何　偉,齊東江,徐阿曼,2,袁　笑,陸　震

(1.安徽醫(yī)科大學(xué)第四附屬醫(yī)院普外科，安徽 合肥　230032；2.安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院胃腸外科一病區(qū),安徽 合肥　230022)

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奧美拉唑促小鼠胃癌發(fā)生的機制研究

何偉1,齊東江1,徐阿曼1,2,袁笑1,陸震1

(1.安徽醫(yī)科大學(xué)第四附屬醫(yī)院普外科，安徽 合肥230032；2.安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院胃腸外科一病區(qū),安徽 合肥230022)

摘要：目的研究奧美拉唑(omeprazole,ome)是否會增加小鼠胃癌的發(fā)病率并探討其可能存在的機制。方法實驗分為單純對照組、ome低劑量組(6 mg·kg-1)、ome高劑量組(30 mg·kg-1)、甲基硝基亞硝基胍(N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine,MNNG)組、MNNG+ome低劑量組、MNNG+ome高劑量組。 MNNG加入飲用水中(100 mg·L-1)小鼠自由飲用。每組7只小鼠，常規(guī)飼養(yǎng)24周后處死小鼠收集標本并計算小鼠脾質(zhì)量指數(shù)，HE染色觀察小鼠胃病理形態(tài)學(xué)改變，ELISA法檢測小鼠血清及脾臟中酸性磷酸酶(acid phosphatase,ACP)、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(N-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAG)含量; Western Blotting檢測小鼠胃p21、p53、mTOR表達。結(jié)果ome組與對照組相比及MNNG組與ome+組相比，小鼠脾質(zhì)量指數(shù)、血清及脾臟中溶酶體酶活性明顯下降；與MNNG組相比ome+組小鼠胃癌發(fā)生率明顯增加，尤其是MNNG+ome高劑量組，兩者差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05); 和對照組相比，實驗組p53表達增加，p21表達減少，mTOR表達減少，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論ome可以促進胃癌發(fā)生，其機制可能是和抑制小鼠體內(nèi)溶酶體及其水解酶的活性，從而降低小鼠免疫功能有關(guān)。

關(guān)鍵詞：胃腫瘤；奧美拉唑；溶酶體；酸性磷酸酶；印跡法, 蛋白質(zhì)；小鼠, 基因敲除

胃癌是人類最常見的消化道惡性腫瘤之一，每年胃癌死亡率約占癌癥相關(guān)死亡的10%，僅次于肺癌[1]。我國一直是胃癌高發(fā)地區(qū)，其發(fā)病率在我國腫瘤中居第二位，死亡率僅次于肺癌和肝癌[2]。20世紀90年代(1994年)世界衛(wèi)生組織/國際癌癥研究機構(gòu)(WHO/IARC)將幽門螺桿菌(Helicobacter pylori，Hp)定為Ⅰ類致癌原，隨后根除Hp的藥物大量使用于臨床，尤其是以ome為代表性藥物的質(zhì)子泵抑制劑(proton pump inhibitors，PPIs)。

PPIs是一種非常有效的藥物，其作用機制是阻斷胃壁細胞分泌管上H+/K+-ATP酶的活性從而阻斷任何刺激引起的胃酸分泌，但會引起胃壁細胞增生、腺囊腫、高胃泌素血癥及胃底腺息肉等不良反應(yīng)。對于長期使用PPIs是否會增加胃癌發(fā)病率仍缺乏充分的實驗室證據(jù)及臨床病例支持。本研究通過不同劑量ome長期給小鼠灌胃及ome與甲基硝基亞硝基胍(MNNG)合用時對小鼠胃黏膜的影響，并觀察ome是否會增加小鼠胃癌發(fā)病率并對其機制進行探索，從而為臨床合理用藥提供理論依據(jù)。

1實驗動物與試劑

清潔級KM小鼠，雄性，體質(zhì)量24～26 g，共42只，由安徽醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供。奧美拉唑腸溶片購自山東新時代藥業(yè)有限公司，批號：009131003。MNNG購自日本TCI公司，于4 ℃冰箱保存。N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA檢測試劑盒、酸性磷酸酶(ACP)ELISA檢測試劑盒購自百奧萊博；日立7020全自動生化分析儀；SpectraMax 190酶標儀；JEDR801D 形態(tài)學(xué)圖像分析系統(tǒng)Version6.0；NOVA型切片機；美國Bio-Rad電泳儀。

2方法

2.1胃癌動物模型建立與分組小鼠飼養(yǎng)于安徽醫(yī)科大學(xué)藥理教研室動物中心，聚丙烯籠內(nèi)標準條件下飼養(yǎng)，溫度維持在24 ℃，自動進食飲水。所有動物隨機分為對照組、ome低劑量組、ome高劑量組、MNNG組、MNNG+ome低劑量組(ome低+)、MNNG+ome高劑量組(ome高+)六組，每組7只。后三組飲用水中加入MNNG 100 mg·L-1，小鼠自由飲用。ome、ome低+組及ome高+組小鼠每天給予ome灌胃，低劑量為(6 mg·kg-1,按體質(zhì)量60 kg成人每日服用40 mg ome為標準，按照小鼠與人體藥物劑量換算公式計算)、高劑量為30 mg·kg-1。動物常規(guī)飼養(yǎng)，每周稱量體質(zhì)量一次，24周后處死小鼠，收取標本，處死前小鼠禁食24 h。

2.2小鼠脾質(zhì)量指數(shù)測定小鼠處死前稱量小鼠體質(zhì)量。脫頸椎處死后剖腹迅速取出小鼠脾臟，分析天平稱重。計算脾質(zhì)量指數(shù)，即脾質(zhì)量指數(shù)=脾臟質(zhì)量(mg)/體質(zhì)量(g)。

2.3小鼠胃組織病理形態(tài)學(xué)觀察用2.5%戊巴比妥鈉(2 mL·kg-1)腹腔注射麻醉動物后取血。脫頸椎處死小鼠后迅速打開小鼠腹腔，取出胃組織，沿胃大彎側(cè)切開，0.9%NaCl清洗三次并把標本固定，肉眼觀察胃黏膜大體形態(tài)變化。每只小鼠于胃底、胃體及胃竇各取兩塊組織固定于10%中性甲醛溶液，固定24 h后，組織脫水、浸蠟、包埋、切片，行行蘇木精-伊紅(HE)染色，光電下觀察胃組織病理形態(tài)學(xué)改變。胃黏膜病理變化由病理科醫(yī)師雙盲讀片。

2.4小鼠血清及組織中ACP及NAG含量測定采用ELISA法測定血清及組織中ACP和NAG含量。實驗步驟嚴格按照操作說明書操作。并在450 nm處測定吸光度值。

2.5蛋白質(zhì)印跡法(Western Blotting)隨機選取每組小鼠5只，將蛋白從小鼠前胃組織中提取，BCA法定量蛋白(BCA蛋白檢測試劑盒購自中國碧云天)，SDS-PAGE凝膠電泳分離蛋白，電泳后將蛋白轉(zhuǎn)移至聚偏氟乙烯(PVDF)膜上，使用含5%脫脂奶的0.3%吐溫20Tris緩沖鹽溶液(TBST)封閉1 h，分別用兔抗小鼠p21抗體(購自英國Abcam公司)、兔抗小鼠p53抗體、兔抗小鼠mTOR抗體(購自美國Affinity Biosciences公司)孵育過夜，TBST洗三次后使用羊抗兔IgG抗體(購自美國Affinity Biosciences公司)孵育2 h，增強化學(xué)發(fā)光(Enhanced Chemiluminescence,ECL)法觀察蛋白表達水平，使用ImageJ軟件分析結(jié)果，計算相對灰度值。

3結(jié)果

3.1小鼠一般情況MNNG組與ome低+和ome高+比較小鼠明顯不活潑，毛發(fā)光澤度較差，食量減少，但小鼠平均體質(zhì)量較后兩組高，這可能和ome可以改善MNNG對小鼠的消化道癥狀相關(guān)。ome組和對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義。

3.2ome對小鼠脾質(zhì)量指數(shù)的影響各組小鼠脾質(zhì)量指數(shù)見表1。長期使用ome均可導(dǎo)致小鼠脾質(zhì)量指數(shù)下降。與對照組相比，ome低劑量組小鼠脾質(zhì)量指數(shù)下降，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義，ome高劑量組小鼠脾質(zhì)量指數(shù)下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。與MNNG組相比，ome+組小鼠脾質(zhì)量指數(shù)下降，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),見表1。

表1　各組小鼠脾質(zhì)量指數(shù)±s

注：與對照組相比，aP<0.05；與MNNG組相比,bP<0.01。

3.3小鼠胃組織病理學(xué)觀察

3.3.1大體觀察對照組小鼠胃黏膜光滑、腺胃黏膜皺襞明顯，肉眼觀無潰瘍及隆起型病灶。ome組肉眼觀察小鼠前胃無明顯改變，腺胃黏膜皺襞變淺。MNNG組與ome+組前胃黏膜表面可見大小不等白色突起物，呈乳頭狀突向胃腔，部分可見潰瘍型病灶；小鼠腺胃黏膜皺襞變淺，有的甚至消失，見圖1。

3.3.2鏡下觀察對照組小鼠前胃黏膜呈現(xiàn)正常組織學(xué)形態(tài)，黏膜及黏膜下層無炎性細胞浸潤，各層組織結(jié)構(gòu)明顯。MNNG組小鼠前胃呈乳頭狀增生伴角化過度、角化不全，部分鏡下可見癌細胞，小鼠腺胃基本正常。與MNNG組相比ome+組小鼠前胃癌變率增高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(見表2)，并且癌組織向深肌層浸潤。小鼠腺胃鏡下可見黏膜及黏膜下層可見炎細胞浸潤，可見腸化及腺體異常增生，少數(shù)呈現(xiàn)腺癌(見圖2)。

3.4ome對小鼠血清中ACP及NAG含量影響ome組給藥24周后小鼠血清中ACP及NAG含量均減少。與對照組相比，ome低劑量組ACP及NAG含量均下降，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義，ome高劑量組與對照組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；與MNNG組相比，ome+組均可以明顯減少小鼠血清中ACP及NAG含量，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義,見圖3、4。

3.5ome對小鼠脾臟中ACP及NAG含量影響ome組給藥24周后小鼠脾臟中ACP及NAG含量均減少。與對照組相比，ome低劑量組ACP及NAG含量均減少，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義；ome高劑量組與對照組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。與MNNG組相比，ome+組同樣均可降低小鼠脾臟中ACP及NAG含量，MNNG+ome低劑量組差異無統(tǒng)計學(xué)意義，MNNG+ome高劑量組差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),見圖5、6。

3.6各組小鼠前胃組織p53、p21和mTOR表達量和對照組相比，實驗組p53表達增加，p21表達減少，mTOR表達減少，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，見圖7。

圖1　小鼠胃大體標本(標尺：2 mm)

組別鼠數(shù)前胃乳頭狀增生鱗癌腺胃慢性胃炎萎縮性胃炎腸上皮化生不典型增生腺癌對照組70000000ome低劑量組75001010ome高劑量組77002020MNNG組77200010MNNG+ome低劑量組7746004b0MNNG+ome高劑量組776a7014b1

注：a和MNNG組存在差異，b和MNNG組存在差異(SNK-Q檢驗)。

注：第1列為各組小鼠前胃HE染色圖(×40)；第2列為各組小鼠前胃HE染色圖(×200)；第3列為各組小鼠腺胃HE染色圖(×40)；第4列為各組小鼠腺胃HE染色圖(×200)。

圖2各組小鼠前胃及腺胃HE染色圖

注：與對照組相比，aP<0.05；與MNNG組相比，bP<0.01。

圖3各組小鼠血清中ACP含量(n=7)

注：與對照組對比，aP<0.01；與MNNG組對比bP<0.01。

圖4各組小鼠血清中NAG含量(n=7)

注：與對照組相比，#P<0.01,.與MNNG組相比#P<0.01。

圖5各組小鼠脾臟中ACP含量(n=7)

注：與對照組相比，#P<0.01，與MNNG組相比，*P<0.05。

圖6各組小鼠脾臟中NAG含量(n=7)

注：和對照組相比，實驗組p53高表達，p21低表達，mTOR低表達；A.各組p53、p21、mTOR的Western blotting結(jié)果；B.各組p53的相對灰度值，與對照組相比，P<0.01；C.各組p21的相對灰度值，與對照組相比，P<0.01；D.各組mTOR的相對灰度值，與對照組相比，P<0.01。

圖7各組p21,p53,mTOR表達水平(n=5)

4討論

溶酶體是一種分解代謝的酸性細胞器(pH 4.5～5.5)，在哺乳動物中除了成熟的紅細胞，普遍存在于其他的細胞[3]。它通過自噬、內(nèi)吞和吞噬功能負責(zé)處理、回收利用受損的細胞、生物大分子和細胞器，同時消化那些轉(zhuǎn)運到溶酶體中的細胞外來物質(zhì)，并通過溶酶體內(nèi)的水解酶消化這些物質(zhì)，并將消化后的產(chǎn)物通過彌散或者其他的特殊的轉(zhuǎn)運通道再循環(huán)回胞漿，或者通過細胞外分泌到細胞外間隙。水解酶特異性的廣泛存在于溶酶體內(nèi)，這些水解酶在溶酶體內(nèi)被高酸環(huán)境所激活(pH 4.5～5.0)。因此在溶酶體內(nèi)保持高度酸性的pH值對溶酶體的正常功能是所必須的。溶酶體利用一種質(zhì)子泵V-ATP酶來形成和維持pH梯度的穩(wěn)定，它通過消耗ATP將H+逆電子梯度轉(zhuǎn)入溶酶體內(nèi)[4]。Ⅴ-ATP酶的活性不僅確保溶酶體的消化功能而且還對溶酶體的鈣的平衡及溶酶體的轉(zhuǎn)運、融合功能都是必要的[5]。因此，抑制Ⅴ-ATP酶的活性同時也會損壞細胞的內(nèi)吞作用和自噬，甚至是溶酶體酶功能的喪失。Liu等[6]證實PPIs在pH為5時容易激活并與含有半胱氨酸的肽結(jié)。那么PPIs有可能對細胞內(nèi)溶酶體的Ⅴ-ATP酶具有強大的抑制作用導(dǎo)致溶酶體內(nèi)pH值增加從而抑制溶酶體的功能及其水解酶的活性。溶酶體及其水解酶在人體防御及免疫反應(yīng)中扮演重要的角色。在細胞免疫中T細胞抗原呈遞和T淋巴細胞清除腫瘤細胞、病菌感染的細胞、細胞核功能失調(diào)的細胞都需要溶酶體酶的參與。

ACP及NAG均是溶酶體內(nèi)水解酶，同時ACP又是溶酶體的特征性酶，分析兩者的含量可以直接反應(yīng)溶酶體酶的含量。本研究顯示ome對脾臟及血清中ACP和NAG具有明顯的抑制作用，同時這也提示溶酶體的功能處于一種抑制狀態(tài)。同時長期使用ome會造成小鼠脾臟的重量指數(shù)的下降。小鼠處死后本課題組還發(fā)現(xiàn)MNNG+ome高劑量組半數(shù)以上的小鼠胸腺萎縮明顯。眾所周知，脾臟和胸腺是人類最重要的免疫器官。因此，長期使用ome可能會引起系統(tǒng)性的免疫功能損傷，此結(jié)果和以往的文章是一致的[7]，這可能是其導(dǎo)致胃癌發(fā)生率增加一個主要因素。

本實驗結(jié)果提示ome+組小鼠胃癌發(fā)病率增加，其中MNNG+ome低劑量組差異無統(tǒng)計學(xué)意義，MNNG+ome高劑量組小鼠前胃癌明顯增高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。ome+組小鼠腺胃腺體不典型增生發(fā)生率均明顯增加。腺體的不典型增生是胃癌的癌前病變，本研究ome+組小鼠腺癌發(fā)病率低可能是由于本實驗誘導(dǎo)時間較短相關(guān)。高胃泌素血癥假說認為PPIs增加腫瘤發(fā)生的機制是由于其抑制胃酸的產(chǎn)生導(dǎo)致高胃泌素血癥。因為高胃泌素血癥對胃黏膜和其他的上皮組織具有有營養(yǎng)的作用并導(dǎo)致其增生，這可能導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生。但是這并不能完全解釋Zollinger-Ellison綜合征患者、迷走神經(jīng)切斷術(shù)后及其他高胃泌素血癥患者并沒有增加胃癌發(fā)生的風(fēng)險。與高胃泌素血癥假說相比，本實驗?zāi)芨玫慕忉尀槭裁磫为毷褂觅|(zhì)子泵抑制劑并不會引發(fā)腫瘤，但進食質(zhì)子泵抑制劑和高亞硝酸鹽的實驗動物胃癌發(fā)生率明顯增高。

本實驗結(jié)果提示ome可以促進小鼠前胃p53表達,抑制p21，mTOR表達。P53基因是位于17號染色體短臂的一種抑癌基因，它編碼的p53蛋白作為一種轉(zhuǎn)錄因子在調(diào)控細胞周期中起抑制DNA合成、修復(fù)DNA損傷和調(diào)控細胞凋亡等作用。它通過消除損傷細胞、抑制腫瘤的發(fā)生等維持生物的遺傳穩(wěn)定性。據(jù)報道，27%左右的胃癌患者中存在p53突變[8]，突變型p53蛋白的半衰期較正常p53蛋白長，p53的過度表達可能是p53基因突變的一個指標。突變型p53蛋白的異常功能可能增強增殖活性，促進腫瘤進展。有數(shù)據(jù)表明，突變型p53蛋白可以干擾p53家族中的p63進而促進腫瘤細胞的遷移和轉(zhuǎn)移[9]。p53蛋白的表達和胃癌的浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期、血管侵犯呈正相關(guān)[10]。ome促進小鼠前胃p53的表達,但本實驗并未發(fā)現(xiàn)單獨使用ome導(dǎo)致胃癌的現(xiàn)象，這可能是實驗時間較短造成的。P21位于P53基因下游，其表達的p21蛋白是一種細胞周期負調(diào)節(jié)因子，它通過抑制細胞周期蛋白依賴性激酶的活性導(dǎo)致細胞在細胞周期中的某個特定階段停止生長。p21與胃癌間的關(guān)系尚不明確，Huang等[11]表明較低的細胞核p21表達和較高的細胞質(zhì)p21表達和胃癌患者較差的預(yù)后相關(guān)， Liu等[12]表示p21的表達和胃癌患者的不良預(yù)后明顯相關(guān)，但是Gunia等[13]表示并沒有發(fā)現(xiàn)p21的表達和生存率之間有關(guān)，本實驗表明ome抑制小鼠胃p21的表達，特別是MNNG+ome低組和MNNG+ome高組。據(jù)Seo等[14]報道高p53、低p21表達的胃癌患者預(yù)后最差，雖然我們的實驗結(jié)果表明ome并不直接導(dǎo)致胃癌，但是ome可以促進p53表達，抑制p21表達，我們有理由相信長期使用ome的患者如果發(fā)生胃癌那么其預(yù)后較差。哺乳動物雷帕霉素靶蛋白(mTOR) 與腫瘤細胞的增殖、誘導(dǎo)凋亡和逆轉(zhuǎn)腫瘤細胞的耐藥性有關(guān)。Tapia等[15]報道胃癌患者mTOR的表達上升,本實驗結(jié)果提示小鼠胃癌mTOR表達水平下降，可能和ome的作用有關(guān)。Marino等[16]報道埃索美拉唑(esomeprazole,ESOM)可以抑制mTOR信號通路，可能會促進黑色素瘤細胞內(nèi)ESOM誘導(dǎo)的自噬反應(yīng)。在本實驗中，ome抑制mTOR的表達，其抑制機制可能和ESOM一致，但ome作用下的mTOR的低表達和胃癌的發(fā)展之間的關(guān)系需要進一步的實驗來證明。

長期使用PPIs會增加沙門氏菌、彎曲桿菌、梭狀芽孢桿菌[17]的風(fēng)險。PPIs增加細菌感染的風(fēng)險普遍認為是其抑制胃酸的分泌導(dǎo)致胃中的pH值增加。但是這并不能解釋增加梭狀芽孢桿菌感染風(fēng)險的問題。這種細菌是使用耐酸孢子作為傳播的主要工具。本實驗也能更好的闡釋長期PPIs增加梭狀芽孢桿菌感染的現(xiàn)象。

目前臨床醫(yī)師對PPIs的用藥指征把握不準和大量不規(guī)范用藥導(dǎo)致質(zhì)子泵抑制劑使用泛濫。在澳大利亞、英國和愛爾蘭使用PPIs的患者中,分別有63%、67%和33%的患者沒有按照標準使用該藥[18]。武航海等[19]統(tǒng)計所屬醫(yī)院2011—2012年ome使用情況發(fā)現(xiàn)10 000張含ome的處方中1 752張為不合理處方。國內(nèi)大部分地區(qū)尤其是農(nóng)村及偏遠地區(qū)，人們喜食腌制及煙熏食品，該類食品含有大量亞硝酸鹽，本研究提示對于這一類患者長期使用ome(尤其是大劑量使用ome)可增加胃癌發(fā)病率、胃腺細胞不典型增生率。對于需要長期使用ome的患者，建議定期胃鏡并取活檢避免胃癌發(fā)生。同時本研究存在一定的不足，實驗樣本量較小，實驗時間較短，有待大樣本實驗近一步探索研究。本研究對于合理、規(guī)范化使用PPIs具有一定的臨床指導(dǎo)意義，特別是對于那些行部分胃切除術(shù)后出現(xiàn)消化道癥狀的患者。

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Study on the mechanism of omeprazole in promoting the development of gastric cancer in mice

HE Wei1,QI Dong-jiang1,XU A-man1,2,et al

(1.DepartmentofGeneralSurgery,TheFourthAffiliatedHospitalofAnhuiMedicalUniversity,Hefei,Anhui230032,China;2.DepartmentofGastrointestinalSurgery,TheFirstAffiliatedHospitalofAnhuiMedicalUniversity,Hefei,Anhui230022,China)

Abstract:ObjectiveTo investigate if oral omeprazole(ome) will increase the incidence of gastric cancer in mice and the possible mechanism.MethodsMice were divided into 6 groups,with seven mice in each group,including control group,low-dose ome group,high-dose ome group,N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine (MNNG) group,MNNG+low-dose ome group (6 mg·kg-1),and MNNG+high-dose ome group (30 mg·kg-1).The mice were administrated with drinking water containing MNNG.The mice were raised in a routine way for 24 weeks.After that the mice were sacrificed to collect samples and calculate the mice spleen index.HE staining of the mice stomach was applied to exam the histological changes.Serum and spleen concentrations of acid phosphatase (ACP) and N-acetyl-β-D-glucosaminidase (NAG) were detected by ELISA.And the expression levels of p21,p53 and mTor in the mouse stomach were detected by Western Blotting.ResultsIn the comparison of the ome group with the control group and the MNNG group with the ome + group,mice spleen weight indexes in the ome group and the ome+ group decreased significantly.Meanwhile,mice serum and spleen lysosomal enzyme levels also decreased significantly.Compared with MNNG group,the incidence of gastric cancer in the ome+ group was increased significantly.especially in the MNNG+ome high-dose group,.and the difference was statistically significant (P<0.05).Compared with the control group,the expressions of p53 in the experimental group was increased,the expressions of p21 decreased,and the expressions of mTOR also decreased (P<0.05).ConclusionsOme can promote gastric carcinogenesis in mice,and its mechanism may be through the inhibition of lysosomal hydrolase enzyme and its fuction in mice,thereby reducing the immune fuction in these mice.

Key words:Stomach neoplasms;Omeprazole;Lysosomes;Acid phosphatase;Blotting,western;Mice,knockout

通信作者：徐阿曼，男，主任醫(yī)師，碩士生導(dǎo)師，研究方向：胃腸腫瘤，E-mail：xuaman166@sina.com

doi:10.3969/j.issn.1009-6469.2016.06.008

(收稿日期：2016-01-16，修回日期：2016-04-10)