陳永敢1) 屈 直2) 陳川平 李珍 范平杰 馬紅梅 姜芳燕

摘 要 靈芝是一類(lèi)木腐真菌，具有重要的藥理價(jià)值，靈芝栽培方法研究能為實(shí)際應(yīng)用提供技術(shù)支撐。本研究選擇一株分離自海南五指山的靈芝進(jìn)行室內(nèi)栽培方法研究，并分析其出芝和菌蓋形成的動(dòng)態(tài)變化規(guī)律以及子實(shí)體的形態(tài)特征。結(jié)果表明，靈芝出芝動(dòng)態(tài)具有顯著的規(guī)律性，隨著時(shí)間的進(jìn)行，出芝逐漸減少；而菌蓋形成沒(méi)有明顯的時(shí)間規(guī)律。此外，室內(nèi)栽培靈芝出芝率及菌蓋形成率較高，但子實(shí)體大小相對(duì)大田栽培靈芝小，反映了可通過(guò)增加栽培原料的營(yíng)養(yǎng)成分提高靈芝子實(shí)體大小，為進(jìn)一步推廣應(yīng)用室內(nèi)栽培方法提供參考。

關(guān)鍵詞 海南 ；Ganoderma sp. ；靈芝室內(nèi) ；栽培

分類(lèi)號(hào) S567.3+1 Doi：10.12008/j.issn.1009-2196.2016.02.005

Indoor Cultivation Technique of Ganoderma sp. Grown in Hainan

CHEN Yonggan1） QU Zhi2） CHEN Chuanping1）

LI Zhen1） FAN Pingjie1） MA Hongmei1） JIANG Fangyan1）

（1 College of Tropical Biology and Agronomy， Tropical Ocean College of Hainan，

Sanya， Hainan 572022， China；

2 Institute of Tropical Bioscience and Biotechnology， CATAS， Haikou， Hainan 571101）

Abstract Ganoderma spp. is a kind of wood rotting fungi， which has important pharmacological value. The research on the cultivation method of Ganoderma spp. can provide the raw materials for the practical application. In this study， Wzh1 was chosen for indoor cultivation， and analyze the law of fruitbody and pilei producing， and evaluated the fruitbody morphology. The results showed that fruitbody producing decrease gradually along with the time. Additionally， comparing with the Ganoderma spp. cultivated in the field， the formation rate of fruitbody and pilei increased significantly， but the fruitbody was smaller. It reflected that it can add nutrients in the cultivation of raw materials to increase the size of the fruitibody， and further extending the indoor cultivation methods.

Keywords Hainan ； Ganoderma ； indoor ； cultivation

靈芝為腐生菌，常在闊葉樹(shù)的倒木、枯木和樹(shù)樁上生長(zhǎng)。人工栽培條件下，需要碳源、氮源、礦物質(zhì)等作為培養(yǎng)基原料[1]。由于培養(yǎng)基中含有木質(zhì)素、纖維素、淀粉等碳水化合物及蛋白質(zhì)等氮源物質(zhì)，這些物質(zhì)分子量較大，靈芝菌絲不易吸收，造成了靈芝生長(zhǎng)緩慢及不易栽培成功[2]。

近40年來(lái)靈芝栽培技術(shù)得到廣泛發(fā)展，其基本的方法是使靈芝菌絲體在室內(nèi)發(fā)育到生理成熟階段，然后將其移栽到室外，促進(jìn)生長(zhǎng)，最終產(chǎn)出質(zhì)量較佳的子實(shí)體，這種技術(shù)有塑料袋、玻璃瓶及椴木露地栽培[3]?，F(xiàn)今通過(guò)對(duì)水分、溫度、酸堿度、光照、空氣調(diào)節(jié)，已可實(shí)現(xiàn)在西北地區(qū)氣候、資源環(huán)境條件下，鹿角靈芝的大棚栽培，并且規(guī)?；a(chǎn)[4-6]，此外富鍺靈芝、白鶴靈芝也已實(shí)現(xiàn)大田栽培。然而由于土地資源有限，加之控制環(huán)境條件需要大量的能源，一定程度上束縛了大田栽培技術(shù)的推廣應(yīng)用。

自60年代我國(guó)實(shí)現(xiàn)靈芝室內(nèi)栽培以來(lái)，靈芝的人工栽培技術(shù)已得到長(zhǎng)足的進(jìn)步，然而傳統(tǒng)靈芝栽培產(chǎn)量低，很難滿足市場(chǎng)的需求，而且可實(shí)現(xiàn)室內(nèi)栽培的靈芝種類(lèi)少，特別是產(chǎn)自我國(guó)海南五指山的靈芝，其室內(nèi)栽培方法更鮮有報(bào)道[7]。本研究選擇一株分離自海南五指山的野生靈芝，通過(guò)控制環(huán)境條件探討實(shí)現(xiàn)靈芝室內(nèi)栽培的方法，以期為進(jìn)一步推廣應(yīng)用提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

菌株Wzs1為本課題組分離自海南五指山野生靈芝子實(shí)體，4℃保存于本實(shí)驗(yàn)室。

1.2 方法

1.2.1 菌種制備

培養(yǎng)基為鋸術(shù)屑78%、麩皮20%、蔗糖和石膏各1%，混合料含水量在60%～65%（即手握料指縫間有水滲出又不滴下），將拌好的培養(yǎng)料裝入瓶中壓實(shí)。裝至瓶肩處，內(nèi)成平面，表面覆蓋上薄層沙土，用直徑1～1.5 cm的木棍在培養(yǎng)料中插出5 cm小洞，高溫高壓滅菌2 h。培養(yǎng)基滅菌完成之后，于無(wú)菌條件下接種，22～28℃培養(yǎng)。

1.2.2 靈芝室內(nèi)栽培管理

栽培瓶置放于架上，菌絲生長(zhǎng)階段溫度維持22～25℃，子實(shí)體生長(zhǎng)階段溫度維持25～28℃，若溫度高于28℃通風(fēng)降溫，疊放在一起培養(yǎng)瓶降低高度，疏散瓶距。子實(shí)體所處環(huán)境保持高濕度，在生長(zhǎng)期，空氣相對(duì)濕度增加到90%～92%。

1.2.3 靈芝采收及子實(shí)體觀察

菌蓋顏色由乳白色變成米黃色，再由米黃色變成紅褐色時(shí)，利用銳刀沿菌柄底部切斷，及時(shí)清理余下菌根，不傷及菌絲體以便二潮生長(zhǎng)，觀察采收的子實(shí)體形態(tài)特征。

2 結(jié)果與分析

2.1 靈芝生長(zhǎng)的形態(tài)特征

接種完成后，靈芝菌絲在培養(yǎng)瓶中生長(zhǎng)，當(dāng)菌絲體長(zhǎng)到一定階段糾結(jié)形成原基，即生長(zhǎng)進(jìn)入原基期，形成肉眼可見(jiàn)的乳白色原基（圖1A）。原基分化、膨大、不斷向上生長(zhǎng)形成菌柄，菌柄頂端再橫向生長(zhǎng)成菌蓋（圖1B）。當(dāng)菌蓋中出現(xiàn)菌管時(shí)，就能產(chǎn)生孢子，直到子實(shí)體完全成熟而干枯時(shí)停止生長(zhǎng)（圖1C）。

2.2 靈芝出芝動(dòng)態(tài)變化

靈芝菌絲體長(zhǎng)滿瓶后轉(zhuǎn)移到可控制溫度的栽培室，將溫度控制在25～28℃，使其適合子實(shí)體生長(zhǎng)。本研究中以第1次觀察到Wzs1出芝時(shí)間設(shè)為第1天，經(jīng)歷5 d后，達(dá)到峰值有33瓶出芝，隨后出芝的數(shù)量逐漸減少，呈明顯的下降趨勢(shì)，進(jìn)入17 d后沒(méi)有出芝，表明Wzs1室內(nèi)出芝時(shí)間段為16 d。見(jiàn)圖2。

2.3 靈芝子實(shí)體菌蓋形成動(dòng)態(tài)

從出芝到子實(shí)體成熟這一階段需要通風(fēng)，防止室內(nèi)CO2過(guò)高，阻礙菌蓋成熟。靈芝菌蓋形成時(shí)間點(diǎn)變化較大，沒(méi)有穩(wěn)定的時(shí)間點(diǎn)為菌蓋形成高峰。此外，隨著培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng)，菌蓋形成也未成明顯下降趨勢(shì)，以第1次觀察到Wzs1菌蓋形成時(shí)間設(shè)為第1天，經(jīng)歷22 d后，菌蓋形成停止。見(jiàn)圖3。

2.4 靈芝子實(shí)體形態(tài)特征

隨著菌蓋生長(zhǎng)，菌蓋顏色由米黃色變成紅褐色時(shí)，可用利刀沿菌柄底部切斷，由于實(shí)驗(yàn)所栽培靈芝數(shù)量過(guò)多，隨機(jī)抽取30個(gè)靈芝子實(shí)體測(cè)定形態(tài)特征，如表1。

3 討論

靈芝子實(shí)體在17～33℃內(nèi)可生長(zhǎng)，低于20℃生長(zhǎng)較慢[8]。本研究中室內(nèi)栽培靈芝表明，靈芝培養(yǎng)溫度以22～25℃較合適，子實(shí)體生長(zhǎng)的適宜溫度為25～28℃。菌絲生長(zhǎng)階段當(dāng)室溫達(dá)到25℃左右時(shí)，注意適當(dāng)通風(fēng)降溫，使室溫保持在22～25℃[9]。

靈芝菌絲和子實(shí)體生長(zhǎng)需要充足氧氣供給，一般菌絲生長(zhǎng)階段對(duì)氧氣需求不高，但子實(shí)體生長(zhǎng)更需要足夠氧氣供給，此時(shí)如果氧氣供應(yīng)充足，能促進(jìn)子實(shí)體分化；如果CO2累積過(guò)多，子實(shí)體難以形成，生長(zhǎng)緩慢[10]?？諝庵蠧O2含量對(duì)靈芝生長(zhǎng)影響較大，CO2含量超過(guò)0.1%時(shí)，菌蓋難以形成；而形成分支較多的“鹿角狀”畸形；空氣中CO2含量過(guò)高，子實(shí)體生長(zhǎng)緩慢[11]。因此，為保證子實(shí)體生長(zhǎng)對(duì)氧氣的需要，當(dāng)子實(shí)體原基形成時(shí)，加強(qiáng)培養(yǎng)室通風(fēng)，根據(jù)氣溫高低縮短和延長(zhǎng)通風(fēng)時(shí)間。

本研究揭示了Wzh1靈芝出芝及菌蓋形成的動(dòng)態(tài)變化規(guī)律，結(jié)合靈芝生長(zhǎng)環(huán)境條件要求，可在今后栽培工作中提前了解靈芝生長(zhǎng)特征，有效控制環(huán)境條件變化，使其更適合靈芝的生長(zhǎng)（圖2、3）。本研究中靈芝菌蓋直徑為（1.57±0.51）cm，菌蓋厚度為（0.89±0.09）cm。呂明亮等研究發(fā)現(xiàn)，大田栽培靈芝子實(shí)體菌蓋直徑大于8.6 cm，菌蓋厚度大于1.1 cm。通過(guò)對(duì)比表明，本研究中室內(nèi)栽培靈芝子實(shí)體明顯小于大田栽培靈芝，這反映室內(nèi)栽培靈芝在營(yíng)養(yǎng)供給上的不足，因此對(duì)培養(yǎng)基成分及供給量均需改進(jìn)，以期提高靈芝子實(shí)體品質(zhì)[12]。

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