寧　寧，張　杰，王社教，尉春艷，陳　慶，何長武

(1.西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院核醫(yī)學(xué)科，陜西 西安 710004；2. 西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科，陜西 西安 710004)

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月經(jīng)規(guī)律女性抗繆勒氏管激素與基礎(chǔ)卵泡刺激素關(guān)系的研究

寧寧1，張杰1，王社教1，尉春艷2，陳慶2，何長武1

(1.西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院核醫(yī)學(xué)科，陜西 西安 710004；2. 西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科，陜西 西安 710004)

[摘要]目的探討月經(jīng)規(guī)律女性抗繆勒氏管激素(AMH)隨年齡變化規(guī)律及其與基礎(chǔ)卵泡刺激素(bFSH)之間的關(guān)系。方法以89例月經(jīng)規(guī)律女性為研究對象，按年齡分為5組(20～24歲組，25～29歲組，30～34歲組，35～39歲組，40～44歲組)，應(yīng)用全自動電化學(xué)發(fā)光法測定血清中AMH及bFSH水平，分析AMH及bFSH隨年齡的變化規(guī)律及其相互間的關(guān)系。結(jié)果AMH水平與年齡呈負相關(guān)(r=-0.847，P<0.001)；bFSH與年齡呈正相關(guān)(r=0.296，P=0.005)；除第2、3組間AMH無明顯差異外(P=0.091)，其余各組間均有顯著性差異(P1:2<0.001，P1:3<0.001，P1:4<0.001，P1:5<0.001，P2:4<0.001，P2:5<0.001，P3:4=0.003，P3:5<0.001，P4:5<0.001)；血清AMH水平與bFSH呈負相關(guān)(r=-0.406，P<0.05)。結(jié)論月經(jīng)規(guī)律女性AMH水平隨年齡增加逐漸下降，其與年齡相關(guān)性優(yōu)于bFSH，且AMH水平可預(yù)測bFSH水平，在評價卵巢功能中起重要作用。

[關(guān)鍵詞]抗繆勒氏管激素；基礎(chǔ)卵泡刺激素；年齡；月經(jīng)規(guī)律

抗繆勒氏管激素(anti-Mullerian hormone，AMH)主要由卵巢顆粒細胞產(chǎn)生，其水平反映了卵巢中儲備卵泡的數(shù)量，隨卵巢功能的衰退而下降。從青春期開始，血清AMH水平隨年齡增長逐漸降低，絕經(jīng)前一直維持在可檢測的水平。不同于其他性激素受到下丘腦-垂體-性腺軸反饋機制調(diào)控，AMH不受月經(jīng)周期的影響[1]；并且與竇狀卵泡數(shù)目的相關(guān)性優(yōu)于常規(guī)評價指標(biāo)，是目前國際上預(yù)測卵巢反應(yīng)、評估卵巢儲備功能較理想的生物標(biāo)志物，但該項檢查在我國尚未廣泛應(yīng)用?；A(chǔ)卵泡刺激素(baseline follicle stimulating hormone，bFSH)多年來被用于評價卵巢儲備功能，預(yù)測卵巢反應(yīng)性及體外受精能否成功。但臨床應(yīng)用中需在月經(jīng)周期第2～3天抽血檢查，且其水平受到諸如月經(jīng)周期、口服避孕藥等影響。本研究應(yīng)用全自動電化學(xué)發(fā)光法檢測月經(jīng)周期規(guī)律的健康育齡期女性血清中AMH及bFSH水平，通過分析不同年齡段月經(jīng)規(guī)律女性AMH與bFSH水平，探討AMH、bFSH隨年齡變化規(guī)律以及AMH與bFSH之間的關(guān)系，以期為臨床判斷bFSH水平提供參考。

1對象與方法

1.1研究對象

研究對象來源于2015年7至9月于西安交通大學(xué)第二附屬醫(yī)院體檢的健康成年女性，入組對象均自愿參加本研究并簽署知情同意書。納入標(biāo)準(zhǔn)：近3個月月經(jīng)周期正常；3月內(nèi)月經(jīng)周期第3天性激素檢測符合卵泡期正常值；未孕；3個月內(nèi)無流產(chǎn)史；無內(nèi)分泌疾病史；無高脂血癥史；無心血管疾病史；無吸煙飲酒史；半年內(nèi)無服用避孕藥史。分組：根據(jù)納排標(biāo)準(zhǔn)共89例入組，年齡范圍21～44歲，平均年齡31.72±7.06歲。按年齡將受試對象分為5個年齡組：20～24歲(19例)，25～29歲(20例)，30～34歲(16例)，35～39歲(17例)，40～44歲(17例)。

1.2研究方法

1.2.1血樣采集

月經(jīng)周期第3天，清晨空腹，取肘靜脈血標(biāo)本4mL，3 500r/min離心10min，取血清待測。

1.2.2儀器與檢測方法

應(yīng)用羅氏全自動電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀(Cobas e 601型)檢測血清中AMH及bFSH水平。正常參考值：AMH：20～24歲1.66～9.49 ng/mL、25～29歲1.18～9.16 ng/mL、30～34歲0.67～7.55 ng/mL、35～39歲0.78～5.24 ng/mL、40～44歲0.09～2.96 ng/mL、45～50歲0.05～2.06 ng/mL；FSH：卵泡期3.50～12.50 mIU/mL。

1.3統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件，應(yīng)用Pearson相關(guān)性分析研究AMH及bFSH隨年齡的變化規(guī)律，以及AMH與bFSH之間的相關(guān)性；應(yīng)用單因素方差分析及LSD檢驗比較不同年齡段AMH及bFSH的水平，以P<0.05認(rèn)為有顯著性意義。

2結(jié)果

2.1抗繆勒氏管激素及基礎(chǔ)卵泡刺激素與年齡的關(guān)系

2.1.1抗繆勒氏管激素及基礎(chǔ)卵泡刺激素與年齡的相關(guān)性

從圖1可見，AMH水平與年齡呈負相關(guān)，而bFSH水平與年齡呈正相關(guān)。隨著年齡增長，血清AMH水平逐漸下降，且AMH下降幅度較為明顯，其與年齡的相關(guān)系數(shù)r=-0.847，P<0.001；bFSH水平則隨年齡增長而上升，相關(guān)系數(shù)r= 0.296，P=0.005，均具有統(tǒng)計學(xué)意義，AMH、bFSH與年齡的回歸方程見圖1。

注：r為相關(guān)系數(shù)，實線為線性回歸線，虛線為95%預(yù)測區(qū)間。

圖1AMH及bFSH與年齡的相關(guān)性

Fig.1Correlation of age and with AMH and bFSH

2.1.2不同年齡組間抗繆勒氏管激素及基礎(chǔ)卵泡刺激素水平比較

在不同年齡段健康女性中，除第2、3組間AMH無明顯差異外(P=0.091)，其余各組間均有顯著性差異(P1:2<0.001，P1:3<0.001，P1:4<0.001，P1:5<0.001，P2:4<0.001，P2:5<0.001，P3:4=0.003，P3:5<0.001，P4:5<0.001)，且隨年齡增長AMH呈降低趨勢；第5組bFSH測值水平較第1組顯著增高(P=0.002)，其余各組間無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)，見表1和圖2。

注：*為P<0.05；#為與其余各組比較均P<0.05。

注：*P<0.05#；與其余各組比較均P<0.05。

2.2抗繆勒氏管激素及基礎(chǔ)卵泡刺激素水平的相關(guān)性

采用線性回歸模型發(fā)現(xiàn)，AMH與bFSH呈顯著負相關(guān)(r=-0.406，P<0.001)，其相互關(guān)系可描述為bFSH=-0.43×AMH+8.86，見圖3。

注：r為相關(guān)系數(shù)，實線為線性回歸線，虛線為95%可信區(qū)間。

圖3AMH與bFSH的相關(guān)性

Fig.3 Correlation between AMH and bFSH

3討論

本研究表明，在月經(jīng)規(guī)律的育齡期婦女中，血清AMH水平與bFSH水平均存在隨齡變化趨勢，且二者之間顯著相關(guān)。這兩個指標(biāo)均可用于反映卵巢的儲備功能，但AMH與年齡相關(guān)性優(yōu)于bFSH。由于bFSH受到月經(jīng)周期限制及口服激素藥物影響，臨床上或可利用AMH水平判斷女性bFSH水平，為進一步預(yù)測促排卵治療中的卵巢反應(yīng)性提供有價值的信息。

3.1激素水平檢測方法的選擇

既往研究中，AMH的檢測主要依靠ELISA法及放射性免疫檢測法，這兩種方法操作較為復(fù)雜，需要諸多手動步驟，難以在臨床上廣泛應(yīng)用[2]。本研究應(yīng)用的是我國首個AMH全自動電化學(xué)發(fā)光臨床用檢測試劑盒，準(zhǔn)確度更高，結(jié)果更穩(wěn)定，與臨床判斷具有高度一致性。最新研究顯示，該方法檢測比常規(guī)ELISA檢測精密度更優(yōu)(CV≤2.5%)，避免了人手動加樣造成的誤差，在不同檢測標(biāo)本、溫度、儲藏時間條件下結(jié)果均保持穩(wěn)定，檢測結(jié)果更為可靠，可保證檢測的準(zhǔn)確性、高效性和可重復(fù)性[3]。本研究中的bFSH水平同樣采用全自動電化學(xué)發(fā)光法檢測，保證了各激素水平檢測原理和操作的一致性，盡可能減小實驗方法帶來的誤差。

3.2抗繆勒氏管激素及基礎(chǔ)卵泡刺激素水平與年齡的關(guān)系

本研究顯示，AMH水平隨年齡增長逐漸下降，已有很多大樣本橫斷面研究證實了這一趨勢[4]。隨著年齡的增長，卵泡數(shù)量及質(zhì)量下降，女性的生育能力逐漸降低。與其他性激素相比，AMH水平下降的幅度最大。由于AMH僅由生長卵泡的顆粒細胞合成分泌，血清中AMH水平與竇狀卵泡的數(shù)量高度相關(guān)，且對于原始卵泡的耗竭有著重要的調(diào)控作用[2]；由于AMH不參與下丘腦-垂體-性腺軸的反饋機制，在自然月經(jīng)周期各階段保持相對穩(wěn)定[1]，并且不同于FSH，長期口服激素類避孕藥對血清AMH水平并無明顯影響[5]。因此，AMH能夠真實反映卵巢中生長卵泡數(shù)量，在評判卵巢儲備功能隨齡變化方面具有更高的敏感性。本研究AMH與年齡的關(guān)系為y=-0.25x+11.59，預(yù)示著年齡每增長1歲，AMH降低約0.25ng/mL，其與最新1 590例20～55歲中國女性的大規(guī)模多中心研究結(jié)果近似[5]，提示了本研究結(jié)果的可靠性和一致性。既往研究表明，女性的生育力自32～37歲開始進入迅速下降階段[6]。在我們的分組研究中也發(fā)現(xiàn)，AMH水平在25～35歲相對保持穩(wěn)定，而超過35歲以后明顯下降，于圍絕經(jīng)期前降至極低水平。這可能是因為當(dāng)原始卵泡開始減少時，生長卵泡數(shù)量并不會立即下降，AMH水平的下降并不明顯，而隨著原始卵泡逐漸耗竭，其募集不足以保整生長卵泡的數(shù)量時，AMH即開始顯著下降[2]。

月經(jīng)周期前3天測得的bFSH是應(yīng)用較為廣泛的卵巢儲備功能預(yù)測指標(biāo)[7]。既往研究中已證實bFSH隨年齡增長而升高[8]。本研究中，我們同樣觀察到血清bFSH水平與年齡之間的正相關(guān)性，其與年齡的相關(guān)公式為y=0.09x+4.39，意味著年齡每增長1歲，bFSH水平升高約0.09IU/L，這一結(jié)果接近于Cui等[9]對1896例20-47歲中國女性bFSH水平與年齡關(guān)系的研究結(jié)果(y=0.106x+3.885)。但bFSH與年齡相關(guān)性較AMH低，并且在25～39歲之間的差異并不顯著。因FSH在卵泡早期受卵泡顆粒細胞分泌的雌激素與抑制素B的負調(diào)控，隨著年齡增長，卵巢剩余卵泡數(shù)目減少，雌激素與抑制素B水平下降，二者對垂體的負反饋作用減弱，bFSH水平才得以升高。因此bFSH僅能夠間接反映卵泡數(shù)量及卵巢儲備功能，其隨年齡的變化并不如AMH敏感。進一步研究顯示，血清bFSH水平在卵巢功能降低達到一定程度才會出現(xiàn)明顯升高，提示bFSH可能無法早期預(yù)測卵巢功能的降低，對于圍絕經(jīng)期前女性卵巢功能的預(yù)測價值有限。

3.3抗繆勒氏管激素與基礎(chǔ)卵泡刺激素水平之間的關(guān)系

本研究顯示，血清AMH水平與bFSH水平呈負相關(guān)，這一相關(guān)性在既往諸多大樣本研究中已得到了證實[9]。AMH水平降低預(yù)示著卵泡數(shù)量的減少，此時雌激素與抑制素B水平逐漸下降，可負反饋上調(diào)FSH水平。新近研究發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)SH也可能對AMH具有直接影響，應(yīng)用促性腺激素釋放激素類似物的健康女性，早期(<7天)出現(xiàn)FSH水平升高和AMH水平下降[10]。AMH與FSH之間的這一相關(guān)性有一定的臨床意義，既往bFSH被用于預(yù)測女性促排卵反應(yīng)已較為成熟，然而由于bFSH受到月經(jīng)周期的限制及口服激素藥物等因素的影響，其水平的檢測有諸多限制。而AMH在月經(jīng)周期中相對穩(wěn)定，即使不同月經(jīng)周期內(nèi)測得的AMH值和bFSH值同樣具有顯著負相關(guān)性。因此，臨床上可考慮利用月經(jīng)周期任意時期AMH水平來預(yù)測bFSH水平。在本研究中，二者之間的回歸方程bFSH=-0.43×AMH+8.86具有統(tǒng)計學(xué)意義，或可為進一步預(yù)測促排卵治療中的卵巢反應(yīng)提供有價值的信息。

相比bFSH，AMH與年齡相關(guān)性更高，隨年齡增長，其水平下降幅度更大，能夠早期反映卵巢功能隨年齡的變化規(guī)律，是目前評價卵巢功能敏感性較高的血清學(xué)標(biāo)志物。但其在預(yù)測卵巢反應(yīng)性、受精卵結(jié)局等方面的作用是否優(yōu)于bFSH仍有待進一步研究。而明確AMH與bFSH之間的關(guān)系，將對我們的臨床工作具有重要意義。

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[專業(yè)責(zé)任編輯：呂淑蘭]

Correlation of anti-Mullerian hormone and baseline follicle-stimulating hormone levels in women with regular menstruation

NING Ning1, ZHANG Jie1, WANG She-jiao1, WEI Chun-yan2, CHEN Qing2, HE Chang-wu1

(1.Department of Nuclear Medicine; 2. Department of Obstetrics and Gynecology,Second Affiliated Hospital of Xi’an Jiaotong University, Shaanxi Xi’an 710004, China)

[Key words]anti-Mullerian hormone (AMH); baseline follicle stimulating hormone (bFSH); age; regular menstruation

[Abstract]Objective To explore the change of anti-Mullerian hormone (AMH) with age increasing and the relationship between AMH and baseline follicle stimulating hormone (bFSH) in women with regular menstruation. Methods Eighty-nine women with regular menstruation were selected as research objects, and they were divided into 5 groups according to age (group 1: 20-24 years old, group 2:25-29 years old, group 3:30-34 years, group 4:35-39 years old, group 5:40-44 years old). Serum AMH and bFSH levels were measured by totally automatic electrochemical luminescence analyzer. The change rule of AMH and bFSH with age increasing as well as their correlation was analyzed. Results The level of AMH was negatively correlated with age (r=-0.847,P<0.001), while bFSH was positively correlated with age (r=0.296,P=0.005). Except for group 2 and group 3 (P=0.091), there was significant difference among other groups in AMH (allP<0.001). But serum AMH level was negatively correlated with bFSH (r=-0.406,P<0.05). Conclusion The level of AMH in women with regular menstruation decreases gradually with age increasing. The correlation of AMH with age is better than that of bFSH. AMH level could predict the level of bFSH, which plays an important role in the evaluation of ovarian function.

[收稿日期]2016-02-18

[基金項目]國家自然科學(xué)基金資助項目(No.31201118)

[作者簡介]寧寧(1980-)，女，主治醫(yī)師，碩士，主要從事內(nèi)分泌與生殖健康研究。

[通信作者]王社教，主任醫(yī)師。

doi:10.3969/j.issn.1673-5293.2016.05.026

[中圖分類號]R711.5

[文獻標(biāo)識碼]A

[文章編號]1673-5293(2016)05-0626-03