席晨輝,何　秉,程志儉

(復(fù)旦大學(xué)附屬上海市第五人民醫(yī)院,上海 200240)

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Gal-3、TSGF和Hpa水平檢測(cè)診斷橋本甲狀腺炎合并甲狀腺乳頭狀癌的臨床意義

席晨輝,何秉,程志儉

(復(fù)旦大學(xué)附屬上海市第五人民醫(yī)院,上海 200240)

[摘要]目的觀察半乳糖血凝素-3(Gal-3)、腫瘤特異性生長(zhǎng)因子(TSGF)和乙酰肝素酶(Hpa)水平檢測(cè)在診斷橋本甲狀腺炎(HT)合并甲狀腺乳頭狀癌(PTC)中的臨床意義。方法選擇HT合并PTC患者105例為HT合并PTC組，選擇同期在我院就診的HT患者55例為HT組，行健康體檢者30例為健康對(duì)照組。檢測(cè)各組血清Gal-3、TSGF和Hpa水平， 分析HT合并PTC患者血清Gal-3、TSGF和Hpa水平與HT分期和AJCC分期的關(guān)系，及治療前后的變化。結(jié)果HT合并PTC組的Gal-3、TSGF和Hpa水平均明顯高于健康對(duì)照組和HT組(P均<0.05)，而HT組的Gal-3、TSGF和Hpa水平均明顯高于健康對(duì)照組(P均<0.05)。HT合并PTC患者血清Gal-3、TSGF和Hpa水平隨著HT分期和AJCC分期的升高而升高(P均<0.05)。術(shù)后的HT合并PTC患者血清Gal-3、TSGF和Hpa水平均明顯低于術(shù)前(P均<0.05)。HT合并PTC患者血清Gal-3水平與TSGF(r=0.592，P<0.05)和Hpa(r=0.752，P<0.05)水平均呈正相關(guān)，而TSGF水平與Hpa呈正相關(guān)(r=0.628，P<0.05)。結(jié)論Gal-3、TSGF和Hpa參與了HT合并PTC疾病的發(fā)生發(fā)展過(guò)程，其對(duì)早期診斷HT合并PTC具有重要的臨床意義。

[關(guān)鍵詞]橋本甲狀腺炎；甲狀腺乳頭狀癌；腫瘤特異性生長(zhǎng)因子；半乳糖血凝素-3；乙酰肝素酶

橋本甲狀腺炎(HT)是一種常見(jiàn)的自身免疫性疾病，常合并甲狀腺乳頭狀癌(PTC)，其發(fā)病率為18%～87%[1]。早期診斷HT合并PTC對(duì)于治療至關(guān)重要，直接影響到預(yù)后。半乳糖血凝素-3(Gal-3)是一種識(shí)別糖蛋白和糖脂中的半乳糖結(jié)合蛋白結(jié)合，現(xiàn)有研究表明通過(guò)免疫組化的方法將Gal-3作為良惡性腫瘤的標(biāo)記物，尤其對(duì)于鑒別PTC具有較高的特異性[2]。腫瘤特異性生長(zhǎng)因子(TSGF)對(duì)腫瘤生長(zhǎng)的敏感性和特異性具有較高的敏感性，其主要與腫瘤的血管增殖具有明顯的相關(guān)性，為廣譜的腫瘤標(biāo)記物[3]。乙酰肝素酶(Hpa)是一種糖苷酶，對(duì)腫瘤的生長(zhǎng)，分化和轉(zhuǎn)移具有重要作用，并在PTC和甲狀腺良性疾病的診斷和鑒別診斷具有重要的作用[4]。本研究通過(guò)對(duì)患者血清中TSGF、Gal-3和Hpa含量的檢測(cè)，觀察各指標(biāo)與HT合并PTC發(fā)生發(fā)展的關(guān)系，現(xiàn)報(bào)道如下。

1臨床資料

1.1一般資料選擇2011年1月—2015年6月在我院就診HT合并PTC患者105例，為HT合并PTC組，均經(jīng)手術(shù)后病理證實(shí)HT合并PTC。其中男43例，女62例；年齡18～80(45.72±9.72)歲；HT病理分期早期16例，中期23例和晚期66例；根據(jù)美國(guó)癌癥聯(lián)合會(huì)(AJCC)分期Ⅰ期53例，Ⅱ期17例，Ⅲ期 22例，Ⅳ期 13 例。選擇同期在我院就診的HT患者55例為HT組，均經(jīng)病理確診為HT。其中男21例，女34例；年齡18～80(45.13±8.27)歲。選擇同期在我院行健康體檢者30例為健康對(duì)照組，其中男13例，女17例；年齡18～60(45.62±7.72)歲。所有入選者排除有其他癌癥和內(nèi)分泌性疾病，高血壓、糖尿病和冠心病等慢性疾病，肝炎、結(jié)核和肺炎等急慢性感染性疾病，孕婦和哺乳期婦女。3組年齡、性別等一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)，具有可比性。

1.2方法

1.2.1手術(shù)治療HT合并PTC組和HT組均采用手術(shù)治療，手術(shù)標(biāo)本均進(jìn)行病理觀察。HT合并PTC組按照AJCC的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分期。

1.2.2HT的分期將HT分為早期、中期和晚期。早期：術(shù)中病變組織中等硬度，與正常腺體界限不清，切面顏色為粉白或者粉紅，正常腺體變少，病理見(jiàn)甲狀腺組織中散在分布淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)和濾泡上皮嗜酸變，病程在1年左右；中期：介于早期和中期之間病變，病程1～3年；晚期：術(shù)中甲狀腺質(zhì)地硬，與正常組織界限清楚，組織切面白色或者灰白，病理見(jiàn)腺泡萎縮、壞死、纖維化、小葉結(jié)構(gòu)消失，病程一般超過(guò)3年。

1.2.3血液標(biāo)本的抽取和指標(biāo)的檢測(cè)入院第1天HT組和健康對(duì)照組和HT合并PTC組術(shù)后1周抽取空腹血液2～3 mL，以轉(zhuǎn)速為3 000 r/min，離心半徑為10 cm，離心20 min，分離血清，并保存于-70 ℃冰箱中。采用酶聯(lián)免疫法測(cè)定Gal-3、TSGF和Hpa水平采用Freedom Evolyzer 2150 型全自動(dòng)酶標(biāo)儀測(cè)定。試劑盒均購(gòu)自美國(guó)R&D公司，操作按照試劑盒進(jìn)行。

1.3觀察指標(biāo)觀察各組血清Gal-3、TSGF和Hpa水平，以及HT合并PTC患者血清Gal-3、TSGF和Hpa水平與HT分期和AJCC分期的關(guān)系，及治療前后的變化。

2結(jié)果

2.1各組Gal-3、TSGF和Hpa水平比較HT合并PTC組的Gal-3、TSGF和Hpa水平明顯高于健康對(duì)照組和HT組(P均<0.05)，而HT組Gal-3、TSGF和Hpa水平明顯高于健康對(duì)照組(P均<0.05)。見(jiàn)表1。

表1　各組Gal-3、TSGF和Hpa水平比較

注：①與健康對(duì)照組比較，P<0.01；②與HT組比較，P<0.01。

2.2HT合并PTC患者血清Gal-3、TSGF和Hpa水平與HT嚴(yán)重程度的關(guān)系HT合并PTC患者血清Gal-3、TSGF和Hpa水平隨著HT分期升高而升高(P均<0.05)。見(jiàn)表2。

表2　HT合并PTC患者血清Gal-3、TSGF和Hpa水平與

注：①與早期比較，P<0.05；②與中期比較，P<0.05。

2.3HT合并PTC患者血清Gal-3、TSGF和Hpa水平與AJCC分期的關(guān)系TC合并HT患者血清Gal-3、TSGF和Hpa水平隨著AJCC分期升高而升高(P<0.05)。見(jiàn)表3。

表3　HT合并PTC患者血清Gal-3、TSGF和

注：①與Ⅰ期比較，P<0.05；②與Ⅱ期比較，P<0.05；③與Ⅲ期比較，P<0.05。

2.4HT合并PTC患者血清Gal-3、TSGF和Hpa水平在手術(shù)前后的變化術(shù)后HT合并PTC患者血清Gal-3、TSGF和Hpa水平明顯低于術(shù)前(P均<0.05)。見(jiàn)表4。

2.5HT合并PTC患者血清Gal-3、TSGF和Hpa水平相關(guān)性分析HT合并PTC患者血清Gal-3水平與TSGF(r=0.592，P<0.05)和Hpa(r=0.752，P<0.05)水平呈正相關(guān)，且TSGF和Hpa水平呈正相關(guān)(r=0.628，P<0.05)。

表4　HT合并PTC患者血清Gal-3、TSGF和Hpa

3討論

腫瘤標(biāo)記物對(duì)惡性腫瘤的診斷具有廣闊的前景，由于其比較簡(jiǎn)便，患者依從性強(qiáng)等特點(diǎn)，可在一定程度上提高對(duì)甲狀腺良惡性結(jié)節(jié)進(jìn)行鑒別診斷。Gal-3是一種β半乳糖苷特異性凝集素，主要含3個(gè)特異性功能的結(jié)構(gòu)域[5]：①氨基末端結(jié)構(gòu)域，為絲氨酸磷酸化位點(diǎn)，主要功能為調(diào)節(jié)細(xì)胞信號(hào)的功能；②α-膠原樣序列，能夠被金屬蛋白酶裂解；③糖識(shí)別域和反死亡序列的羧基端。其主要分布在細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)內(nèi)，通過(guò)非經(jīng)典途徑分泌到細(xì)胞外，通過(guò)與細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞間的不同蛋白質(zhì)相互作用，參與多種生理和病理過(guò)程。本研究表明HT合并PTC患者的血清Gal-3水平明顯高于HT組和健康對(duì)照組，并且發(fā)現(xiàn)隨著HT和AJCC分期的升高而升高，治療后其水平明顯降低，文獻(xiàn)報(bào)道PTC組織中免疫組化檢測(cè)Gal-3陽(yáng)性率明顯升高并與HT的分期呈正相關(guān)[6]，說(shuō)明Gal-3參與PTC疾病的發(fā)生發(fā)展過(guò)程，并與預(yù)后具有明顯的相關(guān)性?，F(xiàn)有文獻(xiàn)報(bào)道Gal-3水平與甲狀腺良惡性腫瘤的術(shù)前診斷是否具有參考價(jià)值存在爭(zhēng)議，一部分學(xué)者認(rèn)為血清Gal-3水平與甲狀腺良惡性腫瘤之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，可能與收集年限較短，病例數(shù)較少有關(guān)。另一部分學(xué)者認(rèn)為Gal-3水平能夠明顯鑒別良惡性甲狀腺腫瘤，并且具有較高的敏感性和特異性[7-8]。本研究支持后者的觀點(diǎn)，可能與Gal-3可以刺激細(xì)胞增殖，對(duì)腫瘤細(xì)胞的凋亡具有抑制作用，促進(jìn)腫瘤組織中血管的生成，腫瘤細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)相互作用，促進(jìn)腫瘤的發(fā)生發(fā)展和轉(zhuǎn)移。

TSGF是一種惡性腫瘤血管增殖相關(guān)的新型腫瘤標(biāo)記物，具有光譜、敏感和特異性高等優(yōu)點(diǎn)，其主要由小分子糖類(lèi)物質(zhì)，氨基酸及其代謝產(chǎn)物組成的腫瘤標(biāo)記物，其能促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)和周邊血管的增生，并隨著腫瘤組織的增殖而不斷釋放入血，在腫瘤形成的早期即可以出現(xiàn)明顯升高。TSGF在多種腫瘤血清含量明顯增高，如在胃癌、腸癌、肺癌和乳腺癌等群體篩查和早期診斷具有重要意義[9-10]，但對(duì)于HT合并PTC的早期診斷國(guó)內(nèi)外報(bào)道較少[11]。本組研究表明TSGF水平在TH合并PTC組明顯高于HT組和健康對(duì)照組，并隨著和HT疾病嚴(yán)重程度和PTC分期的升高而升高，治療后機(jī)體的TSGF水平出現(xiàn)明顯的下降，說(shuō)明TSGF參與了PTC的發(fā)生發(fā)展過(guò)程，對(duì)腫瘤的預(yù)后具有重要價(jià)值。現(xiàn)已知TSGF是一種內(nèi)源性的血管發(fā)生因子，在腫瘤的血管發(fā)生和發(fā)展中具有重要作用，在惡性腫瘤大量增殖和新生血管大量形成時(shí)，TSGF被逐漸釋放入血[4]。在惡性腫瘤的初期即釋放入血，并達(dá)到一定濃度，故在腫瘤形成的早期即出現(xiàn)明顯升高，因此比臨床癥狀和體征早3～6個(gè)月被檢測(cè)出，故TSGF一直作為廣譜、特異性和敏感性高的腫瘤標(biāo)志物被用于臨床。而本研究證實(shí)TSGF在HT合并PTC、HT和健康對(duì)照人群中水平存在差異，并且與疾病的嚴(yán)重程度具有一定的聯(lián)系，故TSGF可以作為HT合并PTC早期的診斷指標(biāo)。

Hpa廣泛存在于細(xì)胞膜和細(xì)胞外基質(zhì)中，保持著乙酰肝素水平的平衡，并在機(jī)體中保持穩(wěn)定，維持著細(xì)胞核組織正常增生、分化、黏附和遷移，若機(jī)體的Hpa出現(xiàn)明顯增多，乙酰肝素的側(cè)鏈被水解，乙酰肝素在體內(nèi)恒定水平將被破壞，促進(jìn)腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移[12]。本研究表明HT合并PTC組的Hpa水平明顯高于HT組合組和健康對(duì)照組，并隨著HT和PTC嚴(yán)重程度的增加而增加，術(shù)后Hpa水平較術(shù)前明顯降低，說(shuō)明Hpa參與了PTC疾病發(fā)生發(fā)展的過(guò)程，并與PTC預(yù)后具有明顯相關(guān)性，提示乙酰肝素的平衡被打破，Hpa通過(guò)破壞細(xì)胞基底膜和細(xì)胞外基質(zhì)，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞通過(guò)基底膜進(jìn)入基質(zhì)和血管壁，導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生發(fā)展。有研究表明Hpa的過(guò)度表達(dá)加大了對(duì)基質(zhì)穩(wěn)定狀態(tài)的破壞，使新生淋巴管增多，加速腫瘤的發(fā)生發(fā)展[13]；腫瘤的發(fā)展促進(jìn)淋巴管的形成又進(jìn)一步破壞乙酰肝素在機(jī)體的穩(wěn)定，形成惡性循環(huán)[14]。以Hpa為靶點(diǎn)的抗腫瘤藥物的研究已經(jīng)成為熱點(diǎn)，肝素抑制劑可以抑制口腔上皮癌的增殖和侵襲，并且臨床上與化療藥物聯(lián)合運(yùn)用，增強(qiáng)化療的效果已經(jīng)明確，已經(jīng)進(jìn)入了Ⅲ期臨床實(shí)驗(yàn)[15]，由此可見(jiàn)Hpa將可能成為PTC早期診斷和治療的切入點(diǎn)。

本研究表明HT合并PTC患者血清Gal-3水平與TSGF和Hpa水平呈正相關(guān)，而TSGF和Hpa水平呈正相關(guān)，說(shuō)明各個(gè)指標(biāo)之間在形成PTC過(guò)程中具有內(nèi)在的聯(lián)系，說(shuō)明PTC也是多種因素參與的全身性疾病?？傊珿al-3、TSGF和Hpa參與了HT合并PTC疾病的發(fā)生發(fā)展過(guò)程，其對(duì)早期診斷HT合并PTC具有重要的臨床意義。

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[收稿日期]2015-11-10

[中圖分類(lèi)號(hào)]R736.1

[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]B

[文章編號(hào)]1008-8849(2016)12-1315-03

doi:10.3969/j.issn.1008-8849.2016.12.022