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呋喃它酮代謝物時間分辨熒光免疫分析法的建立與應(yīng)用

2016-05-14 07:07鄧麗華戴盡波徐振林楊金易王弘肖治理雷紅濤孫遠明沈玉棟
分析化學(xué) 2016年8期

鄧麗華 戴盡波 徐振林 楊金易 王弘 肖治理 雷紅濤 孫遠明 沈玉棟

摘 要 建立了Eu3+標記的間接競爭時間分辨熒光免疫分析法 (Indirect competitive time-resolved fluoroimmunoassay , ic-TRFIA) 用于魚肉樣品中呋喃它酮代謝物AMOZ的檢測。通過單因素實驗考察了包被抗原濃度、抗體稀釋倍數(shù)、競爭反應(yīng)時間等參數(shù)對方法靈敏度的影響。結(jié)果表明,ic-TRFIA的最佳反應(yīng)條件為:包被抗原濃度為0.25 μg/mL,抗體稀釋5×104倍,最佳競爭時間為50 min。在優(yōu)化的條件下,方法的檢出限(LOD, IC10)為0.01 ng/mL,半抑制濃度(IC50)為0.26 ng/mL,線性范圍(IC20~IC80)為0.025~2.83 ng/mL,對魚樣中AMOZ回收率在78.0%~86.0%之間,各樣品變異系數(shù)均小于15%,與HPLC-MS/MS對比檢測結(jié)果顯示相關(guān)性良好。本方法靈敏度高、特異性好,能夠滿足實際樣品的檢測需求。

關(guān)鍵詞 呋喃它酮代謝物AMOZ;時間分辨熒光免疫分析;銪標二抗

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