袁巍 高洪波
·摘要:試驗通過生物化學(xué)方法測定了四個河北省主栽山藥品種(白玉山藥、白嘴山藥、鐵棍山藥、棒藥)的干物質(zhì)含量及蛋白質(zhì)、淀粉、可溶性糖含量。試驗結(jié)果表明四種山藥的品質(zhì)存在較大差異,具體表現(xiàn)為:①干物質(zhì)含量:鐵棍山藥(30.23%)>白嘴山藥(24.66%)>白玉山藥(24.54%)>棒藥(16.29%);②蛋白質(zhì)含量:鐵棍山藥(16.8587%)>白嘴山藥(15.0990%)>白玉山藥(12.7190%)>棒藥(5.0000%);③淀粉含量:白玉山藥(10.2374%)>鐵棍山藥(8.2319%)>白嘴山藥(5.8475%)>棒藥(5.2895%);④可溶性糖含量:白嘴山藥(4.3189%)>白玉山藥(2.7952%)>鐵棍山藥(1.0661%)>棒藥(0.3637%)。因此,白嘴山藥適宜糖尿病人食用,鐵棍山藥適宜孕婦及生長發(fā)育期的青少年食用,白玉山藥適宜長期從事體力勞動的人盡量食用。目的:通過試驗測定4個河北省主栽山藥品種的干物質(zhì)含量、蛋白質(zhì)含量、淀粉含量和可溶性糖含量,了解4個品種山藥的品質(zhì)性狀,為不同消費人群適宜食用的山藥品種提供理論依據(jù)和參考。
關(guān)鍵詞:山藥;干物質(zhì)含量;可溶性糖;淀粉;蛋白質(zhì)
山藥(Dioscorea batatas Decne.chinese yam),是薯蕷科薯蕷屬一年生或多年生纏繞性藤本植物,能形成肥大的地下莖,其肉質(zhì)細膩,風(fēng)味鮮美,供人們食用或藥用[1]。山藥作為一種國際性藥、食兼用作物,具有產(chǎn)量高、適應(yīng)性強、耐儲藏、便于運輸和加工等優(yōu)點,在我國大部分地區(qū)都有栽培,現(xiàn)已成為我國重要的出口特產(chǎn)蔬菜之一[2]。
河北省作為山藥主產(chǎn)區(qū)之一,近年來山藥種植面積逐年增加,尤其是在保定市的蠡縣、高陽縣、清苑縣,滄州市的肅寧縣、河間市、獻縣,以及邢臺市和邯鄲市的部分地區(qū)發(fā)展較快。河北省種植的山藥品種主要有白玉山藥(也稱日本大和白)、白嘴山藥(也稱小白嘴)、鐵棍山藥(從河南省引進品種)、棒藥(也稱麻山藥)等4個品種,另外還有小面積的紫山藥種植。
山藥塊莖營養(yǎng)豐富,除含有多種碳水化合物外,還含有蛋白質(zhì)、脂肪、維生素及微量元素等營養(yǎng)成分,從成分含量上看,水約70%-80%,淀粉約16%,可溶性糖約為2.5%,蛋白質(zhì)約1.5%[3]。近年來,對山藥的綜合利用與保健品開發(fā)方面有了很大的發(fā)展。 研究表明,山藥有增強和調(diào)節(jié)免疫功能、抗氧化作用以及降血糖作用。山藥中所含的保健成分,在人體的骨骼潤滑、玻璃體生長、精液補充、改善神經(jīng)元上起著很重要的作用[4]。
蛋白質(zhì)是構(gòu)成人體組織器官的支架和主要物質(zhì),是人體生命活動的主要承擔(dān)者[5]。人體中合成蛋白質(zhì)的原料主要是食物中蛋白質(zhì)分解所得的氨基酸[6],因此,食物中的蛋白質(zhì)含量影響人體新陳代謝及其他生命活動,尤其是處于生長發(fā)育期的青少年和孕產(chǎn)婦;淀粉等糖類物質(zhì)是人體的主要供能物質(zhì)[7],所以長期從事體力勞動的人需要大量的淀粉等糖類物質(zhì);可溶性糖是山藥的主要活性成分,主要由甘露糖、木糖、阿拉伯糖、葡萄糖和半乳糖組成[8],已成為近年來山藥研究的熱點,許多研究[9]證實,可溶性糖具有增強免疫力,延緩衰老,抗腫瘤,降低血糖等多種藥理作用,因此多食用富含可溶性糖的山藥有利于腫瘤病人、糖尿病人的健康。
但我檢索的現(xiàn)有資料中,只有不分品種籠統(tǒng)的山藥成分含量介紹,不能幫助廣大人民群眾根據(jù)自己身體狀況選食適合自己的山藥品種。因此,我將在這個試驗中,通過對4種河北主栽山藥的品質(zhì)性狀的測定,為不同身體素質(zhì)的人群提出科學(xué)合理的山藥品種建議,以幫助大家有針對性的選擇,提高進食和營養(yǎng)效果。
四種山藥圖片及說明見下表
山藥品種圖片說明白玉山藥白玉山藥也叫日本大和白,是從日本引進的高產(chǎn)山藥品種,山藥莖為圓形,呈紫色,有時帶綠色條紋,有粘液質(zhì),口感微甜。白嘴山藥皮薄,表面有細毛,黃色;肉質(zhì)細白,含有粘液質(zhì)、皂甙、膽堿、尿素、精氨酸、淀粉酶、蛋白質(zhì)、脂肪、淀粉。鐵棍山藥粘度大,色白,水分少,毛須略多,并可見特有的暗紅色“銹斑”,粉性足,質(zhì)膩,折斷后橫截面呈白色或略顯牙黃色,體質(zhì)十分堅重,入水久煮不散。棒藥粘度小,肉質(zhì)白色,表皮色較深,塊莖上半部分與下半部分口感有差異一、測試內(nèi)容
1.干物質(zhì)含量的測定
1.1干物質(zhì)含量測定的原理
在加熱時,植物組織中的自由水變成水蒸氣逸出,當(dāng)組織的質(zhì)量不再發(fā)生變化時說明組織內(nèi)不再含有自由水,即剩余物質(zhì)為干物質(zhì),通過稱量組織烘干前后的質(zhì)量就可以計算出植物組織的干物質(zhì)含量。
實驗計算式:
干物質(zhì)含量(%)=干物質(zhì)質(zhì)量鮮重×100
1.2實驗樣品、儀器及試劑
1.2.1實驗樣品:
白玉山藥、白嘴山藥、鐵棍山藥、棒藥各取200g(預(yù)先洗凈擦干)
1.2.2實驗儀器
信封、精密天平、稱量紙、烘干箱
1.3實驗步驟
1.3.1實驗樣品的測定
1.3.1.1快速將樣品切成薄片,稱重,記錄。裝入信封,并標(biāo)明品種與編號。
1.3.1.2將信封放入100—105℃烘箱中烘干至恒重。
1.3.1.3取出信封,稱重,記錄數(shù)據(jù)。山藥烘干前后質(zhì)量變化及干物質(zhì)率見下表
白玉山藥鮮重
(克)干重
(克)干物質(zhì)
率%白嘴山藥鮮重
(克)干重
(克)干物質(zhì)
率%鐵棍山藥鮮重
(克)干重
(克)干物質(zhì)
率%棒藥鮮重
(克)干重
(克)干物質(zhì)
率%第一次測定35.688.2123.0131.637.6124.0629.238.8730.3430.945.0316.26第二次測定34.618.6324.9333.298.2024.6328.358.9131.2636.875.9716.19第三測定35.569.1325.6732.228.1525.2923.966.9729.0932.315.3116.43平均值————24.54————24.66————30.23————16.292.蛋白質(zhì)含量的測定
2.1蛋白質(zhì)含量測定的原理
考馬斯亮藍G-250測定蛋白質(zhì)含量屬于染料結(jié)合法的一種。該染料在游離狀態(tài)下呈紅色,當(dāng)它與蛋白質(zhì)結(jié)合后變?yōu)榍嗌?,前者吸收峰?65 nm,后者的吸收峰在595 nm。在一定蛋白質(zhì)范圍內(nèi)(0-1000 ug/ml),蛋白質(zhì)色素結(jié)合物在595 nm波長下的消光值與蛋白質(zhì)含量成正比,故可用于蛋白質(zhì)的定量檢測。蛋白質(zhì)與考馬斯亮藍G-250結(jié)合反應(yīng)十分迅速,2 min左右即達到平衡,其結(jié)合物在室溫下1h內(nèi)保持穩(wěn)定。該反應(yīng)非常靈敏,可用于測量微克級蛋白質(zhì)含量,易于操作,干擾物質(zhì)少,是一種比較好的蛋白質(zhì)定量法。
蛋白質(zhì)含量=C×VW×1000
C:從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得的蛋白質(zhì)濃度(ug/ml)
V:提取液總體積(ml)
W:樣品質(zhì)量(g)
2.2實驗材料、儀器及試劑
2.2.1實驗材料
白玉山藥、白嘴山藥、鐵棍山藥、棒藥各取100g(洗凈并搗爛)
2.2.2實驗儀器
分光光度計、離心機、藥物天平、容量瓶、移液管、試管等。
2.2.3實驗藥品
100ug/ml標(biāo)準(zhǔn)牛血清白蛋白溶液、考馬斯亮藍G—250試劑、90%乙醇、85%磷酸等。
2.3實驗步驟
2.3.1標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作
2.3.1.1取六只試管,按下表添加試劑。
2.3.1.2搖勻,靜置2min。
2.3.1.3在595nm波長下比色,記錄消光值。
2.3.1.4以消光值為縱坐標(biāo),牛血清白蛋白濃度為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
試管編號123456標(biāo)準(zhǔn)牛血清白蛋白(ml)00.20.40.60.81.0蒸餾水(ml)1.00.80.60.40.20蛋白質(zhì)濃度(ug/ml)020406080100考馬斯亮藍G—250(ml)5555552.3.2樣品的處理
2.3.2.1稱取新鮮樣品1.0—2.0g放入研缽中,加2ml蒸餾水研成勻漿。
2.3.2.2將勻漿配制為10ml標(biāo)準(zhǔn)液。
2.3.2.3靜置30min,其間搖動幾次。
2.3.2.4離心處理,取上清液500ul,加入試管,標(biāo)號。
2.3.3測定
2.3.3.1加入5ml考馬斯亮藍G—250試劑,搖勻。
2.3.3.2靜置2min,在595nm處比色,記錄三次OD值,數(shù)據(jù)如下表。
白玉山藥白嘴山藥鐵棍山藥棒藥第一次測定OD值0.6971.4341.7200.484第二次測定OD值1.2651.0081.6020.426第三次測定OD值1.2831.3091.6000.488平均值1.2741.3721.6410.466白玉山藥:取1.265與1.283的平均值為1.274;白嘴山藥:取1.434與1.309的平均值為1.372;鐵棍山藥:取三個測量值的平均值為1.641;棒藥:取三個測量值的平均值為0.466。
2.3.3.3根據(jù)消光值并在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出蛋白質(zhì)的濃度,將實驗測的數(shù)據(jù)代入上述計算公式,計算出蛋白質(zhì)的含量,結(jié)果如下。
山藥品種白玉山藥白嘴山藥鐵棍山藥棒藥蛋白質(zhì)含量(%)12.719015.099016.85875.00003.淀粉含量的檢測
3.1淀粉含量檢測的實驗原理
多糖是由幾百個或更多葡萄糖殘基組成的多糖,在酸性條件下加熱使其水解成葡萄糖,然后在濃硫酸作用下生成糠醛及其衍生物,該衍生物與蒽酮發(fā)生反應(yīng),反應(yīng)后溶液呈藍綠色,于620nm處有最大吸收,所以可以用此方法測定多糖含量。
A=100×C×V1×0.9V7×1000×W
A:淀粉含量(%)
C:從標(biāo)準(zhǔn)曲線查得的葡萄糖含量(ug/ml)
V1:顯色時取的樣品液總體積(ml)
V7:樣品提取液總體積(ml)
W:樣品質(zhì)量(g)
0.9:葡萄糖與淀粉的換算系數(shù)
3.2實驗樣品、儀器及試劑
3.2.1實驗樣品:
白玉山藥、白嘴山藥、鐵棍山藥、棒藥各取50g(預(yù)先洗凈并研碎)
3.2.2實驗儀器:
試管、水浴鍋、離心機、研缽、移液管、分光光度計等。
實驗試劑:0.2g/L蒽酮濃硫酸溶液、0.1g/L考馬斯亮藍G—250試劑、9.2 mol/L高氯酸溶液、90%乙醇溶液、85%乙醇溶液等。
3.3實驗步驟
3.3.1標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作
3.3.1.1準(zhǔn)確稱取0.1g葡萄糖(分析純),溶解并用蒸餾水定容至100ml。
3.3.1.2分別取出1ml,2ml,3ml,4ml,5ml分別加入到50ml的容量瓶中,并用蒸餾水定容到50ml,配制成濃度分別20ug/L,40ug/L,60ug/L,80ug/L,100ug/L的葡萄糖溶液。
3.3.1.3各取1ml試液倒入試管中,標(biāo)號。
3.3.1.4加入3ml蒽酮試劑,迅速放入冰水中冷卻。
3.3.1.5將幾只試管一起放入100℃恒溫水浴鍋中,為防止水分蒸發(fā),在試管口加一個玻璃球。
3.3.1.6準(zhǔn)確保溫100℃加熱10min后取出。
3.3.1.7流水冷卻,再在室溫下平衡約10min,放于波長620nm處測消光值。
3.3.2實驗樣品的處理
3.3.2.1取新鮮樣品,放入10ml離心管,加入6-7ml乙醇。
3.3.2.2將離心管放入恒溫80℃的水浴鍋中加熱30min。
3.3.2.3將離心管放入離心機離心處理5min。
3.3.2.4將離心管放入恒溫85℃的水浴鍋內(nèi)加熱至乙醇剩余2-3ml。
3.3.2.5加水3ml,攪拌均勻。
3.3.2.6水浴加熱15min,使樣品糊化.
3.3.2.7冷卻試劑,加入2ml4.6mol/L高氯酸溶液,攪拌均勻。
3.3.2.8靜置15min,加水至10ml,搖勻。
3.3.2.9離心10min,將上清液倒入50ml容量瓶內(nèi)。
3.3.2.10向沉淀中加入2ml4.6mol/L高氯酸,攪拌均勻。
3.3.2.11靜置15min,加水至10ml,混勻。
3.3.2.12離心處理10min,將上清液加入容量瓶中。
3.3.2.13水洗沉淀1-2次。
3.3.2.14離心處理10min,將上清液加入容量瓶中。
3.3.2.15定容。
3.3.3測定
3.3.3.1取提取液600ul,加入試管中,加入5ml蒽酮溶液。
3.3.3.2恒溫85℃水浴加熱10min。
3.3.3.3在620nm處比色,記錄數(shù)值如下表。
白玉山藥白嘴山藥鐵棍山藥棒藥第一次測定2.0580.8291.6371.648第二次測定2.1051.9241.6591.734第三次測定1.8761.6401.8690.841平均值2.0821.7821.7221.691白玉山藥取2.058與2.105的平均值為2.082;白嘴山藥取1.924與1.640的平均值為1.782;鐵棍山藥取三個測量值的平均值為1.722;棒藥取1.648與1.734的平均值為1.691。
3.3.3.4在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出葡萄糖的濃度。
3.3.3.5根據(jù)葡萄糖濃度計算出淀粉含量,結(jié)果如下:
山藥品種白玉山藥白嘴山藥鐵棍山藥棒藥淀粉含量(%)10.23745.84758.23195.28954.可溶性糖含量的測定
4.1可溶性糖含量的測定實驗原理
糖在濃硫酸作用下,可經(jīng)脫水反應(yīng)生成糠醛或羥甲基糠醛,生成的糠醛或羥甲基與蒽酮脫水縮合,形成糠醛的衍生物,呈藍綠色,其吸收峰為620nm。在一定范圍內(nèi),顏色的深淺與糖的含量成正比,故可用于糖的定量測定。
實驗方程式:
該方法的特點是幾乎可以測定所有的碳水化合物,不但可以測定戊糖與己糖,而且可以測所有寡糖類和多糖類,其中包括淀粉、纖維素等(因為反應(yīng)液中的濃硫酸可以把多糖水解成單糖而發(fā)生反應(yīng)),所以蒽酮法測出的碳水化合物含量,實際上是溶液中全部可溶性碳水化合物總量。在沒有必要細致劃分各種碳水化合物的情況下,用蒽酮法可以一次性測出總量,省去很多麻煩,因此有特殊的應(yīng)用價值。但在測定水溶性碳水化合物時,則應(yīng)注意避免將樣品中的未溶解殘渣加入反應(yīng)液中,不然會因為細胞壁中的纖維素、半纖維素等與蒽酮試劑的顯色深度不同果糖顯色最深,葡萄糖次之,半乳糖、甘露糖較淺,五碳糖顯色更淺,故測定糖的混合物時,常因不同糖類的比例不同造成誤差,但測定單一糖類時則可避免這種誤差。這一方法靈敏度很高,糖含量在30ug左右就能測定,所以可用于微量測糖,在樣品少的情況下,采用這種方法比較合適。
4.2實驗材料、儀器與試劑
4.2.1實驗材料
白玉山藥、白嘴山藥、鐵棍山藥、棒藥各取50g,預(yù)先洗凈并研碎。
4.2.2實驗儀器
分光光度計、精密天平、水浴鍋、離心機、具塞刻度試管、容量瓶、移液管、組織攪拌機等。
4.2.3實驗試劑
50ug/ml標(biāo)準(zhǔn)蔗糖溶液1000ml、0.2g/L蒽酮濃硫酸溶液。
4.3實驗步驟
4.3.1標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作
4.3.1.1取六只大試管,按下表數(shù)據(jù)添加試劑。
4.3.1.2搖勻,反應(yīng)10min,在620nm波長下比色。
4.3.1.3以標(biāo)準(zhǔn)蔗糖濃度為橫坐標(biāo),以消光值為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
試管編號123456標(biāo)準(zhǔn)蔗糖溶液(ml)00.40.81.21.62.0蒸餾水(ml)2.01.61.20.80.40蔗糖濃度(ug/ml)01020304050蒽酮試劑(ml)4444444.3.2樣品處理
4.3.2.1稱取新鮮樣品0.5-1.0g研磨為勻漿,三次重復(fù)。
4.3.2.2定容至10ml,室溫下浸提30-60min,期間經(jīng)常搖動。
4.3.2.3離心處理,棄去殘渣,適當(dāng)稀釋。
4.3.2.4標(biāo)號,封存。
4.3.3測定
4.3.3.1吸取300ul提取液于大試管中,加入4ml蒽酮試劑。
4.3.3.2搖勻,靜置10min。
4.3.3.3在620nm處比色,記錄OD值如下表。
白玉山藥白嘴山藥鐵棍山藥棒藥第一次測定0.7350.1910.6230.226第二次測定1.3881.7320.5340.147第三次測定1.1051.9640.3040.203平均值1.2471.08480.5770.215白玉山藥取1.388與1.105的平均值為1.247;白嘴山藥取1.732與1.964的平均值為1.848;鐵棍山藥取0.623與0534的平均值為0.577;棒藥取0.226與0.203的平均值為0215。
4.4可溶性糖含量計算
可溶性糖含量(%)=C×VW×1000×100
C:從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得的蔗糖濃度(ug/ml)
V:樣品總體積(ml)
W:樣品質(zhì)量(mg)
4.3.3.4在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出蔗糖濃度,將實驗測的數(shù)據(jù)代入上述計算公式,計算出可溶性糖的含量,結(jié)果如下。
山藥品種白玉山藥白嘴山藥鐵棍山藥棒藥可溶性糖含量(%)2.79524.31891.06610.3637二、實驗結(jié)果
匯總以上四個實驗結(jié)果,繪制柱形圖如下:
山藥品種白玉山藥白嘴山藥鐵棍山藥棒藥干物質(zhì)含量(%)24.54%24.66%30.23%16.29%蛋白質(zhì)含量(%)12.719015.099016.85875.000淀粉含量(%)10.23745.84758.23195.2895可溶性糖含量(%)2.79524.31891.06610.3637通過以上對比可以看出,不同山藥品種的品質(zhì)存在較大差異,其中:①干物質(zhì)含量:鐵棍山藥(30.23%)>白嘴山藥(2466%)>白玉山藥(24.54%)>棒藥(16.29%)。②蛋白質(zhì)含量:鐵棍山藥(16.8587%)>白嘴山藥(15.0990%)>白玉山藥(12.7190%)>棒藥(5.0000%);③淀粉含量:白玉山藥(102374%)>鐵棍山藥(8.2319%)>白嘴山藥(5.8475%)>棒藥(5.2895%);④可溶性糖含量:白嘴山藥(4.3189%)>白玉山藥(2.7952%)>鐵棍山藥(1.0661%)>棒藥(0.3637%);
根據(jù)不同人群的營養(yǎng)需求,建議白嘴山藥適宜糖尿病人食用,鐵棍山藥適宜孕婦及生長發(fā)育期的青少年食用,白玉山藥適宜長期從事體力勞動的人盡量食用。
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