品種；品質(zhì)

食品工業(yè)的發(fā)展和人民生活水平的不斷提高，對(duì)小麥的加工品質(zhì)提出了更高要求，小麥品質(zhì)育種也因此受到普遍重視。沉淀值、蛋白質(zhì)和濕面筋含量等主要品質(zhì)衡量指標(biāo)，已在優(yōu)質(zhì)品種篩選中廣泛應(yīng)用，發(fā)揮了巨大作用。高分子量麥谷蛋白是小麥胚乳儲(chǔ)藏蛋白的重要組成部分，籽粒中亞基的種類(lèi)和組成對(duì)小麥品質(zhì)有很大影響。已公認(rèn)Glu-D1位點(diǎn)上的優(yōu)質(zhì)亞基5+10與烘烤品質(zhì)呈正相關(guān)，而2+12亞基與烘烤品質(zhì)呈負(fù)相關(guān)[1-2]。Payne等[3]將各亞基對(duì)小麥品質(zhì)貢獻(xiàn)大小進(jìn)行了評(píng)分，其標(biāo)準(zhǔn)為：4分(5+10)，3分(1、2*、17+18、7+8、13+16)，2分(7+9、2+12、3+12)，1分(7、6+8、4+12、null)。也有國(guó)內(nèi)學(xué)者研究認(rèn)為[4-6]，14+15、5+12亞基也屬優(yōu)質(zhì)亞基，其品質(zhì)評(píng)分為3分和4分。選擇利用具有優(yōu)質(zhì)亞基和優(yōu)良品質(zhì)特性的親本材料，對(duì)小麥品質(zhì)改善、優(yōu)質(zhì)品種的培育有很大幫助。冬小麥?zhǔn)请]東旱塬主栽?xún)?yōu)勢(shì)糧食作物之一，目前生產(chǎn)上應(yīng)用的小麥品種加工品質(zhì)普遍較差，蛋白質(zhì)和濕面筋等品質(zhì)性狀量高而質(zhì)不優(yōu)，無(wú)加工專(zhuān)用型新品種小麥，因此在育種中加強(qiáng)優(yōu)質(zhì)種質(zhì)資源的研究、篩選和利用，提高新培育品種品質(zhì)質(zhì)量就顯得尤為重要,本試驗(yàn)對(duì)隴東旱塬382份冬小麥品種的HMW-GS組成和其中315份品種的蛋白質(zhì)品質(zhì)做了簡(jiǎn)單效應(yīng)比較，以期對(duì)該地區(qū)冬小麥種質(zhì)資源HMW-GS的遺傳基礎(chǔ)及其品質(zhì)信息有所了解，為冬小麥品種的品質(zhì)改良提供參考依據(jù)。

1材料與方法

1.1材料

試驗(yàn)材料由隴東學(xué)院農(nóng)林科技學(xué)院小麥育種組提供，共382份冬小麥品種(系)，其中當(dāng)?shù)赜善贩N(系)94份，引進(jìn)品種91份，農(nóng)家品種197份。所有供試材料于2012—2013年在隴東學(xué)院農(nóng)林科技學(xué)院試驗(yàn)田繁殖，隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)，3行區(qū)，行長(zhǎng)1.5 m，區(qū)距20 cm，3次重復(fù)，人工條播，栽培管理同大田。部分品種活力較差，種子收獲量少，只做HMW-GS分析，對(duì)種子量滿(mǎn)足試驗(yàn)要求的品種同時(shí)檢測(cè)了沉淀值、蛋白質(zhì)和濕面筋含量。

1.2方法

1.2.1HMW-GS的提取及電泳試驗(yàn)在隴東學(xué)院農(nóng)林科技學(xué)院育種實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。參照張學(xué)勇的方法[7]，每份材料取一粒種子粉碎后裝入離心管(1.5 mL)，加入異丙醇混勻，60℃熱水中煮20～30 min，離心并棄上清液，重復(fù)以上步驟1次，除去醇溶蛋白等對(duì)試驗(yàn)結(jié)果的影響。按種子重量10倍體積向離心管中加入麥谷蛋白提取液混勻，60℃熱水中煮2 h，離心取上清液備用。電泳采用不連續(xù)SDS-PAGE法，以濃度為10%的分離膠和4%的濃縮膠進(jìn)行制膠。在電泳槽中加入適量甘氨酸電極緩沖液，依次上樣10 μL，電泳8～10 h。用考馬斯亮藍(lán)染色液(0.05%)染色1～2 d，脫色液中脫色6～8 h，等譜帶基本清晰，在凝膠成像系統(tǒng)中，拍照保存。谷蛋白亞基編碼和命名按Payne1983年的標(biāo)準(zhǔn)[8]進(jìn)行。電泳對(duì)照材料為中國(guó)春(null、7+8、2+12)和中優(yōu)9507(1、7+9、5+10)。

1.2.2品質(zhì)性狀分析供試材料的品質(zhì)性狀采用丹麥福斯公司生產(chǎn)的Infratec TM 1241型近紅外谷物品質(zhì)分析儀(內(nèi)置小麥標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)和校正模型軟件)測(cè)定，包括沉淀值、蛋白質(zhì)和濕面筋含量，結(jié)果由系統(tǒng)軟件自動(dòng)分析。

1.白川麥；2.中國(guó)春；3.白大麥；4.白葛條；5.白金麥；6.白老芒麥；7.白露仁；8.白馬蓮；9.白螞蚱；10.白麥；11.白芒麥；12.白薯?xiàng)l；13.白禿螞蚱；14.白玉麥；15.崇信二紅麥；16.崇信縮條麥；17.崇信紅疙瘩麥；18.中優(yōu)9507；19.崇信白軟稈

1. Baichuanmai; 2. Zhongguochun; 3. Baidamai; 4. Baigetiao; 5. Baijinmai; 6. Bailaomangmai; 7. Bailuren; 8. Baimalian; 9. Baimazha; 10. Baimai; 11. Baimangmai; 12. Baishutiao; 13. Baitumazha; 14. Baiyumai; 15. Chongxinerhongmai; 16. Chongxinsuotiaomai; 17. Chongxinhonggedamai; 18. Zhongyou9507; 19. Chongxinbairuangan

圖1部分地方冬小麥品種的HMW-GS電泳圖譜

Fig.1Electrophoresis result of HMW-GS patterns for partial local winter wheat varieties

2結(jié)果與分析

2.1隴東旱塬冬小麥資源HMW-GS等位變異分析

從表1看出，供試材料共存在16種HMW-GS變異類(lèi)型，Glu-A1位點(diǎn)3種(null，1，2*)，Glu-B1位點(diǎn)7種(7+8，7+9，6+8，7，14+15，17+18，13+16)，Glu-D1位點(diǎn)6種(2+12，5+10，5+12，4+12，2，2+10)，其中地方品種出現(xiàn)15亞基，育成品種(系)出現(xiàn)10種亞基，引進(jìn)品種出現(xiàn)14種亞基。3類(lèi)不同類(lèi)型品種均以null，7+8，2+12為Glu-1各自位點(diǎn)主要變異類(lèi)型，依次占到：null(94.92%、62.77%、57.14%)，7+8(85.79%、56.38% 、51.65%)，2+12(91.37%、61.7%、64.84%)。然而對(duì)于不同位點(diǎn)，亞基等位變異出現(xiàn)頻率有很大差別。其中Glu-A1位點(diǎn)，育成和引進(jìn)品種(系)中亞基null較地方品種分別降低了32.15%和37.78%，而亞基1出現(xiàn)頻率則明顯提高，分別占到27.66%和39.56%，地方品種只占2.03%；Glu-B1位點(diǎn)，亞基7+9在育成和引進(jìn)品種(系)中分別占到43.62%和45.05%，相對(duì)地方品種提高了38.54%和39.97%，而優(yōu)質(zhì)亞基14+15、17+18和13+16只在地方品種和育成品種中存在，且出現(xiàn)頻率偏低，育成品種(系)在此位點(diǎn)的亞基變異類(lèi)型相對(duì)單一；Glu-D1位點(diǎn)，育成和引進(jìn)品種(系)中，亞基5+12高出地方品種13.00%和15.79%，而亞基5+10以育成品種(系)最高，比地方品種和引進(jìn)品種分別提高14.99%和8.23%。5+10亞基出現(xiàn)頻率的提高，說(shuō)明近年來(lái)優(yōu)質(zhì)亞基的利用在育種上受到很大重視。

表1　冬小麥資源HMW-GS變異類(lèi)型及頻率

2.2隴東旱塬冬小麥資源HMW-GS組成及頻率分析

從表2可以看出，供試材料的HMW-GS組合類(lèi)型共有35種，其中引進(jìn)品種出現(xiàn)26種亞基組合類(lèi)型，育成品種(系)20種，地方品種19種。顯然3類(lèi)品種均有極為豐富的亞基組合類(lèi)型，尤其是引進(jìn)品種，但就不同類(lèi)型的品種，優(yōu)勢(shì)組合存在很大差異，出現(xiàn)頻率也各有不同。在地方品種中，null、7+8、2+12組合占到79.19%，具絕對(duì)優(yōu)勢(shì)。而在育成和引進(jìn)品種(系)中，主要存在三種優(yōu)勢(shì)組合類(lèi)型，以null、7+9、2+12出現(xiàn)頻率最高(23.40%和17.58%)，其次是null、7+8、2+12(21.28%和16.48%)和1、7+8、2+12(10.64%和15.38%)，其它亞基組合類(lèi)型頻率較低，分布均勻。供試材料中檢測(cè)出4類(lèi)優(yōu)質(zhì)亞基組合，分別是1、7+8、5+12，1、7+8、5+10，2*、7+8、5+12和2*、7+8、5+10，主要存在于育成和引進(jìn)品種(系)中，但頻率普遍偏低。同時(shí)材料中具有優(yōu)質(zhì)亞基13+16、14+15和17+18的組合存在于地方和引進(jìn)品種中，在育成品種中尚未出現(xiàn)。

2.3隴東旱塬冬小麥資源不同HMW-GS組成的主要品質(zhì)性狀

表3列出了315份材料中22種HMW-GS組成形式的沉淀值、蛋白質(zhì)和濕面筋含量平均值，并對(duì)亞基組合進(jìn)行了評(píng)分。依據(jù)蛋白質(zhì)含量高低，排在前5位的亞基組合依次是：2*、7+8、5+12(10分)，2*、7+9、5+10(9分)，2*、7+9、5+12(9分)，null、7、2+12(4分)，1、7+8、5+12(10分)；依據(jù)濕面筋含量高低，排在前5位的亞基組合依次是：2*、7+8、5+12(10分)，1、7+8、5+12(10分)，2*、7+9、5+10(9分)，2*、7+9、5+12(9分)，1、7+9、5+12(9分)；依據(jù)沉淀值高低，排在前5位的亞基組合依次是：2*、7+8、5+12(10分)，1、7+9、5+10(9分)，1、14+15、2+12(8分)，2*、7+9、5+10(9分)，null、6+8、2+12(4分)。null、7、2+12和null、6+8、2+12組合得分最低，但蛋白質(zhì)含量比較高，而得8分的1、7+8、2+12和null、7+8、5+12亞基組合類(lèi)型沉淀值、蛋白質(zhì)和濕面筋含量都較低，同時(shí)null、7+8、5+10(8分)的蛋白質(zhì)和濕面筋含量也較低。各品質(zhì)性狀均有自己的優(yōu)勢(shì)組合，綜合品質(zhì)以2*、7+8、5+12最好，蛋白質(zhì)含量、濕面筋含量和沉淀值均值分別達(dá)到17.76%、40.54%和44.41 mL。

表2　冬小麥資源HMW-GS亞基組成及頻率

2.4隴東旱塬冬小麥資源品質(zhì)得分8分以上的亞基組合類(lèi)型及品種

國(guó)內(nèi)外多數(shù)研究證明，HMW-GS對(duì)小麥品質(zhì)的遺傳改良具有明顯的正向作用，依據(jù)亞基的優(yōu)劣能在一定程度上推測(cè)小麥的品質(zhì)狀況。由表3也可以看出，得分高的2*、7+8、5+12，1、7+8、5+12，2*、7+9、5+10，2*、7+9、5+12，1、7+9、5+10等亞基組合類(lèi)型沉淀值、蛋白質(zhì)和濕面筋含量均較高，綜合品質(zhì)較好。依據(jù)亞基品質(zhì)得分和本試驗(yàn)結(jié)果，從供試材料中篩選出8分以上的組合14類(lèi)( 89個(gè)品種)，其中10分以上的組合4類(lèi)(23個(gè)品種)，結(jié)果見(jiàn)表4。

表3　冬小麥資源不同HMW-GS組成類(lèi)型的主要品質(zhì)性狀及評(píng)分

注：ND表示未評(píng)。Note: ND meant that the quality score had not been determined.

表4　冬小麥資源品質(zhì)得分8分以上的亞基組合類(lèi)型及品種

3結(jié)論

隴東旱塬冬小麥資源亞基變異類(lèi)型豐富，存在多個(gè)優(yōu)質(zhì)亞基可供育種工作者開(kāi)發(fā)利用。Glu-A1位點(diǎn)1和2*亞基以引進(jìn)品種最高(42.86%)，育成品種(系)次之(37.23%)，地方品種最低(5.08%)；Glu-B1位點(diǎn)13+16,14+15和17+18亞基只存在于地方品種和引進(jìn)品種中，應(yīng)注重這些亞基的利用；Glu-D1位點(diǎn)5+10和5+12亞基在育成和引進(jìn)品種(系)中分別占到35.11%和29.67%，地方品種7.12%。亞基組合類(lèi)型地方品種中null、7+8、2+12占絕對(duì)優(yōu)勢(shì)，育成品種(系)中亞基組合類(lèi)型分布相對(duì)均勻，null、7+9、2+12所占頻率最大(23.40%)。這一結(jié)果與李興茂[9]和李望鴻[10-11]等人研究有所不同，甘肅小麥資源育成品種中null、7+9、2+12組合出現(xiàn)頻率相對(duì)較低(14.30%以下)。null、7+9、2+12組合在隴東冬小麥育成品種(系)中出現(xiàn)頻率高的原因除了所選試驗(yàn)材料的不同外，也可能與引進(jìn)的親本材料有關(guān)，因?yàn)楸驹囼?yàn)中引進(jìn)品種該組合類(lèi)型出現(xiàn)頻率也最高(17.58%)。

針對(duì)國(guó)內(nèi)不同地區(qū)小麥資源HMW-GS與小麥品質(zhì)關(guān)系的研究，多數(shù)學(xué)者認(rèn)為1、2*、7+8、13+16、14+15、17+18、5+10、5+12亞基在各自位點(diǎn)上品質(zhì)效應(yīng)較高，其組合綜合品質(zhì)較優(yōu)[12-17]。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)隴東地區(qū)冬小麥資源以2*、7+8、5+12亞基組合類(lèi)型綜合品質(zhì)最好，null、6+8、5+12組合品質(zhì)最差，基本符合總評(píng)分高的亞基組合品質(zhì)較優(yōu)這一規(guī)律。其中也有一些品質(zhì)得分高的亞基組合null、7+8、5+12，1、7+8、2+12綜合品質(zhì)較差，而null、7、2+12的蛋白質(zhì)含量和null、17+18、2+12的濕面筋含量較高。這種差異的存在可能是由選用的材料、分析方法和各亞基組合間樣本量的不同造成，其次也無(wú)法排除LMW-GS和醇溶蛋白對(duì)小麥品質(zhì)的影響[10,18]，其他原因還有待進(jìn)一步研究。隴東旱塬冬小麥育種中，優(yōu)質(zhì)、抗逆品種的培育，應(yīng)在本地優(yōu)質(zhì)資源充分開(kāi)發(fā)利用的基礎(chǔ)上，注意引入外部?jī)?yōu)良品種血緣來(lái)拓寬本地小麥的遺傳基礎(chǔ)，在導(dǎo)入優(yōu)質(zhì)亞基提高新品種亞基質(zhì)量的同時(shí)，也注重品質(zhì)特性的改善，加快解決隴東冬小麥加工品質(zhì)差的問(wèn)題。并通過(guò)小麥亞基與品質(zhì)間關(guān)系的綜合研究，全面優(yōu)化種質(zhì)資源，提高親本材料選配的科學(xué)性。

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Compositions of HMW-GS and quality properties of winter wheat varieties in Longdong drought area

ZHANG Jin-qian1, ZHANG Cheng2, LIU Zi-cheng2, SHI Wan-xi2, MENG Jian-jun2, YANG Xiao2

(1.AgronomyCollege,GansuAgriculturalUniversity,Lanzhou,Gansu730070,China;2.DepartmentofAgronomyandForestryScience,LongdongUniversity,QingYang,Gansu745000,China)

Abstract：The compositions of high molecular weight glutenin subunits were investigated through SDS-PAGE analyses using 382 winter wheat varieties from Longdong, and sedimentation value, protein and wet gluten contents of 315 cultivars were deciphered with a near infrared analyzer. The results showed that there were 16 types of subunits and 35 subunit compositions in these materials. Among them, the null, 7+8, and 2+12 subunits were the major types for their respective loci. The subunits of 1, 7+9, and 5+12 were increased obviously in bred and introduced varieties from those in local varieties, and the frequency (17.02%) of subunit 5+10 was high in bred varieties. The subunit composition with null, 7+8, and 2+12 was the major type in local varieties. However, in bred and introduced varieties, subunit compositions with null, 7+9 and 2+12 (23.40% and 17.58% respectively), null, 7+8 and 2+12 (21.28% and 16.48% respectively), and 1, 7+8 and 2+12 (10.60% and 15.38% respectively) were the dominant combinations. Varieties with the composition of 2*, 7+8, and 5+12 had relatively superior quality. According to the subunit combinations, qualities of 89 winter wheat varieties scored above 8, and 23 varieties even had a score of 10 in this experiment.

Keywords:Wheat; HMW-GS; Bred varieties; Quality

中圖分類(lèi)號(hào)：S326

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

作者簡(jiǎn)介：張金乾(1988—)，男，甘肅白銀人，在讀碩士，研究方向?yàn)樾←溸z傳育種。E-mail：jinqian126@126.com通信作者：張成(1960—)，男，甘肅鎮(zhèn)原人，教授，主要從事作物遺傳育種教學(xué)和科研工作。E-mail：ldxyzc@126.com

基金項(xiàng)目：高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)多抗小麥新品種示范與推廣(GB2B02011100007)

收稿日期：2015-01-09

doi:10.7606/j.issn.1000-7601.2016.02.24

文章編號(hào)：1000-7601(2016)02-0146-06