李巖峰, 韓奕詩(shī), 任 桓, 陸云龍, 董欣明, 劉 樂(lè), 胡 品, 王 寧(. 解放軍總醫(yī)院第一附屬醫(yī)院口腔科 解放軍總醫(yī)院口腔醫(yī)學(xué)中心, 北京 00048;. 78086部隊(duì)50分隊(duì)衛(wèi)生所, 成都 6007; . 解放軍總醫(yī)院第一附屬醫(yī)院病理科, 北京 00048)
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山羊上頜竇及額竇黏膜厚度對(duì)比觀察
李巖峰1, 韓奕詩(shī)1, 任 桓2, 陸云龍3, 董欣明1, 劉 樂(lè)1, 胡 品1, 王 寧1
(1. 解放軍總醫(yī)院第一附屬醫(yī)院口腔科 解放軍總醫(yī)院口腔醫(yī)學(xué)中心, 北京 100048;
2. 78086部隊(duì)50分隊(duì)衛(wèi)生所, 成都 610017; 3. 解放軍總醫(yī)院第一附屬醫(yī)院病理科, 北京 100048)
[摘要]目的 探討山羊鼻竇(上頜竇及額竇)黏膜的厚度差異并分析其原因,為上頜竇提升術(shù)中涉及黏膜問(wèn)題時(shí)提供理論依據(jù)和指導(dǎo)。方法 從獲取的每塊鼻竇黏膜(上頜竇頂、上頜竇底及額竇黏膜)上切取適當(dāng)大小黏膜置于固定液中, 24 h后制成組織切片, 在帶有刻度目鏡的光學(xué)顯微鏡下觀察, 鏡下隨機(jī)選取三處讀數(shù)并記錄。結(jié)果 山羊上頜竇頂黏膜厚度為410.03±65.97 mm, 竇底黏膜為461.33±91.37 mm,額竇黏膜為216.90±46.47 mm,上頜竇頂與額竇、上頜竇底與額竇、竇頂與竇底黏膜厚度均值之間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論 上頜竇頂、底黏膜較額竇黏膜厚,上頜竇底黏膜較竇頂黏膜稍偏厚。
[關(guān)鍵詞]山羊; 上頜竇底提升; 竇黏膜; 黏膜厚度
上頜竇底提升術(shù)的提出與發(fā)展,為臨床剩余牙槽骨高度(residual bone height)不足的上頜后牙缺失病例創(chuàng)造了條件。無(wú)論側(cè)壁開(kāi)窗式上頜竇提升術(shù)或是經(jīng)牙槽嵴頂?shù)纳项M竇提升術(shù),均與上頜竇黏膜息息相關(guān),因此本實(shí)驗(yàn)針對(duì)其黏膜厚度進(jìn)行相關(guān)研究和探討。
1.1 動(dòng)物、材料及設(shè)備
18月齡山羊5只,由解放軍總醫(yī)院第一附屬醫(yī)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供,雌雄不限,體態(tài)身形大小接近,身體健康,口腔、上頜竇無(wú)異常。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)于解放軍總醫(yī)院第一附屬醫(yī)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心[SYXK(軍)2012-0013]進(jìn)行。
骨鋸(宇通,天津),剪刀、彎止血鉗、無(wú)齒鑷、手術(shù)刀片(偉榮,上海)、刻度尺(得力,寧波)、CT設(shè)備( Philips,荷蘭)、光學(xué)顯微鏡(Olympus,日本)、生理鹽水、體積分?jǐn)?shù)10%中性甲醛溶液、自制黏膜剝離器。
1.2 方法
1.2.1 實(shí)驗(yàn)前期工作 山羊頭頸部備皮后側(cè)臥位固定,采用頸動(dòng)脈空氣栓塞處死,將頭顱離斷,立即行螺旋CT掃描,CT拍攝前在雙側(cè)頰面部表面放置牙膠條作為顯影指示,掃描后即刻進(jìn)行三維重建和分析(圖1)。結(jié)合影像在羊頜面部畫(huà)截骨線,鋸開(kāi)上頜骨,每側(cè)上頜竇均分為頂、底兩部分(圖2),最終每只山羊鼻竇均可分為左右兩個(gè)上頜竇頂、左右兩個(gè)上頜竇底、左右兩個(gè)額竇。
1.2.2 實(shí)驗(yàn)過(guò)程 按文獻(xiàn)[1]剝離鼻竇黏膜(左、右),每只山羊均切取5 mm×10 mm黏膜置于體積分?jǐn)?shù)10%中性甲醛標(biāo)本瓶中,固定24 h后制成組織切片。選擇帶有刻度目鏡的光學(xué)顯微鏡,鏡下觀測(cè)黏膜組織學(xué)特征,并選取黏膜層次分明部分作為測(cè)量區(qū), 調(diào)整黏膜與目鏡刻度垂直后隨機(jī)選取三個(gè)位點(diǎn)進(jìn)行讀數(shù)并記錄,取其平均值作為測(cè)量值。
1.2.3 數(shù)據(jù)及統(tǒng)計(jì)分析 應(yīng)用SPSS17.0軟件包軟件,數(shù)據(jù)以x-± s表示, 選擇配對(duì)t檢驗(yàn), 所有P值均為雙邊, P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
圖1 山羊顱骨三維重建
圖2 山羊上頜竇的頂、底
2.1 鼻竇黏膜厚度
山羊上頜竇頂、上頜竇底、額竇黏膜厚度間均有顯著差異(P<0.01, P<0.05)(表1)。
2.2 鼻竇黏膜組織學(xué)觀察
鏡下可見(jiàn)(圖3、圖4),鼻竇黏膜分為假?gòu)?fù)層柱狀纖毛上皮層、固有層、粘膜下層。假?gòu)?fù)層纖
圖3 山羊上頜竇黏膜(HE×100)
圖4 山羊額竇黏膜(HE×100)
根據(jù)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇原則和動(dòng)物生物學(xué)特性,山羊上頜竇位置、大小形態(tài)和骨結(jié)構(gòu)與人類(lèi)相似,外側(cè)壁骨板較薄,外科鉆鉆孔開(kāi)窗以及黏膜的剝離和提升都較容易[2,3]; 尤其山羊竇腔黏膜厚度、組織毛柱狀上皮由纖毛細(xì)胞、杯狀細(xì)胞以及少量基細(xì)胞組成; 固有層由位于上皮深處的基底細(xì)胞組成,具有一定的增值和分化能力; 黏膜下層為疏松結(jié)締組織,包含有血管、淋巴管、神經(jīng)以及部分腺體。可見(jiàn)上頜竇黏膜較額竇黏膜偏厚。
表1 山羊黏膜厚度測(cè)定 mm
結(jié)構(gòu)也近似于人類(lèi)[4,5]。因此,本實(shí)驗(yàn)選擇山羊作為動(dòng)物模型。
臨床上側(cè)壁開(kāi)窗式上頜竇底提升術(shù)與沖頂式上頜竇底提升術(shù)均需剝離和抬高上頜竇底黏膜,故本實(shí)驗(yàn)首先考慮將上頜竇底黏膜納入實(shí)驗(yàn)對(duì)象中; 側(cè)壁開(kāi)窗術(shù)式需對(duì)上頜竇前外側(cè)壁黏膜進(jìn)行剝離,為將上頜竇其它位置黏膜與竇底黏膜進(jìn)行比對(duì),本實(shí)驗(yàn)亦將距離竇底相對(duì)較遠(yuǎn)而易區(qū)分清楚的竇頂黏膜納入。選擇額竇黏膜與上頜竇黏膜進(jìn)行對(duì)比研究,探討上頜竇黏膜生物學(xué)特性并分析其差異形成的可能因素,為上頜竇提升術(shù)提供直接參考。
為保證實(shí)驗(yàn)不受其他因素的干擾,山羊頭部離斷后立即進(jìn)行頭顱CT掃描和后續(xù)實(shí)驗(yàn),頜骨鋸開(kāi)后竇腔暴露于空氣中,為防止黏膜干燥引起性狀改變,立即開(kāi)始剝離黏膜,并將暫未開(kāi)始行黏膜剝離的竇腔浸泡于室溫生理鹽水中,黏膜剝離過(guò)程中使用生理鹽水不斷潤(rùn)濕黏膜及竇腔。為降低實(shí)驗(yàn)結(jié)果的偶然誤差、保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果和最終數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性,竇黏膜的剝離由1人完成。制作黏膜組織切片時(shí)切片機(jī)垂直于黏膜,制作完成后未達(dá)標(biāo)準(zhǔn)者(本實(shí)驗(yàn)出現(xiàn)5例)重新制作。
在剝離和切取上頜竇黏膜時(shí),不同位置黏膜之間的顏色、質(zhì)地、通透性以及剝離者操作感受等均有不同: 黏膜透明、纖薄,剝離時(shí)易發(fā)生卷曲、破裂,黏膜發(fā)白、厚重時(shí)剝離相對(duì)容易且完整。額竇黏膜厚度較上頜竇偏薄已在本實(shí)驗(yàn)中得到證實(shí),但越薄的黏膜是否在壓迫和撕拉時(shí)越容易破裂,具體將在后續(xù)實(shí)驗(yàn)中進(jìn)行測(cè)量分析和討論。
組織固定導(dǎo)致細(xì)胞收縮, 在黏膜厚度測(cè)量時(shí)造成誤差。為使固定組織的收縮率盡量降低,本實(shí)驗(yàn)參考文獻(xiàn)[6,7],選用體積分?jǐn)?shù)10%中性甲醛溶液(即含磷酸鹽的緩沖液)作為黏膜固定液。最終測(cè)得山羊上頜竇黏膜平均厚度,與以往文獻(xiàn)數(shù)據(jù)差異不大[4]。相對(duì)黏膜本身厚度而言,黏膜厚度值受標(biāo)本制作過(guò)程中切片方向垂直與否的影響更值得考慮。固定液的選擇對(duì)竇黏膜厚度的影響程度還有待進(jìn)一步探討。
實(shí)驗(yàn)前行CT掃描和重建分析,旨在了解上頜竇和額竇的大小、上頜竇外側(cè)壁骨板厚度等,確定雙側(cè)上頜竇與參照物(牙膠條)間的位置關(guān)系指導(dǎo)截骨; 并在出現(xiàn)上頜竇分嵴、黏膜轉(zhuǎn)折和變移時(shí),在黏膜剝離等操作前給予提示和指導(dǎo)。CT測(cè)量黏膜厚度,精確值較光學(xué)顯微鏡低。2011年Janner 等[8]曾運(yùn)用CBCT在上頜竇不同位置測(cè)量黏膜厚度,黏膜厚度個(gè)體差異較大。故本實(shí)驗(yàn)僅將CT測(cè)量結(jié)果作為組織學(xué)測(cè)量黏膜厚度值的輔助參考。
山羊上頜竇頂、上頜竇底、額竇黏膜厚度均值大小不同,從解剖方面分析: ①上頜竇與額竇黏膜厚度差別的可能原因是竇腔開(kāi)口位置不同[9]或神經(jīng)支配不同。②上頜竇底與上頜竇頂、額竇黏膜厚度差別可能原因: 咀嚼力傳導(dǎo)致不同位置竇黏膜受刺激大小不同。以上問(wèn)題有待進(jìn)一步驗(yàn)證。山羊鼻竇不同位置黏膜厚度均值的兩兩比較之間均有差異。其中上頜竇頂、底間差異雖有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,但不排除實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)的隨機(jī)誤差導(dǎo)致差異的擴(kuò)大,該問(wèn)題有待于今后增加樣本量后進(jìn)一步論證。
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Comparative Study on Mucosal Thickness of Maxillary Sinus and Frontal Sinus in Goats
LI Yan-feng1, HAN Yi-shi1, REN Huan2, LU Yun-long3, DONG Xin-ming1, LIU Le1, HU Pin1, WANG Ning1
(1. Department of Stomatology, The First Hospital Affiliated to the PLA General Hospital, Beijing100048, China; 2. Clinic, Squadron 50 of Unit 78086, Chengdu 610017, China 3. Department of Pathology, The First Hospital Affiliated to The PLA General Hospital, Beijing 100048, China)
[Abstract]Objective To explore the differences of mucosal thickness in goat paranasal sinus, and analyse the underlying reasons. The discussion can provide theoretical basis and guidance for issues related to mucosa in the practice of maxillary sinus floor augmentation. Methods The mucosa was cut into desired size from every sinus mucosa and fixed in formalin to get the tissue specimens, and observed under optical microscope with scaled eyepiece. Randomly selected three fields under the microscope from the samples and then measured and recorded. Paired t-test was used to determine the difference between the parameters, P<0.05 was regarded as statistically significant. Results Goat maxillary sinus mucosal thickness of the top was 410.03±65.97 mm, the bottom was 461.33±91.37 mm, the frontal sinus mucosa was 216.90±46.47 mm. The mean differences of mucosal thickness between the top of the maxillary sinus and the frontal sinus, the bottom and the frontal, the top and the bottom were statistically significant (P<0.05). Conclusions The top and bottom mucosal thickness of maxillary sinus was thicker than the frontal sinus mucosa, and the bottom mucosal thickness was slightly thicker than the top.
[Key words]Goat; Maxillary sinus floor elevation; Sinus mucosa; Mucosal thickness
[中圖分類(lèi)號(hào)]R782.05 Q95-33
[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A
[文章編號(hào)]1674-5817(2016)03-0200-04
doi:10.3969/j.issn.1674-5817.2016.03.008
[收稿日期]2015-08-31
[基金項(xiàng)目]解放軍總醫(yī)院臨床扶植基金(2014FC-SXYY-1003);首都衛(wèi)生發(fā)展科研專(zhuān)項(xiàng)(首發(fā)2014-4-5022)
[作者簡(jiǎn)介]李巖峰(1975-), 男, 博士, 副主任醫(yī)師, 副教授。E-mail: m.god@yeah.net共同第一作者: 韓奕詩(shī)(1989-), 碩士, 住院醫(yī)師。E-mail: hanyishi@yeah.net
[通訊作者]王 寧, E-mail: 22247490@qq.com共同通訊作者: 任桓, E-mail: 814658302@qq.com
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與比較醫(yī)學(xué)2016年3期