唐興敏++任立瑞++楊金鳳

摘要：為了篩選出對蘋果輪紋病菌抑制效果好、持效期長并且對果樹安全的銅制劑，選取生產(chǎn)上常用的6種銅制劑，以代森錳鋅和石硫合劑作為對照藥劑，采用載玻片孢子萌發(fā)法測定了不同銅制劑對蘋果輪紋病菌分生孢子萌發(fā)抑制作用的持效期，并進(jìn)行了光照與降雨對不同藥劑持效期的影響以及各藥劑對果實的藥害等方面的試驗。結(jié)果表明：在6種銅制劑和2種對照藥劑中，倍量式波爾多液、硫酸銅和松脂酸銅是抑制蘋果輪紋病菌分生孢子萌發(fā)最好的藥劑，藥后15 d抑菌率仍達(dá)到95%左右，維持抑菌效果在50%以上的持效期長達(dá)20 d以上；其次是氫氧化銅，藥后7 d抑制作用65%左右，持效期為7 d；其他藥劑持效期短，抑制效果較差。藥劑抑制作用持效期受降雨和光照影響，但影響程度不同，藥后15 d之內(nèi)，光照和降雨處理對倍量式波爾多液和硫酸銅的抑菌作用無顯著性影響，但使松脂酸銅的抑菌作用顯著性降低；藥害試驗表明，硫酸銅對蘋果幼果有藥害，其他藥劑在本研究使用濃度條件下對幼果安全。

關(guān)鍵詞：蘋果輪紋??；銅制劑；抑菌作用；持效期

中圖分類號： S436.611.1+9文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A文章編號：1002-1302（2016）05-0163-04

蘋果輪紋病[Botryosphaeria dothidea （Moug.） Ces. et de Not.]別稱粗皮病[1]，是我國蘋果生產(chǎn)中的一個重要病害，該病病菌不僅能夠侵染蘋果果實導(dǎo)致爛果，還能侵染枝干，引起枝干潰瘍、枝條枯死，導(dǎo)致樹勢衰弱。近年來，主栽品種的更迭，以及優(yōu)質(zhì)但感病的品種栽培面積不斷擴(kuò)大，再加上大量矮砧密植富士蘋果的種植，蘋果輪紋病已與蘋果樹腐爛病、蘋果早期落葉病成為我國蘋果的三大主要病害[2]，逐漸成為生產(chǎn)上的突出問題。目前國內(nèi)外仍以化學(xué)藥劑防治為主，銅制劑作為礦物源農(nóng)藥，是比較常用的一類藥劑，自開發(fā)利用至今已有200余年歷史，具有殺菌譜廣、無抗藥性、持效期較長、對農(nóng)產(chǎn)品和環(huán)境比較安全等優(yōu)點，已成為果樹、蔬菜、農(nóng)作物病害防治的主要藥劑[3-4]。在現(xiàn)代農(nóng)作物無公害生產(chǎn)中，銅制劑使用前景非常廣闊[5]，但市場上銅制劑種類較多，各有特點，如果選用或使用不當(dāng)，銅離子常常會導(dǎo)致果樹發(fā)生藥害[6]，尤其在幼果期易產(chǎn)生藥害[7]。在眾多銅制劑中篩選出抑菌效果良好、持效期長、對環(huán)境穩(wěn)定性好、對果樹安全的一種或幾種較好的銅制劑，對蘋果輪紋病的防治具有重要指導(dǎo)意義。

1材料與方法

1.1供試材料

供試蘋果品種：富士，為蘋果輪紋病感病品種，由河北農(nóng)業(yè)大學(xué)植物病害流行與綜合防控研究室試驗基地提供。供試病原菌：蘋果輪紋病菌（Botryosphaeria dothidea），由河北農(nóng)業(yè)大學(xué)植物病害流行與綜合防治研究室提供。供試藥劑：本研究根據(jù)藥劑的有效成分種類，選擇生產(chǎn)上常用的6種銅制劑及2種對照藥劑，藥劑的詳細(xì)信息見表1。

1.2試驗方法

1.2.1蘋果輪紋病菌分生孢子的獲得接種未成熟蘋果果實，黑光燈下誘導(dǎo)蘋果輪紋病菌產(chǎn)生分生孢子[8]。將分生孢子在無菌水中混勻，配制成孢子濃度為1×105～1×106個/mL 的孢懸液備用。

1.2.2藥劑對病菌抑制作用的測定方法本試驗采用玻片孢子萌發(fā)法，即先在載玻片上滴定量藥液，待藥液自然干燥后，再在滴藥部位滴30 μL孢子懸浮液，對其進(jìn)行保濕培養(yǎng)，25 ℃黑暗培養(yǎng)8～9 h后，采用5點取樣法，在顯微鏡下計數(shù)分生孢子萌發(fā)情況，每個處理總計檢查不少于100個分生孢子，計算孢子萌發(fā)率和藥液對孢子萌發(fā)的抑制率。分生孢子的萌發(fā)率和抑制率計算公式為：

孢子萌發(fā)率= 萌發(fā)的孢子總數(shù)/檢查的孢子總數(shù)×100%；

孢子萌發(fā)抑制率=（對照孢子萌發(fā)率-處理孢子萌發(fā)率）/對照孢子萌發(fā)率×100%。

1.2.3室內(nèi)條件下不同藥劑抑制作用持效期的測定供試藥劑按照表1建議用量進(jìn)行稀釋。于檢測前20、15、7、3、1 d，用移液器吸取30 μL銅制劑藥液分別均勻滴于載玻片上，同時設(shè)代森錳鋅、石硫合劑和清水對照，4次重復(fù)。待藥液自然干燥后，置于室內(nèi)保存，到達(dá)處理時間后，運用“1.2.2”節(jié)的檢測方法測定各處理的孢子萌發(fā)率，并計算抑制率。

1.2.4降雨和光照對藥劑抑制作用持效期的影響藥液的稀釋濃度同“1.2.3”節(jié)，于接種前20、15、7、3、1 d，取30 μL銅制劑藥液分別均勻滴于載玻片上，同時設(shè)代森錳鋅、石硫合劑和清水對照，4次重復(fù)。待藥液自然干燥后，進(jìn)行不同處理。為了明確室外氣象因素中降雨和光照對不同藥劑持效期的影響，設(shè)置了4種處理，分別是避光避雨、避光淋雨、光照避雨、光照淋雨。避光處理，用完全遮光的遮陽網(wǎng)將滴有藥液的載玻片覆蓋；光照處理，即不覆蓋遮陽網(wǎng)，直接將滴有藥液的載玻片置于自然光照處。淋雨處理即在接種前1 d對滴藥載玻片噴水，模擬雨量為中雨量（降雨量20 mm），避雨處理即不進(jìn)行模擬降雨。到達(dá)處理時間后，運用“1.2.2”節(jié)的檢測方法測定各處理的孢子萌發(fā)率，并計算抑制率。表1供試藥劑一覽

藥劑生產(chǎn)廠家劑型建議用量田間用藥成本

（元/667m2）硫酸銅鈣江蘇龍燈化學(xué)有限公司77%可濕性粉劑2 142.7 g/hm221.4氫氧化銅澳大利亞紐發(fā)姆有限公司37.5%懸浮劑1 000.0 mL/hm210.7松脂酸銅天津施普樂有限公司12%乳油3 062.5 mL/hm230.6硫酸銅天津天大化工實驗廠99%分析純晶體7 500.0 g/hm214.0波爾多液美國仙農(nóng)有限公司80%可濕性粉劑3 000.0 g/hm220.0倍量式波爾多液河北農(nóng)業(yè)大學(xué)植物病害流行與綜合防治研究室配制—7 500.0 mL/hm234.0代森錳鋅陶氏益農(nóng)科技有限公司80%可濕性粉劑2 142.2 g/hm29.1石硫合劑天津匯源化學(xué)品有限公司29%水劑19 950.0 mL/hm213.3

1.2.5不同藥劑對幼果藥害的測定于晴朗無風(fēng)的上午（2015年5月12日）在河北農(nóng)業(yè)大學(xué)國家蘋果產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系蘋果病蟲害防控實驗基地選取富士品種蘋果樹，在其上、中、下各選取3個幼果，測量直徑并記錄。按照藥劑建議用量稀釋藥劑，隨后用小噴壺將藥液均勻噴到幼果的表面，直到有液滴滴下為止，設(shè)代森錳鋅、石硫合劑和清水對照，3次重復(fù)。施藥后，每15 d檢查1次是否出現(xiàn)藥害。

1.3數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析方法

數(shù)據(jù)分析軟件采用了DPS數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)（data processing system，DPS v7.05，杭州睿豐信息技術(shù)有限公司）完成。

2結(jié)果與分析

2.1室內(nèi)條件下藥劑抑制作用持效期測定結(jié)果

室內(nèi)條件下檢測（表2）表明，倍量式波爾多液、硫酸銅、松脂酸銅有較好的抑菌作用，施藥后15 d接種蘋果輪紋病菌的抑制率分別為100%、100%和94.62%，施藥后20 d分別為98.32%、97.41%和77.51%；氫氧化銅在施藥后1、3、7 d抑制率分別為87.30%、67.64%和65.60%，15 d后抑制作用下降至46.02%；波爾多液和硫酸銅鈣抑菌效果差，施藥后1 d的抑菌率僅為37.20%和18.33%。對照藥劑代森錳鋅和石硫合劑持效期較短，施藥后3 d抑制率分別為100%和5089%，施藥后7 d分別下降至19.68%和4.23%，基本失去抑菌效果。如果以抑菌率達(dá)到50% 以上的持續(xù)時間作為藥劑抑制作用的持效期，那么，倍量式波爾多液、硫酸銅、松脂酸銅3種藥劑的抑制作用持效期可達(dá)20 d以上；氫氧化銅的持效期在7 d以上；波爾多液和硫酸銅鈣抑制效果差，基本無抑制效果；對照藥劑代森錳鋅和石硫合劑持效期僅為 3 d。

2.2光照和降雨對藥劑抑菌作用持效期的影響

光照和降雨對藥劑抑菌作用持效期影響作用的測定結(jié)果（圖1至圖8）表明：避光淋雨、光照避雨和光照淋雨處理后，藥劑對分生孢子的抑制作用較避光避雨處理均有不同程度的下降。不同藥劑的持效期受降雨和光照影響的程度不同。光照處理條件下，硫酸銅鈣（圖1）的抑制作用顯著小于避光處理，降雨處理抑制作用較避雨小，但差異不顯著；氫氧化銅（圖2）施藥1 d后，不同處理間抑制作用差異不顯著，施藥 3 d 后降雨對其抑制作用持效期有顯著性影響；松脂酸銅（圖3）的抑菌作用受降雨影響大，降雨處理抑制作用顯著低于避雨處理，施藥后1 d和20 d，光照淋雨處理條件下抑菌作用顯著低于避光淋雨，而施藥后3 d，光照淋雨處理條件下抑菌作用卻顯著高于避光淋雨，施藥后7 d和15 d，2個處理間無顯著性差異，這說明松脂酸銅對光照因素穩(wěn)定性差；硫酸銅（圖4）抑制作用持效期長，施藥20 d后，4個處理的抑制率仍能達(dá)到96%以上；波爾多液（圖5）抑菌效果差，施藥1 d后，4個處理中避光避雨條件下抑菌率最高，僅為63.67%，其他處理都低于50%，且光照和降雨都對其持效期有顯著影響；自制倍量式波爾多液（圖6）持效期長，施藥20 d后，各處理抑菌率仍達(dá)90%以上，光照淋雨處理的抑菌率顯著低于其他處理；代森錳鋅（圖7）受光照影響小，受降雨影響大，降雨處理的抑菌率均顯著低于避雨處理；石硫合劑（圖8）持效期短，施藥后1 d，光照淋雨處理抑菌率72.38%顯著低于其他處理，接種后3 d抑菌率低至16%。

6種銅制劑和2種對照藥劑中，硫酸銅鈣抑菌作用持效期受光照影響顯著，松脂酸銅、波爾多液持效期受光照和降雨影響顯著，氫氧化銅、代森錳鋅和石硫合劑持效期受降雨影響顯著，硫酸銅和倍量式波爾多液對光照和降雨較穩(wěn)定，在施藥20 d后，降雨對藥劑抑制作用影響顯著。

2.3不同藥劑對幼果藥害的測定結(jié)果

噴藥時間為2015年5月12日，2015年8月25日調(diào)查發(fā)現(xiàn)幼果期噴施硫酸銅的果實上出現(xiàn)黑色小斑點，經(jīng)鑒定為藥害癥狀，其他藥劑均未出現(xiàn)藥害（圖9）。

3結(jié)論與討論

本研究明確了6種銅制劑及對照藥劑在噴藥后不同時間以及在不同環(huán)境條件下對蘋果輪紋病菌的抑制作用。倍量式波爾多液、硫酸銅和松脂酸銅是抑制蘋果輪紋病菌效果最好的藥劑，藥后15 d抑菌率能達(dá)到95%左右，防效達(dá)50%以上的持效期長達(dá)20 d以上，其次是氫氧化銅，藥后7 d抑制作用在65%左右，持效期為7 d，其他藥劑持效期短，抑制效果較差；藥劑持效期受降雨和光照影響，但影響程度不同，光照和降雨處理對倍量式波爾多液和硫酸銅的抑菌作用無顯著性影響，但使松脂酸銅的抑菌作用顯著性降低。藥害試驗證明，硫酸銅對幼果有藥害，其他藥劑未出現(xiàn)藥害現(xiàn)象。

有相關(guān)報道表明，200倍倍量式波爾多液的保護(hù)作用持效期為15 d[9]，本研究結(jié)果與之稍有差別，主要是衡量持效期所用的防效標(biāo)準(zhǔn)不一致，但均說明了倍量式波爾多液的持效期較長。從實際生產(chǎn)來看，人們通過噴霧防控蘋果病害，都有10～15 d噴1次藥的習(xí)慣。因此，用藥后15 d藥劑的防效應(yīng)該是評價不同藥劑的重要參考。以藥后15 d的防效來看，倍量式波爾多液、硫酸銅和松脂酸銅是最好的藥劑，藥后15 d保護(hù)效果達(dá)95%左右，且倍量式波爾多液和硫酸銅耐光解，耐雨水沖刷，對環(huán)境的穩(wěn)定性好，松脂酸銅不耐雨水沖刷，對環(huán)境的穩(wěn)定性差。盡管使用倍量式波爾多液較為麻煩，而且價格較貴，但考慮到其防控效果，推薦倍量式波爾多液為首選藥劑。硫酸銅防效和持效期不亞于倍量式波爾多液，價格只是倍量式波爾多液的二分之一，但鑒于其對幼果有藥害，所以在套袋果園可作為首選藥劑，在不套袋果園則須謹(jǐn)慎使用。

本研究所采取的測試方法簡便易行、受其他因素干擾較小，對于評價不同藥劑的殘效期具有很強(qiáng)的可操作性和準(zhǔn)確性。但是，由于本研究持效期試驗均是室內(nèi)條件下的研究結(jié)果，與田間藥效持效期會有一定差異；另外載玻片和蘋果葉片對藥劑的附著力會有一定差異，這也可能會影響持效期測定的結(jié)果，但是并不妨礙不同藥劑之間的相互比較。有關(guān)這些藥劑在田間條件下的持效期，還有待于今后進(jìn)一步測定。

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