汪霖

【摘要】動(dòng)物性飼料很容易滋生繁殖細(xì)菌，從而引起飼料的腐敗。在飼料的腐敗過程中，不僅飼料的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值會(huì)降低，腐敗引起的蛋白質(zhì)分解往往會(huì)導(dǎo)致沙門氏菌的增長(zhǎng)。本文將利用常規(guī)分離培養(yǎng)鑒定技術(shù)來檢測(cè)進(jìn)口飼料中沙門氏菌污染情況。

對(duì)飼料廠的飼料279份進(jìn)行沙門氏菌的分離鑒定。共分離出沙門氏菌13株，分離率4.66%。其中配合飼料102份，分離2株，陽(yáng)性率1.96%；濃縮飼料79份，分離5株，陽(yáng)性率6.33%；魚粉33份，分離6株，陽(yáng)性率18.18%；乳清粉65份，分離0株，陽(yáng)性率0%。最后對(duì)24株沙門氏菌進(jìn)行鑒定。

【關(guān)鍵詞】進(jìn)口飼料；沙門氏菌；分離鑒定

沙門氏菌：沙門氏菌屬是一種寄生于人類和動(dòng)物腸道內(nèi)，可以引起禽傷寒、豬霍亂、鼠傷寒沙門氏菌病、豬副傷寒、馬流產(chǎn)沙門氏菌等疾病。它是一種需氧或兼性厭氧菌，適合的生長(zhǎng)溫度是35～37℃，但不耐熱，55℃的溫度下1h即可以被殺死。在外界的生活力很強(qiáng)，在糞便、土壤、食品中可以存活2個(gè)月，更久的能存活2年之久。它對(duì)人的致病原理是這樣的，當(dāng)沙門氏菌進(jìn)入人體后，經(jīng)淋巴系統(tǒng)進(jìn)入血液，就會(huì)造成過性菌血癥。隨后沙門氏菌裂解釋放出大量的毒素，人就會(huì)出現(xiàn)中毒癥狀。同時(shí)會(huì)引起不同的病理癥狀，比如腸熱癥，即傷寒和副傷寒，繼而可發(fā)展成慢性帶菌者；食物中毒，引起腸胃炎，癥狀如下：惡心、嘔吐、腹瀉、肚痛等；還可以引起慢性腸炎、敗血癥等疾病，危害極大。沙門氏菌的傳播途徑很廣，食品在加工、運(yùn)輸、出售、烹飪、儲(chǔ)存過程中被其感染的可能性很大。尤其是動(dòng)物飼料中沙門氏菌的感染情況對(duì)全球的肉類加工廠都是很大的隱患。如何減少病菌的感染，成為重中之重。

研究方法：沙門氏菌的檢測(cè)方法有很多，有傳統(tǒng)的檢測(cè)法、以抗體為基礎(chǔ)的檢測(cè)法、以核酸為基礎(chǔ)的方法。每個(gè)方法各有各的特點(diǎn)，本文主要以傳統(tǒng)的檢測(cè)法來分離鑒定飼料中的沙門氏菌。

1、實(shí)驗(yàn)材料

1.1樣品。配合飼料102份，濃縮飼料，79份魚粉33份，乳清粉65份，每份樣品均100g；1.2培養(yǎng)基。緩沖蛋白胨水前增菌培養(yǎng)基，氯化鎂孔雀綠，亞西酸鹽胱氨酸增菌液，瓊脂，酚紅煌綠瓊脂。1.3生化試機(jī)。三糖鐵培養(yǎng)基，微量管，賴氨酸脫羧酶微量管，尿素微量管，V-P和靛基質(zhì)

2、實(shí)驗(yàn)方法

2、1前增菌 無菌稱取25g進(jìn)口飼料樣品放入盛有225mL緩沖蛋白陳水的無菌試劑瓶中，攪拌均勻。在36攝氏度的環(huán)境下培養(yǎng)18小時(shí)。使那些“致傷”的細(xì)菌復(fù)蘇及使所有微生物生長(zhǎng)。2、2增菌 取前增菌液體0.1ml轉(zhuǎn)種在15ml氯化鎂孔雀綠肉湯內(nèi)，在42攝氏度的環(huán)境下培養(yǎng)24小時(shí)。再取15ml轉(zhuǎn)種在150ml亞酸鹽胱氨酸增菌液中，36攝氏度培養(yǎng)24小時(shí)。2、3分離 用接種環(huán)取增菌液1環(huán)，分別劃線接種在酚紅煌綠瓊平板、膽硫乳瓊脂平板和科瑪嘉顯色培養(yǎng)基平板上。36攝氏度下培養(yǎng)24小時(shí)。然后對(duì)平板上肉眼可見的特征性菌落進(jìn)行確認(rèn)，并對(duì)該菌落分離物進(jìn)行一系列生化和血清學(xué)檢測(cè)，再觀察各個(gè)平板上的菌落生長(zhǎng)情況，做出鑒定。2、4生化試驗(yàn) 將純化后的培養(yǎng)物穿刺接種在三糖鐵培養(yǎng)基斜面上。典型的沙門氏菌培養(yǎng)物，斜面呈現(xiàn)紅色，底部是黃色。當(dāng)分離到乳糖陽(yáng)性沙門氏菌，呈現(xiàn)黃色。并將培養(yǎng)物接種在L-賴氨酸脫羧、ONP、尿素微量鑒定管及V-P、靛基質(zhì)培養(yǎng)基中，2、5血清學(xué)試驗(yàn) 取載玻片一片，在酒精燈上燒干冷卻后，在玻璃片上滴一滴沙門氏菌血清，再用接種環(huán)挑取單個(gè)菌落，與血清研磨成懸液。最后得出如下結(jié)果，如表1：

沙門氏菌試驗(yàn)鑒定標(biāo)準(zhǔn)

2、6血清學(xué)鑒定

A-F多價(jià)血清菌體實(shí)驗(yàn)結(jié)果分類如下：陰性反應(yīng)：混合物試驗(yàn)不凝集，在鹽水對(duì)照中也不凝集。

結(jié)果與分析：共分離出沙門氏菌13株，分離率4.66%。其中配合飼料102份，分離2株，陽(yáng)性率1.96%；濃縮飼料79份，分離5株，陽(yáng)性率6.33%；魚粉33份，分離6株，陽(yáng)性率18.18%；乳清粉65份，分離0株，陽(yáng)性率0%。如表2

進(jìn)口飼料中沙門氏菌檢測(cè)結(jié)果

根據(jù)以上檢測(cè)見過來判斷，動(dòng)物性飼料很容易受沙門氏菌的污染。其中尤其以魚粉受污染的情況最嚴(yán)重，濃縮飼料其次。分析原因是因?yàn)轸~粉中富含鈣、磷等礦物質(zhì)，而這些物質(zhì)恰好也是沙門氏菌的賴以生存的食物來源。而國(guó)家明確規(guī)定飼料中不得檢出沙門氏菌，而因沙門氏菌感染飼料導(dǎo)致禽畜大量死亡的事件已經(jīng)報(bào)道很多，給畜牧業(yè)及國(guó)家經(jīng)濟(jì)帶來了巨大的損失，因此要嚴(yán)格把控飼料的安全性。

結(jié)論

隨著對(duì)外貿(mào)易的不斷發(fā)展，動(dòng)物性飼料的進(jìn)口數(shù)量日益增加，出入境檢疫部門嚴(yán)格把關(guān)，加強(qiáng)進(jìn)口動(dòng)物飼料的沙門氏菌監(jiān)測(cè)，對(duì)防治國(guó)外沙門氏菌感染的傳入，保護(hù)國(guó)內(nèi)的人畜健康有著十分重要的意義。相關(guān)政府部門也應(yīng)嚴(yán)格立法、執(zhí)法，保證良好的飼料生產(chǎn)環(huán)境、運(yùn)輸環(huán)境。凡是發(fā)現(xiàn)不合規(guī)的飼料加工廠，應(yīng)立即采取相應(yīng)的措施，第一要禁止被污染的飼料被不法分子以低價(jià)在市場(chǎng)上流通；第二要強(qiáng)制企業(yè)工廠改造生產(chǎn)環(huán)境；第三要立法重罰不良企業(yè)。而相關(guān)企業(yè)要以持續(xù)發(fā)展為戰(zhàn)略，不能貪圖一時(shí)利益，保證飼料的安全。而購(gòu)買飼料的群眾，要掌握現(xiàn)代知識(shí)，學(xué)會(huì)鑒別好的飼料，要勇敢的對(duì)不良企業(yè)說不。而對(duì)于肉類的直接消費(fèi)者，更要明白沙門氏菌的危害性。要正確處理以動(dòng)物為源頭的食物。第一要徹底煮熟肉類視頻，第二生和熟的食物要分開處理，第三要保持廚房的干凈整潔。

參考文獻(xiàn)

[1]張艷紅，吳延功，杜元釗，等.沙門氏菌快速檢測(cè)方法研究進(jìn)展[J].動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2001，22（2）：39-41