遲雙會(huì)　陳芳

【摘 要】黑虎泉屬于“泉城”濟(jì)南的“七十二名泉”之一，很多游客慕名品嘗。隨著環(huán)境污染的加劇，泉水還能飲用嗎？本實(shí)驗(yàn)利用平板菌落計(jì)數(shù)法測定了黑虎泉泉水、白石泉泉水和黑虎泉直飲水中細(xì)菌總數(shù)，為泉水的飲用提供參考依據(jù)。結(jié)果顯示，黑虎泉泉水和白石泉泉水細(xì)菌總數(shù)超過國家飲用水標(biāo)準(zhǔn)，不適合直接飲用。而黑虎泉直飲水的細(xì)菌總數(shù)符合國家飲用水標(biāo)準(zhǔn)，可以直接飲用。

【關(guān)鍵詞】黑虎泉；白石泉；細(xì)菌總數(shù)

0 引言

黑虎泉是濟(jì)南著名旅游景點(diǎn)，位于黑虎泉西路。明代晏壁在《七十二泉》詩云：“石水府色蒼蒼，深處渾如黑虎藏。半夜朔風(fēng)吹石裂，一聲清嘯月無光?！敝T泉參差錯(cuò)落不已，泉既匯成河，河復(fù)又蘊(yùn)泉，爭相輝映各得佳趣。泉群附近假山平臺，回廊曲徑，夏日綠樹蔭蔭，鳥語蟬鳴，適宜品茗觀景。附近還有瑪瑙、白石、九女、琵琶、南珍珠、任泉、溪中、苗家、胤嗣、匯波、對波、金虎諸名泉及無名泉一處組成黑虎泉群。早在金代以前，黑虎泉已聞名于世。泉水出于深凹形洞穴，通過3個(gè)石雕虎頭泉水噴出，波瀾洶洶，水聲喧喧。每年都會(huì)吸引大量游客來此游玩。

隨著越來越多游客的到來，我們發(fā)現(xiàn)有很多人直接飲用黑虎泉的泉水。雖然泉水常年恒溫18℃，看起來清澈透明，入口也甘甜。很多濟(jì)南當(dāng)?shù)厝巳ソ尤苯踊丶液取?015年，濟(jì)南市政府在黑虎泉設(shè)置了很多直飲水點(diǎn)，很多游客都會(huì)慕名品嘗一下甘甜的泉水。未污染的泉水礦物質(zhì)含量豐富，有機(jī)物含量少，但隨著環(huán)境污染的加劇，泉水中可能含有大量來自土壤、塵埃、垃圾和污水的細(xì)菌，黑虎泉的水還能直接飲用嗎？

如果泉水中細(xì)菌總數(shù)超標(biāo)，可能會(huì)引起介水傳染病[1]。根據(jù)我國飲用水標(biāo)準(zhǔn)，飲用水中細(xì)菌總數(shù)每ml不超過100個(gè)。我國現(xiàn)行的生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法GB5750—85中規(guī)定，水樣中細(xì)菌總數(shù)測定是1ml水樣在普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基中37℃經(jīng)24小時(shí)培養(yǎng)所生長的細(xì)菌菌落的總數(shù)。細(xì)菌總數(shù)是評價(jià)水質(zhì)污染程度的主要衛(wèi)生指標(biāo)。所測定的細(xì)菌總數(shù)增多說明水被生活廢棄物污染。

本文利用平板菌落計(jì)數(shù)法檢測黑虎泉泉水中細(xì)菌總數(shù)，對黑虎泉泉水、白石泉泉水和黑虎泉的直飲水的細(xì)菌總數(shù)進(jìn)行測定，為人們的飲水安全提供理論和實(shí)踐依據(jù)。

1 實(shí)驗(yàn)方法

1.1 實(shí)驗(yàn)樣品及藥品

黑虎泉泉水、白石泉泉水、黑虎泉直飲水。營養(yǎng)瓊脂

1.2實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備

高壓滅菌鍋、超凈工作臺、恒溫培養(yǎng)箱、燒杯、玻璃棒、錐形瓶、電子秤、酒精燈、石棉網(wǎng)、量筒、滴管、打火機(jī)、酒精、帶塞試管、吸量管

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 實(shí)驗(yàn)方法

采用平板涂布培養(yǎng)計(jì)數(shù)法進(jìn)行計(jì)數(shù)[2]。

1.3.2 取樣

綜合考慮市民飲用的泉水量相對多的位置、人群分布、地理環(huán)境等因素后， 按照市民取用泉水的習(xí)慣，從黑虎泉、白石泉和黑虎泉直飲水采集泉水樣品共3個(gè)。按《生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法、水樣的采集和保存》進(jìn)行水樣的采集、保存和運(yùn)送。

取樣時(shí)必須注意盡量選擇在人們經(jīng)常喝水的地方。

黑虎泉的取樣點(diǎn)選擇黑虎泉最大的取水點(diǎn)，盛于無菌取樣管內(nèi)。取樣時(shí)動(dòng)作要輕，盡量避免底泥浮起影響水質(zhì)。

黑虎泉附近的直飲水取樣，水樣不能太滿，置于取樣的無菌管內(nèi)，做好標(biāo)記。

黑虎泉群的白石泉取樣，不要采取有雜質(zhì)的水源。取完樣后應(yīng)立即進(jìn)行記錄，內(nèi)容包括樣品編號，采樣地點(diǎn)。以免混淆。運(yùn)輸過程中注意防震，以免樣品損壞而損壞樣品取樣的誤差會(huì)影響結(jié)果。

1.3.3 梯度稀釋

從10ml黑虎泉原液中取1ml，置于相應(yīng)的含有9ml無菌蒸餾水試管中得到10-1濃度的稀釋原液，再按上述方法依次做成10-2、10-3等一系列梯度稀釋液。其他樣本也按上述方法操作。

1.3.4 菌落計(jì)數(shù)

涂布培養(yǎng)后，計(jì)數(shù)每個(gè)平板上的菌落數(shù)?？捎萌庋塾^察，必要時(shí)用放大鏡檢查，以防遺漏。在記下各平板的菌落總數(shù)后，求出同稀釋度的各平板平均菌落數(shù)，計(jì)算原始樣品中每ml的菌落數(shù)，進(jìn)行報(bào)告。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析

采用黑虎泉泉水、白石泉泉水和黑虎泉直飲水三個(gè)水樣的10-3稀釋培養(yǎng)液。培養(yǎng)24h后取出，進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)。計(jì)數(shù)結(jié)果如下表1：

表1

通過上面的表格可以看出，黑虎泉泉水和白石泉泉水的細(xì)菌總數(shù)分別為113cfu/ml和123cfu/ml，對照生活用水國際GB5749-85中規(guī)定的菌落總數(shù)不超過100cfu/ml，不符合飲用水標(biāo)準(zhǔn)，不能直接飲用，但是可以經(jīng)過消毒后飲用。黑虎泉直飲水的細(xì)菌總數(shù)為82cfu/ml，小于100cfu/ml，可以直接飲用。

本實(shí)驗(yàn)選用涂布法檢驗(yàn)水中細(xì)菌總數(shù)。標(biāo)準(zhǔn)平板計(jì)數(shù)法的缺點(diǎn)是一些需氧菌在營養(yǎng)瓊脂深層不易生長，以及一些對熱敏感的細(xì)菌在用熱瓊脂傾注時(shí)受熱沖擊致死，造成菌數(shù)降低，因此選用涂布法檢驗(yàn)水中細(xì)菌總數(shù)。

由于本實(shí)驗(yàn)是一個(gè)檢測的實(shí)驗(yàn)，存在一個(gè)嚴(yán)格滅菌的過程。從采樣，到最后的分析，整個(gè)過程不僅不能讓其他雜菌污染，而且還得保證樣品中本身細(xì)菌的總數(shù)基本不損失。

梯度稀釋時(shí)分別將黑虎泉泉水、白石泉泉水和黑虎泉直飲水三個(gè)水樣培養(yǎng)24h后稀釋至10-3。根據(jù)飲用水標(biāo)準(zhǔn)，稀釋至10-3已經(jīng)足夠，因?yàn)轱嬘盟屑?xì)菌總數(shù)不超過100個(gè)/ml，也就是說稀釋至10-3后菌落數(shù)會(huì)在100個(gè)以內(nèi)。而我們菌落計(jì)數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)是30-300個(gè)之間。若所有稀釋度均不在計(jì)數(shù)區(qū)間。如均大于300，則取最高稀釋度的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告。如均小于30，則以最低稀釋度的平均菌落數(shù)乘稀釋倍數(shù)報(bào)告。如菌落數(shù)有的大于300，有的又小于30，但均不在30-300之間，則應(yīng)以最接近300或30的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告。如所有稀釋度均無菌落生長，則應(yīng)按小于1乘以最低稀釋倍數(shù)報(bào)告。

3 討論

黑虎泉直飲水符合泉水我國生活用水飲用水的細(xì)菌總數(shù)標(biāo)準(zhǔn)，可以直接飲用。但黑虎泉泉水和白石泉泉水的細(xì)菌總數(shù)超標(biāo)，不能直接飲用。但可以經(jīng)煮沸法消毒后使用。本實(shí)驗(yàn)由于試驗(yàn)因此條件的局限性以及操作技術(shù)水平的局限，可能存在一些誤差。但是對于泉水的飲用有一定的參考價(jià)值。

應(yīng)用平板計(jì)數(shù)技術(shù)測定水中細(xì)菌總數(shù)時(shí)，由于水中細(xì)菌種類繁多，它們對營養(yǎng)和其他生長條件的要求差別很大，不可能找到一種培養(yǎng)基在一種條件下，使水中所有的細(xì)菌均能生長繁殖。因此，以一定的培養(yǎng)基平板上生長出來的菌落，計(jì)算出來的水中細(xì)菌總數(shù)僅是一種近似值。水中細(xì)菌總數(shù)測定是測定水中需氧菌、兼性厭氧菌和異養(yǎng)菌的總數(shù)。水中細(xì)菌總數(shù)可作為判定被檢水樣被有機(jī)物污染程度的標(biāo)志，作為日常檢測的七項(xiàng)指標(biāo)（色度、濁度、細(xì)菌總數(shù)、大腸菌群、余氯、鐵、錳）之一的細(xì)菌總數(shù)，能非常直觀地反映水被細(xì)菌污染的程度[3]。細(xì)菌數(shù)量越多，則水中有機(jī)質(zhì)含量越大。但關(guān)于水中其他指標(biāo)的檢測因?yàn)闀r(shí)間和實(shí)驗(yàn)條件的限制我們并沒有進(jìn)行，以后有時(shí)間我們會(huì)進(jìn)行水中大腸菌群的數(shù)量的測定，水中大腸菌群數(shù)可用來判斷水源是否被糞便污染，并可間接推測水源受腸道病原菌污染的可能。這也是我們評估黑虎泉泉水是否可以安全飲用的標(biāo)準(zhǔn)之一。

【參考文獻(xiàn)】

[1]劉鳳蓮，吳惠忠，許秉忠，齊愛，李雪，盧世勇.寧夏城市飲用水微生物學(xué)指標(biāo)與介水傳染病的相關(guān)性[J].環(huán)境與健康雜志，2014，31（9）：827-828.

[2]管遠(yuǎn)志，王艾琳，李堅(jiān).醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2006：84-85.

[3]蔣增輝，王幸艷.介紹幾種新的水中細(xì)菌總數(shù)檢測方法[J].城市給排水.2005，19（2）：15-16.

[責(zé)任編輯：張濤]