王芹 李彬彬

摘 要：為了探索最佳的豬口蹄疫O型疫苗免疫程序和免疫質(zhì)量，更好地防控重大動(dòng)物疫病，我們對(duì)國(guó)家采購(gòu)的豬口蹄疫疫苗進(jìn)行免疫程序和免疫效果的評(píng)估。本實(shí)驗(yàn)采用液相阻斷ELISA（LpB-ELISA）的方法對(duì)豬口蹄疫O型疫苗免疫抗體水平進(jìn)行檢測(cè)。

關(guān)鍵詞：免疫；豬口蹄疫；抗體

中圖分類號(hào)：S828 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A DOI：10.11974/nyyjs.20160431051

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

選自當(dāng)陽(yáng)市王店鎮(zhèn)王店村眾鑫養(yǎng)殖場(chǎng)和當(dāng)陽(yáng)市壩陵辦事處照耀村照耀老灣家庭農(nóng)場(chǎng)的30齡左右的健康仔豬各150頭。

1.1.2 疫苗

豬口蹄疫O型滅活疫苗（O/Mya98/XJ/2010株+

O/GX/09-7株），批號(hào)4136025，Y公司生產(chǎn)。豬口蹄疫O型滅活疫苗（O/Mya98/XJ/2010株+O/GX/09-7株），批號(hào)2014015，X公司生產(chǎn)。

1.1.3 診斷試劑

口蹄疫O型抗體液相阻斷ELISA檢測(cè)試劑盒，批號(hào)：2014092301，蘭州獸醫(yī)研究所生產(chǎn)。

1.2 方法

1.2.1 試驗(yàn)分組

實(shí)驗(yàn)前對(duì)各養(yǎng)殖場(chǎng)豬群采血、分離血清，進(jìn)行口蹄疫O型抗體水平檢測(cè)，篩選出抗體檢測(cè)為陰性的試驗(yàn)用豬各150頭，采取隨機(jī)分為5組（每組30頭）進(jìn)行試驗(yàn)。

A組第1次免疫注射1mL，第2次免疫注射0mL；B組 第1次免疫注射2mL；第2次免疫注射2mL。A、B組1免后28d、58d采集血樣，分離血清。

1.2.2 抗體檢測(cè)

豬口蹄疫O型抗體檢測(cè)：采用液相阻斷ELISA方法，具體操作參照試劑盒說明書進(jìn)行。判定標(biāo)準(zhǔn)：抗體效價(jià)≥26，判定被檢血清口蹄疫免疫抗體合格；反之不合格。

1.2.3 數(shù)據(jù)處理與分析

對(duì)各組的抗體檢測(cè)結(jié)果分類統(tǒng)計(jì)后進(jìn)行方差分析。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.1 免疫副反應(yīng)觀察記錄

從以上數(shù)據(jù)可知：A、B組不同劑量免疫后在28d檢測(cè)所產(chǎn)生的口蹄疫抗體水平均高于58d后的水平（P>0.05）；且B組的在2次檢測(cè)中抗體水平均高于A組（P>0.05）；2次檢測(cè)中2組抗體水平均高于空白E組（P>0.05）。

2.3 第1次免疫注射X公司生產(chǎn)的豬口蹄疫O型滅活疫苗后抗體生成情況

從以上數(shù)據(jù)可知：A、B組不同劑量免疫后在28d檢測(cè)所產(chǎn)生的口蹄疫抗體水平均高于58d后的水平（P<0.05）；且B組的在2次檢測(cè)中抗體水平均高于A組（P>0.05）；2次檢測(cè)中2組抗體水平均高于空白E組（P<0.05），其中2組在28d時(shí)的抗體水平較之E組差異極顯著（P<0.01）。

2.4 第2次免疫注射Y公司生產(chǎn)的豬口蹄疫O型滅活疫苗后抗體生成情況

從以上數(shù)據(jù)可知：組C、D 4種不同劑量免疫后在28d檢測(cè)所產(chǎn)生的口蹄疫抗體水平均高于58d后的水平（P<0.05）；且D組的在2次檢測(cè)中抗體水平均高于C組（P>0.05）；2次檢測(cè)中2組抗體水平均高于空白E組（P<0.01）。

2.5 第2次免疫注射X公司生產(chǎn)的豬口蹄疫O型滅活疫苗后抗體生成情況

從以上數(shù)據(jù)可知：組C、D 4種不同劑量免疫后在28d檢測(cè)所產(chǎn)生的口蹄疫抗體水平均高于58d后的水平（P<0.05）；且D組的在2次檢測(cè)中抗體水平均高于C組，且在免疫后58d檢測(cè)時(shí)差異顯著（P<0.05）；2次檢測(cè)中2組抗體水平均高于空白E組且差異顯著（P<0.01）。

2.6 使用2家公司生產(chǎn)的豬口蹄疫免疫后抗體檢測(cè)情況

本試驗(yàn)共采集豬血清600份進(jìn)行豬口蹄疫抗體檢測(cè)，其中陽(yáng)性合格數(shù)279份。免疫注射X公司生產(chǎn)的豬口蹄疫O型滅活疫苗后陽(yáng)性合格數(shù)為161份，免疫注射Y公司生產(chǎn)的豬口蹄疫O型滅活疫苗后陽(yáng)性合格數(shù)為118份。

3 討論

根據(jù)以上檢測(cè)結(jié)果可以看出，2種疫苗二次強(qiáng)化免疫的效果要優(yōu)于一次免疫程序；按照各企業(yè)生產(chǎn)疫苗說明2倍劑量免疫的效果要優(yōu)于正常劑量；X公司生產(chǎn)的疫苗產(chǎn)生的免疫效果要優(yōu)于Y公司生產(chǎn)的同種疫苗的免疫效果。

經(jīng)分析有以下幾種原因影響免疫效果：免疫劑量。實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)疫苗劑量的加倍能夠顯著提高抗體生成的水平及維持的時(shí)間，能提高豬群對(duì)該病的保護(hù)率，而疫苗接種的劑量過少，造成抗原接種量不足，抗體水平達(dá)不到免疫保護(hù)的要求。同時(shí)，廠家生產(chǎn)疫苗的抗原含量是否足量，也是影響免疫效果的重要因素。因此，掌握合適的免疫劑量，既不造成抗原接種量不足，也不因?yàn)槊庖邉┝窟^大出現(xiàn)免疫麻痹以及應(yīng)激反應(yīng)是需要在生產(chǎn)實(shí)際中進(jìn)行摸索的。免疫程序。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)無(wú)論免疫劑量多少，一次免疫均不能產(chǎn)生穩(wěn)定持久的抗體水平，建立起有效的抗體保護(hù)。