【摘要】生物顯微鏡是一種應(yīng)用廣泛的光學(xué)器材，在醫(yī)療衛(wèi)生單位、研究所、高等院校等有著重要的應(yīng)用，可用于觀察細(xì)胞、細(xì)菌、組織培養(yǎng)、沉淀物觀察等。為了發(fā)揮顯微鏡應(yīng)有的效能，我們分析了其應(yīng)用規(guī)范和日常維護(hù)的方法，提高顯微鏡的管理和應(yīng)用水平。

【關(guān)鍵詞】顯微鏡；應(yīng)用；日常維護(hù)

生物顯微鏡是在教學(xué)和科研中應(yīng)用廣泛的精密儀器，因此生物顯微鏡的應(yīng)用水平直接關(guān)系著標(biāo)本和檢測樣本檢驗(yàn)的質(zhì)量，因此加強(qiáng)生物顯微鏡的應(yīng)用管理和日常維護(hù)就有著重要的價(jià)值。提高應(yīng)用規(guī)范能夠提高檢驗(yàn)樣品的檢測質(zhì)量，減少實(shí)驗(yàn)誤差，而提高后期維護(hù)的質(zhì)量，能有效的提升生物顯微鏡的使用效率，提高工作水平。不當(dāng)?shù)墓芾砗途S護(hù)會(huì)嚴(yán)重的影響生物顯微鏡的使用壽命，為此我們結(jié)合日常工作經(jīng)驗(yàn)總結(jié)其應(yīng)用規(guī)范和日常維護(hù)方法。

1.生物顯微鏡的應(yīng)用規(guī)范

1.1安裝

在使用時(shí)，常常需要按照使用的場景進(jìn)行組裝，選擇合適的放大倍數(shù)。顯微鏡的總放大倍數(shù)是目鏡放大倍數(shù)乘以物鏡放大倍數(shù)。在使用中將不同放大倍率的物鏡按照順序擰到轉(zhuǎn)換器上，在安裝物鏡之前要對(duì)其接口處的螺紋接觸面和轉(zhuǎn)換器的螺孔進(jìn)行清理，按要求不允許有灰塵存在，否則會(huì)嚴(yán)重的降低成像質(zhì)量。在目鏡筒中插入目鏡等待使用，用壓片夾將標(biāo)本切片放置在工作臺(tái)面上并壓緊，如果顯微鏡配備有移動(dòng)尺，可以使用夾腳卡住樣本片，否則當(dāng)移動(dòng)尺水平滑動(dòng)時(shí)會(huì)影響成像的穩(wěn)定性，當(dāng)然移動(dòng)尺質(zhì)量損壞也可能導(dǎo)致成像不穩(wěn)。如發(fā)現(xiàn)成像不穩(wěn)，可適當(dāng)微調(diào)來彌補(bǔ)缺陷，如果微調(diào)幅度很大仍然成像不穩(wěn)，考慮移動(dòng)尺的移動(dòng)方向并不是水平向，可能與工作臺(tái)不平有關(guān)。

1.2照明

在使用生物顯微鏡中，常需要一定的照明措施。而照明也有一定的規(guī)范和要求，按照光源不同可以分為人工和自然兩種。人工照明有白熾燈、鹵素?zé)艉蚅ED燈。LED燈因?yàn)榫G色、環(huán)保和壽命長，成為人工照明的主流。但無論哪種方式最根本的目的都是獲得最清晰的成像。一般來說要保持亮度適中，亮度調(diào)節(jié)可通過以下方式實(shí)現(xiàn)。對(duì)于人工照明，一般調(diào)節(jié)電位器，對(duì)于平凹反光鏡，在旋轉(zhuǎn)反光鏡時(shí)可以獲得不同的亮度。在環(huán)境光線比較暗時(shí)，可選擇凹面鏡來聚集光線，而當(dāng)光照足夠時(shí)，選擇平面鏡，并且此時(shí)旋轉(zhuǎn)鏡面的調(diào)節(jié)力度更大。使用中切忌陽光直射到反光鏡上，刺激人眼影響觀察。攜帶有聚光鏡的生物顯微鏡可通過其上下移動(dòng)來調(diào)節(jié)亮度，并輔助改變光闌的孔徑大小調(diào)節(jié)亮度。

1.3調(diào)焦

觀察樣本切片時(shí)必須進(jìn)行調(diào)焦，調(diào)焦的規(guī)范為：按照順序先粗調(diào)后微調(diào)，結(jié)合不同物鏡的倍率調(diào)節(jié)工作距離做粗調(diào)，接著觀察目鏡觀看標(biāo)本粗調(diào)直到能看到樣本的輪廓，再微調(diào)從而使得物象達(dá)到最清晰時(shí)即可。有時(shí)由于長期使用會(huì)影響粗動(dòng)手輪的靈活性，可一只手固定其中一只微動(dòng)手輪，另一只手適當(dāng)調(diào)節(jié)粗動(dòng)手輪。在使用高倍鏡時(shí)應(yīng)注意其工作距離較短，調(diào)焦時(shí)盡量從上到下，從而避免超過工作距離損壞鏡頭，盡管有的高倍鏡設(shè)置了彈簧裝置，不至于兩者出現(xiàn)較大壓力，但還應(yīng)該提高操作規(guī)范性。

1.4觀察

在樣本觀察時(shí)，把切片樣本移動(dòng)到視線中央后，一般先使用10倍鏡觀察，再轉(zhuǎn)換高倍鏡進(jìn)行觀察。這時(shí)要適當(dāng)?shù)脑黾庸怅@的孔徑大小增加透光，從而獲得較為清晰的成像。在物鏡轉(zhuǎn)換中，用手適當(dāng)?shù)霓D(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器來轉(zhuǎn)換物鏡，切勿使用扳手或者其他工具，避免損傷物鏡和轉(zhuǎn)換器之間的連接。有時(shí)轉(zhuǎn)換器定位存在一定范圍的誤差，可以反復(fù)幾次轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器來減少這種間隙誤差。如果定位彈片彈性損壞或者彈性降低時(shí)，可將彈片拆下后整形，重裝以后保證能壓緊定位槽即可，必要時(shí)可進(jìn)行更換。

2.生物顯微鏡的日常維護(hù)

2.1選擇合適的清潔液和清潔工具

常用的清潔液為分析純乙醚和分析純乙醇，其中兩者占比分別為乙醚（70%）、乙醇（30%）。常用的清潔工具有放大鏡、軟紗布、擦鏡紙、軟木棍和棉花、吹氣球。由于乙醚和乙醇都有著較強(qiáng)的揮發(fā)性，如果不是現(xiàn)配現(xiàn)用的話會(huì)改變混合的比例，并影響清洗的效果，一般來說都是現(xiàn)配現(xiàn)用。并不推薦純二甲苯和無水酒精，前者不僅容易留下痕跡，而且會(huì)腐蝕鍍膜，而后者在清潔后容易留下痕跡。

2.2光學(xué)部件的清潔規(guī)范

建議在清理光學(xué)部件時(shí)，應(yīng)該從內(nèi)打轉(zhuǎn)向外進(jìn)行清理，最后在鏡頭的外圍將污染物跳出，清潔的順序如圖-1所示。在擦拭之前一定要用吹氣球?qū)⒋箢w粒的灰塵吹走，并采用軟毛刷輕輕的掃掉鏡面殘留的灰塵，再用擦鏡紙蘸取清潔液進(jìn)行清潔，防止在擦拭時(shí)造成劃痕從而影響觀察效果。

圖-1鏡頭清潔順序

2.3光學(xué)部件維護(hù)

（1）顯微鏡光路污染，當(dāng)切換到高倍鏡進(jìn)行觀察時(shí)，對(duì)樣本進(jìn)行聚焦并粗調(diào)和微調(diào)后，按照正確的規(guī)范和順序調(diào)節(jié)孔徑光瀾大小，獲得較為清晰的標(biāo)本成像，在目鏡中觀察樣本，光路中出現(xiàn)斑點(diǎn)即為光路污染。這些污點(diǎn)可能存在不同的光學(xué)部件當(dāng)中，例如觀察筒、物鏡、目鏡或者其他的部件，可以通過切換物鏡和目鏡等來判斷污點(diǎn)的位置，當(dāng)僅旋轉(zhuǎn)物鏡或者目鏡時(shí)污點(diǎn)也跟著轉(zhuǎn)動(dòng)，那么顯然污點(diǎn)在目鏡或者物鏡上，此時(shí)可以將對(duì)應(yīng)的部件拆卸下來進(jìn)行清洗，并檢查污點(diǎn)是否消除。如果轉(zhuǎn)動(dòng)物鏡或者目鏡污點(diǎn)沒有動(dòng)，那么可以初步肯定是在觀察筒或者別的部件中，此時(shí)轉(zhuǎn)動(dòng)觀察筒來確認(rèn)污點(diǎn)的位置，一步步進(jìn)行排除和清理。

（2）物鏡和目鏡表面雜物檢查，將目鏡拆卸下來后，逆光方向改變觀察的角度，能夠較為清晰的看到目鏡表面是否存在污染物。如果觀察到物鏡有污染，在進(jìn)行清理是由于頂端的透鏡面積較小，肉眼往往難以操作，這時(shí)可拆掉一個(gè)目鏡然后調(diào)節(jié)方向從而充當(dāng)放大鏡使用，放大后可以看到污染物的位置，并進(jìn)行清除。

（3）霉菌檢查，霉菌的生長環(huán)境為20～30℃，80%～90%的空氣濕度。盡管很多的生物顯微鏡都配置的防菌系統(tǒng)，通過化學(xué)藥品防止細(xì)菌生長。但是防菌系統(tǒng)也有著一定的保質(zhì)期限，一般在超過6年后會(huì)徹底失效。而霉菌的生長不僅僅會(huì)影響成像，同時(shí)其分泌出來的物質(zhì)也會(huì)影響玻璃表面的鍍層，嚴(yán)重降低生物顯微鏡的性能。當(dāng)光路出現(xiàn)霉菌后，要及時(shí)更換防菌系統(tǒng)，并用廠家專門配置的除霉膏來清理霉菌。

2.4機(jī)械部件和電路部件

生物顯微鏡主要是有光學(xué)部件和機(jī)械部件構(gòu)成的，機(jī)械部件的使用和維護(hù)也相當(dāng)重要。常見的問題有載物臺(tái)下滑等，一般可通過粗調(diào)松緊度就能解決，如果不能，則需要專業(yè)維修人員進(jìn)行維修，或直接更換零部件。電路部件主要是保險(xiǎn)絲、電路板和燈泡等，在更換燈泡時(shí)需要注意功率大小，且在更換時(shí)注意不要在燈泡上殘留指紋，這樣容易縮短其應(yīng)用壽命。

3.結(jié)語

總之，生物顯微鏡的應(yīng)用規(guī)范和維護(hù)保養(yǎng)意義重大，在日常的使用中必須注意這些問題，從而有效提升生物顯微鏡的使用效率和質(zhì)量，更好的發(fā)揮其應(yīng)有的作用和價(jià)值。

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作者簡介

虞兆芳，女，1962年10月，漢族，浙江，單位：寧波永新光學(xué)股份有限公司，大專（英語），中專（機(jī)械制造），工程師，研究方向：顯微鏡市場調(diào)研與售后技術(shù)維護(hù)。