黃　毅（福建農(nóng)林大學(xué)，福建 福州 350000）

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圖解海鮮菇袋式栽培技術(shù)（六）

黃毅
（福建農(nóng)林大學(xué)，福建 福州 350000）

9　凈化接種系統(tǒng)

食用菌行業(yè)能夠從傳統(tǒng)季節(jié)性栽培逐漸走向成熟的集約化、規(guī)?；苣暝耘?，得益于大量專業(yè)機(jī)械設(shè)備的研發(fā)應(yīng)用，尤其是凈化系統(tǒng)中高效空氣凈化層流罩（FFU）和臭氧發(fā)生機(jī)的開發(fā)成功，大幅度降低了污染率。液體菌種開發(fā)與應(yīng)用逐漸得到完善。

海鮮菇袋式接種有兩種方式：小規(guī)模栽培多使用接種箱接種；而周年規(guī)?；耘啵丈a(chǎn)量較大的只能夠在高效空氣凈化層流罩（FFU）下的滾筒流水線上接種，簡(jiǎn)稱流水線接種（下同）。接種箱接種速度緩慢，且采用的傳統(tǒng)藥物消毒法對(duì)人體呼吸道粘膜有傷害，不適宜于大規(guī)模生產(chǎn)。而流水線接種操作員則可在凈化間內(nèi)作近似開放式接種，需要采取一系列的物理方法過濾，不斷循環(huán)凈化空氣，去除雜菌。因此，需要配置不同功能區(qū)，以利于達(dá)到凈化要求。9.1接種區(qū)的各功能區(qū)布局

接種區(qū)分操作人員進(jìn)出凈化區(qū)，菌種培養(yǎng)與預(yù)處理區(qū)，流水線接種區(qū)三區(qū)。各區(qū)功能不同，設(shè)備也不同，但統(tǒng)稱為凈化間（圖1）。

圖1所示為日生產(chǎn)3萬栽培包凈化間布局示意圖。不同企業(yè)日生產(chǎn)量不同，可根據(jù)計(jì)劃生產(chǎn)規(guī)模增加或減少凈化間的長(zhǎng)度、固體菌種間的數(shù)量，接種工位數(shù)量、長(zhǎng)度應(yīng)通過計(jì)算確定，基本布局大致相近，特別是菌種培養(yǎng)間與凈化間應(yīng)相鄰。使用液體菌種接種工藝的企業(yè)，可以改變?cè)N接種間與菌種間的隔墻，根據(jù)流程、罐體規(guī)格、數(shù)量等重新分割。

空氣中的塵埃、雜菌隨氣流漂浮、沉降，會(huì)沾粘在人們的身體和衣物上，所以進(jìn)入凈化間接種前應(yīng)采用物理過濾去除人體上沾粘的塵埃與雜菌等。操作人員進(jìn)出區(qū)的系統(tǒng)流程為：更鞋（一更）→更衣（二更）、洗手→進(jìn)入風(fēng)淋間→進(jìn)入凈化間接種。

（1）更換鞋子，簡(jiǎn)稱一更（圖2）。進(jìn)入凈化間之前，將外套等放入衣柜里，鎖門。脫鞋、坐在更衣凳上，轉(zhuǎn)身，穿上室內(nèi)脫鞋，進(jìn)入二更（更衣）（圖3）。從安裝有高效空氣凈化層流罩（每周至少更換兩次初效過濾網(wǎng)）的衣柜（空氣不斷循環(huán)凈化，將粘連在衣服上的顆粒去除）內(nèi)取出連體服并換上，換上凈化間使用的拖鞋，沖洗雙手，烘干，進(jìn)入風(fēng)淋間。

圖1　凈化間布局示意圖

圖2　一更

圖3　凈化層流罩衣柜

圖4　風(fēng)淋間

圖5　安全門

遺憾的是，不少企業(yè)尚未購(gòu)置高效空氣凈化層流罩衣柜（內(nèi)還安裝有紫外線殺菌燈），而是直接將連體服掛在墻上。其實(shí)凈化間環(huán)境并不是絕對(duì)無塵的，連體衣服上沾粘的塵埃必然會(huì)增加接種間雜菌數(shù)。正確做法，是將更換后或洗滌干燥后的衣服和鞋置于高效空氣凈化層流罩衣柜內(nèi)，進(jìn)行循環(huán)凈化。通常每人配置兩套連體服及鞋，隔天更換，由操作工輪流專門清洗。

（2）風(fēng)淋間（圖4）是人員進(jìn)入凈化間接種的過道。人員進(jìn)入風(fēng)淋間后，前后兩道玻璃門互鎖，高效空氣凈化層流罩的高速凈化風(fēng)隨即從一側(cè)或兩側(cè)墻上的噴嘴噴出。操作工舉起雙手，緩慢旋轉(zhuǎn)2～3圈，將身上及頭發(fā)上的塵埃顆粒、發(fā)屑等（附著大量微生物）吹落并附著在過濾網(wǎng)上，避免帶入凈化間。風(fēng)淋過程一般需要2～3分鐘，或更長(zhǎng)。每隔一天于工作結(jié)束之后，更換風(fēng)淋間初效濾網(wǎng)并擦洗導(dǎo)流板，3天或更長(zhǎng)時(shí)間更換會(huì)增加風(fēng)阻，失去風(fēng)淋效果。高效過濾板6個(gè)月更換一次，每次維護(hù)都應(yīng)該有記錄。有企業(yè)常會(huì)出現(xiàn)電子互鎖玻璃門損壞后不及時(shí)維修的現(xiàn)象，反映出企業(yè)管理制度的監(jiān)督缺失。

（3）凈化接種間是近似密閉的空間，接種員工相對(duì)較多，一旦出現(xiàn)意外（火災(zāi)）無法快速撤離，會(huì)導(dǎo)致傷亡慘重（已有先例），故應(yīng)另安裝安全玻璃門，一旦出現(xiàn)火情，應(yīng)立刻擊碎，逃生到室外（圖5）。9.2凈化間流水線接種區(qū)的設(shè)備

（1）空調(diào)空氣凈化混合箱。外界新風(fēng)通過箱體上安裝的新風(fēng)調(diào)節(jié)閥（控制新風(fēng)進(jìn)風(fēng)量，保證每人每小時(shí)新風(fēng)量不少于40立方米）經(jīng)初效過濾網(wǎng)（插入式）、中效過濾網(wǎng)（嵌入式）進(jìn)入箱體，進(jìn)行第一次空氣凈化。與來自凈化間的―回風(fēng)‖混合后流過制冷機(jī)組蒸發(fā)器，使空氣溫度穩(wěn)定在20 ℃，隨后通過凈化間頂面夾層或PVC管道連接的高效空氣凈化層流罩（FFU）或自凈器（圖6）。

（2）自凈器。經(jīng)調(diào)溫的空氣通過安裝在夾層滾筒流水線接種區(qū)域上方的高效空氣凈化層流罩或自凈器，進(jìn)行第二次空氣過濾。二次凈化后的空氣一部分進(jìn)入凈化間，一部分進(jìn)入架設(shè)或者懸掛在接種流水線上方的高效空氣凈化層流罩（圖6）進(jìn)行第三次空氣凈化。

全省微型企業(yè)培育工程實(shí)施4年以來，向社會(huì)提供的就業(yè)崗位，占到私營(yíng)從業(yè)人員的三分之一以上，吸納了以高校畢業(yè)生、返鄉(xiāng)農(nóng)民工、失業(yè)人員、軍隊(duì)復(fù)員人員等為主體的44.7萬人創(chuàng)業(yè)就業(yè)，戶均帶動(dòng)就業(yè)5.6人，以省政府要求的每扶持1戶帶動(dòng)5人就業(yè)測(cè)算，超額帶動(dòng)4.7萬人就業(yè)。在一定程度上緩解了就業(yè)壓力，激發(fā)了廣大民眾自主創(chuàng)業(yè)的熱情，增強(qiáng)了微型企業(yè)的發(fā)展信心，營(yíng)造了大眾創(chuàng)業(yè)萬眾創(chuàng)新的良好氛圍。

圖6　空調(diào)凈化間工作原理

（3）高效空氣凈化層流罩（FFU）。主體結(jié)構(gòu)包含初效過濾網(wǎng)、翼式離心風(fēng)機(jī)（具有可三檔調(diào)速或通過可控硅對(duì)FFU電機(jī)無級(jí)調(diào)速等特性）和高效過濾網(wǎng)（蜂窩狀結(jié)構(gòu)）。風(fēng)機(jī)從FFU頂部將空氣吸入并經(jīng)初、高效過濾器過濾。使用HEPA標(biāo)準(zhǔn)的厚90毫米的過濾網(wǎng)，對(duì)于0.3微米的顆粒過濾有效率高達(dá)99.99%。HEPA過濾網(wǎng)的特點(diǎn)是空氣可以通過，但煙霧、灰塵以及細(xì)菌等無法通過，是當(dāng)前最有效的過濾媒介。過濾后的潔凈空氣在整個(gè)出風(fēng)面以0.45 M/S±20%的風(fēng)速勻速送出。生產(chǎn)上FFU的安裝模式為：支架式或懸掛式安裝在接種區(qū)域的上方，有的廠家還在其四周懸掛塑料軟簾，在出風(fēng)口下進(jìn)行流水線接種；也有的廠家為增加FFU下端出風(fēng)口的風(fēng)壓，做成接種箱形式，以減少人體操作過程對(duì)空氣產(chǎn)生的渦流，減少或避免將雜菌帶入接種區(qū)域，導(dǎo)致污染。三次凈化空氣部分從掛在FFU上的軟簾縫隙回到凈化間的空間，通過回風(fēng)道再進(jìn)入空氣凈化箱內(nèi)，進(jìn)行不斷循環(huán)凈化（圖7）。根據(jù)生產(chǎn)規(guī)模設(shè)置凈化間流水線的數(shù)量，通常8 000包生產(chǎn)規(guī)模配置1條流水線支線，每條生產(chǎn)線2人操作，工作時(shí)間7.5小時(shí)。

（4）回風(fēng)閥與泄壓閥。凈化間內(nèi)空氣通過回風(fēng)閥再次進(jìn)入空調(diào)空氣凈化混合箱，以構(gòu)成凈化循環(huán)，達(dá)到空氣凈化的目的。泄壓閥安裝有軸流風(fēng)機(jī)，當(dāng)凈化間內(nèi)的空氣達(dá)到一定壓力時(shí)，在平衡棒杠桿作用下，自動(dòng)打開液壓閥百葉片，排出室內(nèi)氣體。當(dāng)需要快速排出室內(nèi)空氣時(shí)，可啟動(dòng)安裝在泄壓閥外的軸流風(fēng)機(jī)運(yùn)轉(zhuǎn)數(shù)分鐘。為防止外界空氣倒吸，簡(jiǎn)單易行的方法是在軸流風(fēng)機(jī)上套上塑料袋筒，軸流風(fēng)機(jī)運(yùn)轉(zhuǎn)，塑料筒打開；停止運(yùn)轉(zhuǎn)，塑料筒下垂。

（5）凈化度。通常通過測(cè)試凈化室每小時(shí)循環(huán)凈化的次數(shù)決定凈化級(jí)別，有10萬級(jí)（17～18 次/小時(shí)）、萬級(jí)（27次/小時(shí)）、千級(jí)（≥53次/小時(shí)）。級(jí)數(shù)越低，凈化級(jí)別越高，能耗也越高。在微電子行業(yè)里凈化度要求相當(dāng)高，必須整個(gè)系統(tǒng)都維持在千級(jí)潔凈度，甚至百級(jí)凈化度。而食用菌行業(yè)只要關(guān)鍵部分能夠達(dá)到一定凈化度就足夠了，如凈化間、菌種培養(yǎng)庫(kù)環(huán)境控制在萬級(jí)，接種區(qū)域控制在千級(jí)（在萬級(jí)基礎(chǔ)上加裝高效過濾器FFU層流罩）。

凈化度測(cè)試方法，國(guó)內(nèi)食用菌行業(yè)套用微電子行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，以測(cè)試塵埃顆粒數(shù)作為驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)。筆者認(rèn)為這是錯(cuò)誤的，一旦操作人員進(jìn)入接種間，無論是經(jīng)過風(fēng)淋，還是經(jīng)過空氣凈化，都只是相對(duì)無菌，而非絕對(duì)無菌。因此，測(cè)試接種區(qū)域沉降菌落數(shù)量才是最直觀的方法：在接種前，將細(xì)菌平板培養(yǎng)基（直徑12厘米）懸掛在FFU出風(fēng)口下端，接種過程中，打開平板，暴露30分鐘，再蓋上，32 ℃下培養(yǎng)2天，觀察是否出現(xiàn)細(xì)菌或霉菌菌落，少于3個(gè)菌落，才算合格。同樣方法也可以測(cè)試凈化室、強(qiáng)冷室的菌落數(shù)。接種時(shí)，栽培瓶打開（包）蓋（塞）后暴露在FFU下的時(shí)間很短，僅數(shù)秒鐘，造成污染的概率很低。

圖7　凈化間縱向示意圖

圖8　凈化間橫向示意圖

（6）風(fēng)道布局。有些企業(yè)為了使凈化間內(nèi)各角落都維持同樣的均勻度，將回風(fēng)管伸出屋頂并做保溫，再回到凈化間。在5～6月梅雨季節(jié)（初夏），外界氣溫高，空間濕度大，屋面輻射熱會(huì)導(dǎo)致風(fēng)管內(nèi)、外出現(xiàn)溫差（5～10 ℃），產(chǎn)生―結(jié)露‖，甚至出現(xiàn)水滴。無論是千級(jí)還是百級(jí)凈化度，凈化系統(tǒng)并非絕對(duì)無菌，微生物附著在管壁上增殖擴(kuò)散，無形中增加了凈化間的雜菌數(shù)。由于回風(fēng)道內(nèi)難以潔凈，有的企業(yè)又沒有做好臭氧循環(huán)消毒，生產(chǎn)上特別是在梅雨季節(jié)常見3%～5%的污染率，杏鮑菇栽培時(shí)常出現(xiàn)季節(jié)性假單孢桿菌為害，原因就在于此。

建議凈化間頂采用夾層建筑架構(gòu)（圖7，圖8）。將大口徑的PVC風(fēng)管埋藏在夾層內(nèi)或者使用管道倒置在頂板上分送到各接種工位上端，空氣再次凈化。使回風(fēng)管道和凈化間處于同一溫度區(qū)域，防止因產(chǎn)生溫差而出現(xiàn)結(jié)露的現(xiàn)象，以免雜菌在風(fēng)道內(nèi)滋生，導(dǎo)致接種污染特別是細(xì)菌污染的概率大幅度上升。凈化系統(tǒng)配置不在于花多少錢，而在于簡(jiǎn)潔、實(shí)用。每日接種后要維護(hù)環(huán)境衛(wèi)生，定時(shí)更換過濾網(wǎng)，每隔3天進(jìn)行微生物沉降菌檢測(cè)，檢查監(jiān)督制度執(zhí)行是否到位，這些才是最重要的。

10　接　種

10.1接種準(zhǔn)備

木屑菌種主要用于瓶式栽培，可使用專業(yè)接種機(jī)接種。在日本，除了金針菇之外，大多數(shù)菌類依然使用木屑菌種，這與日本栽培規(guī)模普遍偏小有關(guān)。通常海鮮菇木屑栽培種是以塑料瓶作為容器，和常規(guī)木屑菌種制作相似。為了縮短菌種培養(yǎng)時(shí)間，在充填栽培料時(shí)瓶中間應(yīng)預(yù)留錐形孔，便于原種接種時(shí)落入預(yù)留孔內(nèi)，―四面開花‖蔓延，縮短培養(yǎng)周期。袋式栽培菌種制作時(shí)以塑料棒作為―模具‖在袋裝培養(yǎng)基中，直至接種時(shí)才拔出，以保證預(yù)留孔完整。

枝條菌種的制作參考第五講。特別要注意的是：海鮮菇比其他菌類菌絲生長(zhǎng)速度慢，木屑菌種與枝條菌種培養(yǎng)周期需要32～35天。

液體菌種接種快速，比使用木屑、枝條菌種快3倍，節(jié)省勞力，但對(duì)凈化條件要求高，有一定技術(shù)要求，適合大型海鮮菇生產(chǎn)企業(yè)。而中小型企業(yè)則使用木屑或者枝條菌種接種更安全。液體菌種制作、培養(yǎng)周期僅10天，菌齡比木屑菌種短20天，假設(shè)兩者都是接種80天后進(jìn)入出菇階段，出菇時(shí)菌齡液體菌種僅有80＋10=90（天），而固體菌種為80＋30＝110（天）。誘導(dǎo)出芽時(shí)菇蕾都是先從老菌絲開始發(fā)生，有人認(rèn)為使用枝條菌種比使用液體菌種產(chǎn)量更高。

（2）固體菌種的接種前預(yù)處理。應(yīng)注意菌種培養(yǎng)與預(yù)處理區(qū)域應(yīng)和凈化間區(qū)域緊密相連，布局在同一建筑單元內(nèi)。在菌種培養(yǎng)間內(nèi)取出木屑菌種放置在周轉(zhuǎn)筐內(nèi)，通過流水線進(jìn)入已消毒（臭氧消毒）的凈化間或在FFU下進(jìn)行菌種預(yù)處理，雙人對(duì)坐，使用75%酒精棉球擦洗外壁，打開瓶蓋，使用經(jīng)消毒的小刀挖去菌種瓶?jī)?nèi)0.5厘米厚表層老菌絲，置于具有活動(dòng)遮蓋的不銹鋼桶內(nèi)。再用75%酒精棉擦拭內(nèi)壁后，蓋回塑料蓋。預(yù)處理后的木屑菌種與下述枝條菌種處理方式相同，送到接種工位。

枝條菌種培養(yǎng)時(shí)間較長(zhǎng)，菌種包表面有沉降塵埃。中、大型企業(yè)接種前會(huì)使用2 000倍的5%新潔爾滅溶液對(duì)袋外壁進(jìn)行消毒，并捏濕棉花塞頭，隨后在搓衣板上滾動(dòng)擠壓栽培包，使栽培包松動(dòng)后再置于周轉(zhuǎn)筐內(nèi)，通過傳遞窗或者滾筒流水線進(jìn)入強(qiáng)冷間，再分配到待接栽培包周轉(zhuǎn)筐面上。

10.2接種

操作人員從強(qiáng)冷間內(nèi)將培養(yǎng)料周轉(zhuǎn)筐置于接種間滾筒流水線上，通過安裝在各工位附近的光電感應(yīng)器，將周轉(zhuǎn)筐分流至各接種工作平臺(tái)，在FFU下進(jìn)行接種。接種后，栽培筐置于滾筒上經(jīng)過塑料軟簾再流至凈化室外（圖10），人工或機(jī)械搬到袋式培養(yǎng)架上，叉車送入培養(yǎng)庫(kù)重疊培養(yǎng)（圖9）。

圖9　栽培筐從軟簾流出

圖10　站立枝條菌種接種

圖11　坐式枝條菌種接種

（1）枝條菌種接種。接種前，截掉枝條菌種包口，剝?nèi)ゴ鼉?nèi)的―過橋‖（參閱第五講）。兩人合作，在近似接種箱內(nèi)一人開塞，另一人使用經(jīng)酒精消毒的鑷子夾出枝條插入塑料栽培包內(nèi)，并撒上一些木屑菌種封面，對(duì)方再迅速蓋塞。接種成功的關(guān)鍵在于打開塑料塞、接種、再蓋上塑料塞的三個(gè)動(dòng)作一氣呵成，栽培包打開塑料塞后暴露在空氣中的時(shí)間越短越好。凈化間內(nèi)流水線接種有站立式和坐式兩種（圖10，圖11），前者操作方便，后者因?yàn)閮艋L(fēng)風(fēng)壓大，接種成功率更高。接種后置于滾輪上的栽培筐流至室外后，采用手工或機(jī)械方式置于托板或?qū)Ｓ脤蛹苌?，用鏟車運(yùn)入培養(yǎng)庫(kù)進(jìn)行重疊培養(yǎng)（下講論述）。

（2）木屑菌種接種。海鮮菇瓶式栽培多使用自動(dòng)接種機(jī)。每天提前1小時(shí)開啟凈化間設(shè)備，經(jīng)預(yù)處理的當(dāng)天使用量的菌種瓶，通過傳送帶一次性送至接種機(jī)工位。接種時(shí)，使用75%的酒精再對(duì)菌種瓶外表局部空間進(jìn)行噴霧消毒，打開塑料菌種瓶，倒插入接種機(jī)菌種瓶放置位置。栽培瓶筐從流水線進(jìn)入接種機(jī)后，接種機(jī)菌種瓶處的刀口自動(dòng)伸入瓶?jī)?nèi)作旋轉(zhuǎn)挖菌，菌種落到承接杯，翻轉(zhuǎn)，扣在栽培瓶培養(yǎng)基面上，自動(dòng)蓋上瓶蓋，壓蓋。菌種瓶?jī)?nèi)菌種接近使用完時(shí)，會(huì)自動(dòng)報(bào)警。由于海鮮菇菌絲蔓延速度慢，接種時(shí)要控制接種量，以足夠的量覆蓋整個(gè)栽培瓶口而看不到培養(yǎng)基，可防止倒吸，大幅降低污染率（圖12～14）。

圖12　木屑菌種接種凈化間

圖13　木屑菌種接種過程1

圖14　木屑菌種接種過程2

每天接種結(jié)束后要保留充足的時(shí)間做好凈化間的清潔衛(wèi)生，應(yīng)從上至下，擦洗彩鋼板墻面，使用高壓氣槍清掃干凈設(shè)備和角落，使不留任何木屑；乃至拆開回風(fēng)道面板，使用毛刷清潔回風(fēng)口。更重要的是凈化間365天24小時(shí)都得維持正壓，與室外至少要有10～15帕（Pa）的氣壓差，防止室外氣體倒流進(jìn)入凈化間，這是保持凈化間潔凈度的相當(dāng)重要的技術(shù)要求。另須在夜間自動(dòng)開啟臭氧發(fā)生機(jī)，每次1小時(shí)，使臭氧參與凈化間空氣內(nèi)循環(huán)進(jìn)行空氣消毒。（待續(xù)）