劉啟波 苗 霞 周 兵 李藹文

(廣東省第二中醫(yī)院檢驗(yàn)科,廣東 廣州 510095)

·論著·

腦梗塞檢測(cè)中栓溶二聚體的應(yīng)用價(jià)值及分析

劉啟波*苗 霞 周 兵 李藹文

(廣東省第二中醫(yī)院檢驗(yàn)科,廣東 廣州 510095)

目的:分析腦梗塞患者診療工作中溶栓二聚體(D-dimer,D-D)指標(biāo)測(cè)定方式及臨床意義。方法：選取我院收治的腦血管病患者，其中腦梗塞75例、腦出血30例、腦供血不全12例，及健康對(duì)照組65例，測(cè)定分析患者血漿D-D陽(yáng)性率及D-D半定量檢測(cè)水平。結(jié)果：腦出血患者血漿D-D陽(yáng)性率(56.7%)、腦梗塞血漿D-D陽(yáng)性率(53.3%)、腦供血不全患者血漿D-D陽(yáng)性率(41.7%)均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，而3組腦血管疾病患者組間血漿D-D陽(yáng)性率無(wú)差異(P>0.05)。腦出血患者血漿D-D水平為(1013.5±110.2)μg/L、腦出血組患者血漿D-D水平為(877.4±49.5)μg/L、腦供血不全組患者血漿D-D水平為(701.2±98.5)μg/L，血漿D-D半定量結(jié)果均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，而3組腦血管疾病患者組間血漿D-D半定量結(jié)果無(wú)差異(P>0.05)。結(jié)論：腦梗塞患者血漿D-D陽(yáng)性率及半定量濃度水平均較健康人群偏高，但與其他腦血管疾病患者測(cè)定結(jié)果沒(méi)有明顯差別，臨床上可借助該指標(biāo)開(kāi)展診療工作。

腦梗塞；溶栓二聚體；檢測(cè)；價(jià)值

溶栓二聚體(D-dimer,D-D)產(chǎn)生于纖維蛋白纖溶酶水解過(guò)程，與腦血管病變有一定關(guān)聯(lián)，臨床上常通過(guò)血漿D-D免疫學(xué)測(cè)定分析繼發(fā)性纖溶亢進(jìn)及血栓性病變、高凝狀態(tài)病情，作為診療及預(yù)后控制的指導(dǎo)項(xiàng)目探究和運(yùn)用[1]。本研究為尋求腦梗塞臨床診療可靠依據(jù)，檢測(cè)對(duì)比了不同腦血管病變及健康人群血漿D-D陽(yáng)性率及半定量水平，研究具體情況如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院收治的腦血管病患者，其中腦梗塞75例、腦出血30例、腦供血不全12例，及健康對(duì)照組65例，腦梗塞組男43例，女32例；年齡49～82歲，平均年齡(66.2±2.9)歲。腦出血組男19例，女11例；年齡51～80歲，平均年齡(63.8±3.3)歲；腦供血不全組男8例，女4例；年齡47～83歲，平均年齡(67.0±5.0)歲。健康對(duì)照組男38例，女27例；年齡53～81歲，平均年齡(64.4±3.9)歲。4組受試者基礎(chǔ)資料無(wú)差異，P>0.05。所有患者病情均經(jīng)CT檢測(cè)并證實(shí)，所有受試者均自愿參與本研究，并簽署知情同意書(shū)。

1.2 方法

所有受試者均采集血漿標(biāo)本待檢，采用乳膠顆粒凝集法進(jìn)行標(biāo)本檢測(cè)，乳膠凝集試驗(yàn)過(guò)程中，以0.13 ml/L的檸檬酸鈉1∶9抗凝血漿，若等待3 min發(fā)現(xiàn)凝集顆粒，即為血漿D-D陽(yáng)性；反之則為陰性。測(cè)定為陽(yáng)性的標(biāo)本再以PBS緩沖液以1∶2、1∶4、1∶8……倍比稀釋處理，定性試驗(yàn)再次測(cè)定，凝集最高稀釋度即為標(biāo)本滴度，滴度×250結(jié)果即為半定量水平(μg/L)。

1.3 數(shù)據(jù)處理

本次數(shù)據(jù)采用SPSS 16.0軟件對(duì)本研究的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)的分析，計(jì)數(shù)資料的對(duì)比應(yīng)用卡方檢驗(yàn)，而計(jì)量資料的對(duì)比應(yīng)用t檢驗(yàn)，P<0.05時(shí)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 受試者血漿D-D定性測(cè)定結(jié)果

腦出血患者血漿D-D陽(yáng)性率56.7%、腦梗塞血漿D-D陽(yáng)性率53.3%、腦供血不全患者血漿D-D陽(yáng)性率41.7%，均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，而3組腦血管疾病患者組間血漿D-D陽(yáng)性率無(wú)差異(P>0.05)。見(jiàn)表1。

表1 受試者血漿D-D定性測(cè)定結(jié)果

注：*表示該組陽(yáng)性率相比對(duì)照組，P<0.05。

2.2 受試者血漿D-D半定量測(cè)定結(jié)果

腦出血患者血漿D-D水平為(1013.5±110.2)μg/L、腦出血組患者血漿D-D水平為(877.4±49.5)μg/L、腦供血不全組患者血漿D-D水平為(701.2±98.5)μg/L，血漿D-D半定量結(jié)果均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，而3組腦血管疾病患者組間血漿D-D半定量結(jié)果無(wú)差異(P>0.05)。見(jiàn)表2。

表2 受試者血漿D-D半定量測(cè)定結(jié)果

注：血漿D-D濃度均數(shù)均為幾何均數(shù)；*表示血漿D-D水平相比健康對(duì)照組，P<0.05

3 討 論

3.1 本研究成果及意義

本研究為尋求腦梗塞臨床診療可靠依據(jù)，乳膠顆粒凝集法、定性試驗(yàn)檢測(cè)對(duì)比了不同腦血管病變(腦梗塞75例、腦出血30例、腦供血不全12例)及健康人群65例血漿D-D陽(yáng)性率及半定量水平，檢測(cè)分析數(shù)據(jù)顯示，腦出血患者血漿D-D陽(yáng)性率56.7%、腦梗塞血漿D-D陽(yáng)性率53.3%、腦供血不全患者血漿D-D陽(yáng)性率41.7%，均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，證實(shí)發(fā)生腦血管病變后，人體血漿內(nèi)D-D轉(zhuǎn)換為陽(yáng)性的幾率很高；而3組腦血管疾病患者組間血漿D-D陽(yáng)性率無(wú)差異(P>0.05)，證實(shí)腦梗塞與其他腦血管病變患者血漿D-D陽(yáng)性幾率相近，不可將陽(yáng)性率作為判斷腦血管病變類型的依據(jù)。腦出血患者血漿D-D水平為(1013.5±110.2)μg/L、腦出血組患者血漿D-D水平為(877.4±49.5)μg/L、腦供血不全組患者血漿D-D水平為(701.2±98.5)μg/L，血漿D-D半定量結(jié)果均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，證實(shí)發(fā)生腦血管病變后，人體血漿內(nèi)D-D濃度會(huì)顯著上升；而3組腦血管疾病患者組間血漿D-D半定量結(jié)果無(wú)差異(P>0.05)，證實(shí)腦梗塞與其他腦血管病變患者血漿D-D濃度水平相近，不可將D-D水平作為判斷腦血管病變類型的依據(jù)。

本研究對(duì)抗D-D結(jié)構(gòu)的單克隆抗體進(jìn)行檢測(cè)分析，從根本上克服了傳統(tǒng)測(cè)試過(guò)程中纖維蛋白單體與血漿纖維蛋白原交叉反應(yīng)的弊端，提高了檢測(cè)工作便利性和準(zhǔn)確度，作為交聯(lián)纖維蛋白的特異性分子標(biāo)志物,血漿D-D指標(biāo)異常上升直接反映著機(jī)體繼發(fā)性纖溶活性增強(qiáng)問(wèn)題，為腦梗塞等腦血管疾病診斷和和治療、預(yù)后評(píng)估工作提供了可靠依據(jù)。

3.2 相關(guān)研究對(duì)比分析

正常情況下，人體內(nèi)纖溶及凝血作用相對(duì)平衡，從而維持了血管內(nèi)血流正常狀態(tài)和正常的身體機(jī)能[2]。當(dāng)體內(nèi)纖溶、凝血的平衡被打破，抗凝系統(tǒng)功能活躍，就可能誘發(fā)出血現(xiàn)象，而凝血系統(tǒng)的異常活躍則可能會(huì)引發(fā)血栓形成[3]。當(dāng)體內(nèi)形成血栓，纖溶功能作用下會(huì)強(qiáng)效溶解血栓，這就是繼發(fā)纖溶的概念。

凝血作用當(dāng)中，凝血酶水解纖維蛋白原可產(chǎn)生大量纖維蛋白肽A、B物質(zhì)，其余的部分即為可溶性纖維蛋白單體[4]?？扇苄岳w維蛋白單體形成于α-α鏈、γ-γ鏈，可形成賴氨酸-γ-谷氨酰胺交聯(lián)的高穩(wěn)定性纖維蛋白[5]。交聯(lián)纖維蛋白纖溶酶降解時(shí)可產(chǎn)生大量碎片物質(zhì)，其中包含D-D，D-D水平可靈敏體現(xiàn)纖溶亢進(jìn)情況。

腦梗塞等患者體內(nèi)有明顯血液凝固功能活化表現(xiàn)，同時(shí)又有激發(fā)纖溶亢進(jìn)表現(xiàn)。有國(guó)外學(xué)者表示，腦梗塞患者病情進(jìn)展7d左右，血漿D-D水平達(dá)到峰值，之后又出現(xiàn)緩慢回降現(xiàn)象，發(fā)病后1個(gè)月期間始終高于健康群體[6]；而對(duì)于其他腦血管病變患者，急性缺血性腦中風(fēng)患者病情進(jìn)展7d內(nèi)可見(jiàn)血漿D-D水平略有上升，病情進(jìn)展半個(gè)月左右開(kāi)始有明顯上升現(xiàn)象；動(dòng)脈粥樣硬化患者中風(fēng)后血漿D-D未見(jiàn)明顯偏高，進(jìn)展過(guò)程中緩緩上升。另有學(xué)者提出，75歲以上的中風(fēng)患者血漿D-D水平相比健康群體有顯著差異，年紀(jì)較輕的中風(fēng)患者該項(xiàng)指標(biāo)則相對(duì)沒(méi)有過(guò)于異常的變化[7]。

國(guó)內(nèi)學(xué)者專家檢測(cè)分析腦血管疾病患者血漿D-D水平數(shù)據(jù)顯示，所有患者該指標(biāo)均較健康組偏高，與本研究結(jié)果一致[8]。國(guó)內(nèi)外關(guān)于腦梗塞、腦血栓形成患者血漿D-D水平差異的測(cè)定分析結(jié)果不盡相同，部分研究差異明顯，也有研究顯示兩類患者該指標(biāo)測(cè)定結(jié)果相近，這種分歧主要來(lái)源于患者病變情況的個(gè)體差異，一些患者動(dòng)脈硬化血栓形成、腔隙生理病理特征存在不同，又或者僅有小范圍出現(xiàn)病變，沒(méi)有涉及到纖溶異常。腦出血患者血漿I)D升高,可能與病灶周圍血管痙攣引起小栓塞或伴有高血壓、動(dòng)脈粥樣硬化而體內(nèi)處于高凝狀態(tài)有關(guān)。另外，研究發(fā)現(xiàn)腦血管病變的患者多數(shù)有繼發(fā)性纖維激活和凝血功能亢進(jìn)現(xiàn)象，纖溶活化和凝血功能變強(qiáng)與患者長(zhǎng)時(shí)間血栓前狀態(tài)、血液高凝狀態(tài)以及急性期腦組織受損等因素均有關(guān)聯(lián)[9]。

國(guó)內(nèi)外關(guān)于D-D指標(biāo)檢測(cè)分析的研究眾多，目前使用較多的是免疫學(xué)方法測(cè)定D-D陽(yáng)性率，使用到可與D-D聯(lián)結(jié)鏈發(fā)生特異反應(yīng)的單克隆抗體，特異性良好，有學(xué)者以提純的DD作為抗原,免疫BALB /C小鼠,獲得多株抗DD的單克隆抗體，之后采用ELISA技術(shù)對(duì)D-D水平檢測(cè)分析，靈敏度在10 ng/mL以內(nèi)。另有學(xué)者借助單抗包、latex乳膠顆粒結(jié)合與標(biāo)本中D-D發(fā)生抗原抗體反應(yīng)以觀察凝集效果，靈敏度在25 ng/mL左右，后者靈敏度低于前者，但適用范圍更廣，簡(jiǎn)便可行，急診臨床使用順利。腦梗死患者體內(nèi)存在著血液凝固性增強(qiáng)及纖溶受損傾向,又存在著繼發(fā)性纖溶亢進(jìn)。但因DD時(shí)相變化不同,使其含量變化不一，而且很多臨床工作者通過(guò)大量臨床數(shù)據(jù)分析提出，腦梗死患者在發(fā)病時(shí)DD不一定立即升高,幾天以后才開(kāi)始出現(xiàn)上升現(xiàn)象[10]。若患者存在皮層梗死現(xiàn)象，則血栓形成及凝血亢進(jìn)現(xiàn)象很可能同時(shí)存在，患者通常有明顯的腦組織受損及大面積梗死，同時(shí)有強(qiáng)烈的凝血纖溶反應(yīng)。D-D水平越高，則檢測(cè)神經(jīng)功能缺損的評(píng)分結(jié)果越高，D-D水平也是神經(jīng)功能異常的直觀體現(xiàn)。

直到近些年，臨床公認(rèn)的短暫性腦缺血發(fā)作(TIA)存在著纖溶活性低下,最常見(jiàn)的最主要的病因可能是小動(dòng)脈內(nèi)的微栓塞[11]。國(guó)外學(xué)者發(fā)現(xiàn)陳舊性TIA患者和健康受試者D-D指標(biāo)水平顯著低于急性期與急性后期階段，TIA病變期間會(huì)伴隨纖溶異常、凝血異常，尤其在亞急性期階段十分明顯，體內(nèi)D-D指標(biāo)水平的異常上升直接反映著患者體內(nèi)有強(qiáng)烈的溶解活動(dòng)，伴隨血栓形成。

出血性腦血管病變患者D-D測(cè)定結(jié)果有一定特殊性，此類患者伴隨弱化纖溶活性現(xiàn)象，有很強(qiáng)的血液凝固功能，伴隨長(zhǎng)期高凝狀態(tài)引發(fā)的繼發(fā)性纖溶西酮亢進(jìn)，此類患者血漿D-D檢測(cè)結(jié)果高于正常范圍，通常在出血初期及7 d之內(nèi)沒(méi)有明顯的D-D水平上升表現(xiàn)，甚至與健康人群檢測(cè)結(jié)果相近，病情繼續(xù)進(jìn)展，就會(huì)有明顯的D-D上升趨勢(shì)。

總之，腦梗塞患者血漿D-D陽(yáng)性率及半定量濃度水平均較健康人群偏高，但與其他腦血管疾病患者測(cè)定結(jié)果沒(méi)有明顯差別，臨床上可借助該指標(biāo)開(kāi)展診療工作。

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(本文編輯:鄭 穎)

·醫(yī)學(xué)新聞·

神經(jīng)性綜合癥由基因突變所致

《科技日?qǐng)?bào)》電，由美國(guó)貝勒醫(yī)學(xué)院及來(lái)自其他國(guó)家的科學(xué)家組成的研究小組發(fā)現(xiàn)，較為罕見(jiàn)的神經(jīng)綜合癥是由ATAD3A基因突變所導(dǎo)致，該研究成果發(fā)表在《美國(guó)人類遺傳學(xué)雜志》上。

研究人員發(fā)現(xiàn)，5位沒(méi)有任何血緣關(guān)系的患者具有相同的神經(jīng)學(xué)特征：身體發(fā)育遲緩，肌張力低，視覺(jué)、神經(jīng)系統(tǒng)和心臟存在問(wèn)題。他們對(duì)每一位患者的基因進(jìn)行測(cè)序比較，結(jié)果發(fā)現(xiàn)這些患者都有相同的新的ATAD3A基因變體，而他們的父母并沒(méi)有這些基因，表明這是僅發(fā)生在子女身上的基因突變。

研究人員還發(fā)現(xiàn)，有些患者的突變基因只要有一個(gè)拷貝，就會(huì)引發(fā)疾病，而另外的患者突變基因需要有兩個(gè)拷貝，才會(huì)致疾，具有家族史的病患存在基因拷貝數(shù)變異。

研究小組觀察了患者的成纖維細(xì)胞及其線粒體，并與對(duì)照組比較，發(fā)現(xiàn)ATAD3A變異患者的成纖維細(xì)胞中，線粒體自噬明顯高于對(duì)照組。成纖維細(xì)胞是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來(lái)。線粒體自噬是一種選擇性清除多余或受損線粒體的自噬過(guò)程,在調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)線粒體數(shù)量和維持線粒體正常功能等方面發(fā)揮重要作用,并涉及諸多生理和病理學(xué)過(guò)程，不僅對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)疾病起關(guān)鍵作用，對(duì)其他疾病，如癌癥和代謝疾病也至關(guān)重要。

數(shù)據(jù)表明，ATAD3A突變能夠?qū)е戮€粒體異常表型。科學(xué)家們相信，部分神經(jīng)綜合癥患者是由于ATAD3A基因變異造成的，這一研究有助于研發(fā)該類疾病的診斷工具和治療方法。

Value of D-dimer in evaluation of cerebral infarction

LiuQibo*,MiaoXia,ZhouBing,LiAiwen

(DepartmentofClinicalLaboratory,GuangdongSecondProvincialHospital,Guangzhou510095,Guangdong,China)

*Correspondingauthor:Email：lqb2993@126.com

Objective:To investigate the level and clinical significance of D-dimer (D-D) detected with two methods in patients with cerebral infarction. Methods:75 patients with cerebrovascular diseases treated in our hospital were recruited in this study,comprising 30 patients with cerebral hemorrhage,and 12 patients with cerebral vascular insufficiency. A control group of 65 healthy subjects was set. All groups were determined for positive rate of plasma D-D and underwent semi-quantitative detection of plasma D-D level. Results:The positive rates of plasma D-D were,respectively,56.7%in patients with cerebral hemorrhage,53. 3%in patients with cerebral infarction,and 41.7%in patients with cerebral vascular insufficiency. The positive rate of plasma D-D in these three groups was significantly higher than that in the control group(P<0.05)but was not significantly different among the three groups of patients(P>0.05).The plasma D-D levels were,respectively,(1 013.5±110.2)μg/L in patients with cerebral hemorrhage,(877.4±49.5) μg/L in patients with cerebral infarction,and (701.2±98.5) μg/L in patients with cerebral vascular insufficiency. The plasma D-D levels as detected D-D with semi-quantitative assay were significantly higher in the three patients groups than that in the control group(P<0.05),but did not significantly differ among the three patient groups (P>0. 05). Conclusion:The plasma D-D positive rate and level inpatients with cerebral infarction were higher than those in healthy subjects,but do not differ significantly from those in patients with other cerebrovascular diseases. Clinically,plasma DD can be as an indicator in diagnosis and treatment of the disease.

cerebral infarction; D-dimer; detection; value

10.3969/j.issn.2095-9664.2016.06.004

R743.3

A

2095-9664(2016)06-0012-04

2016-08-21)

*通訊作者：Email：lqb2993@126.com