王　軍，陳　曦，周迎春，王　倩，何長生，劉　華，沈　艷，占松鶴,*

(1.安徽省動物疫病預(yù)防與控制中心，安徽 合肥 230091；2.安徽省畜禽防治技術(shù)服務(wù)中心)

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安徽省2015年口蹄疫免疫抗體集中監(jiān)測與分析

王軍1,2，陳曦1，周迎春1，王倩1，何長生1，劉華1，沈艷1，占松鶴1,*

(1.安徽省動物疫病預(yù)防與控制中心，安徽 合肥 230091；2.安徽省畜禽防治技術(shù)服務(wù)中心)

2015年，隨機從全省16個地市、2個直管縣采集豬血清6 481份、牛血清1 663份、羊血清1 643份，采用液相阻斷ELISA和VP1結(jié)構(gòu)蛋白ELISA檢測O型口蹄疫免疫抗體；采用液相阻斷ELISA檢測亞洲1型和A型口蹄疫免疫抗體。結(jié)果顯示，O型口蹄疫免疫抗體平均合格率為79.12%，其中豬、牛、羊血清的免疫抗體合格率分別為81.90%、77.87%、69.39%；亞洲1型口蹄疫免疫抗體平均合格率為70.14%，其中牛、羊血清的免疫抗體合格率分別為73.78%、67.29%；牛A型口蹄疫免疫抗體合格率為86.74%。

口蹄疫；免疫抗體；監(jiān)測；分析

1　材料與方法

1.1實驗器材

單道、8道、12道移液器若干，96孔U型反應(yīng)板若干，100 mL、1000 mL量筒，KL-UP-Ⅲ-10超純水機，SHP-250FE生化培養(yǎng)箱(37℃)，ELX405R 96通道全自動洗板機，TECAN SUNRISE REMOTE酶標儀。

1.2待檢血清

來自全省16個地市、2個直管縣的豬、牛、羊血清樣品共計9 787份。

1.3檢測試劑

O型、亞洲1型和A型口蹄疫液相阻斷ELISA抗體檢測試劑盒，均由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所生產(chǎn)，批號分別為：20150516101(O型)、20150602102(亞洲1型)、20150422103(A型)；豬口蹄疫病毒VP1結(jié)構(gòu)蛋白抗體酶聯(lián)免疫吸附試驗診斷試劑盒,由上海優(yōu)耐特生物醫(yī)藥有限公司生產(chǎn)，批號201510012。

1.4抽樣方法

具體施工過程中，為了從根本上提高預(yù)應(yīng)力在橋梁工程施工建設(shè)中的應(yīng)用，需要從早期提高橋梁強度和預(yù)應(yīng)力。其中最方便快捷的方法就是在早期橋梁施工過程中添加早強劑。早強劑一般在混凝土施工結(jié)束三天后進行，早強劑添加后，需靜置放置3d，3d后繼續(xù)進行下一步張拉。張拉過程中，只有有效控制張拉時間，才能最大限度保障混凝土性能，提高預(yù)應(yīng)力的實際使用效果，從而保障整體效果的質(zhì)量。

每年分春、秋兩季集中監(jiān)測。抽樣范圍覆蓋全省16個地市、2個直管縣，涉及種畜場、商品代飼養(yǎng)場、村散養(yǎng)戶、屠宰場或交易市場，樣品兼顧豬、牛、羊的血清數(shù)量比例。

1.5檢測方法與判定標準

1.5.1方法按照2015年國家動物疫病監(jiān)測計劃中指定的方法進行檢測。(1)O型口蹄疫抗體：液相阻斷ELISA，檢測豬、牛、羊血清的O型口蹄疫免疫抗體；使用合成肽疫苗免疫豬的，采用VP1結(jié)構(gòu)蛋白ELISA檢測豬血清；(2) 亞洲1型口蹄疫抗體：液相阻斷ELISA，檢測牛、羊血清；(3 )A型口蹄疫抗體：液相阻斷ELISA，檢測牛血清。

1.5.2判定(1)液相阻斷ELISA：抗體效價≥26為免疫合格；(2) VP1結(jié)構(gòu)蛋白抗體ELISA：抗體效價≥25為免疫合格。

2　結(jié)果

2.1O型口蹄疫檢測結(jié)果

全年共檢測豬、牛、羊血清9787份，合格7743份，平均免疫抗體合格率79.12%，其中豬、牛、羊血清的合格率分別為81.90%、77.87%、69.39%。結(jié)果見表1。

表1　2015年O型口蹄疫免疫抗體檢測結(jié)果

所檢測的9787份血清樣品中：種畜血清743份，合格651份，免疫抗體合格率87.62%；規(guī)模場畜血清7115份，合格5581份，免疫抗體合格率78.44%；散養(yǎng)畜血清1360份，合格1077份，免疫抗體合格率79.19%；交易市場/屠宰場畜血清569份，合格434份，免疫抗體合格率76.27%。結(jié)果見表2。

表2　不同畜別O型口蹄疫免疫抗體合格率

由表2可以看出，無論上半年還是下半年，種畜的免疫抗體合格率均比規(guī)模場畜、散養(yǎng)畜及交易市場/屠宰場畜要高，這可能與種畜的飼養(yǎng)周期較長、免疫次數(shù)較多有關(guān)。

2.2亞洲1型口蹄疫檢測結(jié)果

全年共檢測牛、羊血清2 187份，合格1 534份，平均合格率為70.14%，其中牛、羊血清的合格率分別為73.78%、67.29%。結(jié)果見表3。

表3　2015年亞洲1型口蹄疫免疫抗體檢測結(jié)果

所檢測的2 187份血清樣品中：規(guī)模場畜血清1 995份，合格1 443份，免疫抗體合格率72.33%；散養(yǎng)畜血清102份，合格42份，免疫抗體合格率41.18%；交易市場/屠宰場畜血清90份，合格49份，免疫抗體合格率54.44%。結(jié)果見表4。

表4　不同畜別亞洲1型口蹄疫免疫抗體合格率

由表3知，2015年上半年牛、羊亞洲1型口蹄疫免疫抗體合格率均未達到農(nóng)業(yè)部規(guī)定的70%的標準，根據(jù)表4，無論散養(yǎng)畜、交易市場/屠宰場畜，還是規(guī)模場畜，免疫抗體都達不到有效保護水平。

2.3A型口蹄疫檢測結(jié)果

2015年共檢測規(guī)模場牛血清1 033份，合格896份，合格率為86.74%；奶牛與黃牛的免疫抗體合格率分別為90.34%、81.52%。結(jié)果見表5。

表5　2015年A型口蹄疫免疫抗體檢測結(jié)果

由表5知，我省規(guī)模牛場A型口蹄疫免疫效果較好，免疫抗體具有較高的保護水平，可以抵御A型口蹄疫發(fā)生風(fēng)險。

3　討論

3.1人類與口蹄疫的斗爭已經(jīng)持續(xù)了上百年的歷史，至今仍未將其徹底消滅。目前,預(yù)防接種口蹄疫疫苗是防治口蹄疫的有效手段，在今后相當(dāng)長一段時間內(nèi)仍將如此。所以，我國各地均高度重視口蹄疫免疫工作，且關(guān)注免疫效果。2015年集中監(jiān)測，我省口蹄疫(O型、亞洲1型、A型)平均免疫抗體合格率均達到農(nóng)業(yè)部規(guī)定的70%的標準，總體免疫效果較好。結(jié)果表明，我省集中免疫工作扎實，免疫措施到位，這與近幾年我省各地對春、秋季重大動物疫病集中免疫工作重視程度不斷提高有關(guān)。

3.22015年下半年口蹄疫(O型、亞洲1型、A型)免疫抗體合格率較上半年明顯提高，這可能是因為各地動物疫病預(yù)防控制機構(gòu)依據(jù)上半年的監(jiān)測結(jié)果，及時查漏補缺，采取了切實有效的強化免疫措施。這表明，開展免疫抗體監(jiān)測工作，能夠及時掌握免疫狀況，通過分析評估免疫效果，可以指導(dǎo)科學(xué)免疫，對保證免疫質(zhì)量發(fā)揮了積極作用。

3.3從家畜種類來看，羊群的口蹄疫(O型、亞洲1型)免疫抗體合格率低于70%的標準，不能達到有效保護水平。這可能是羊飼養(yǎng)周期短且免疫次數(shù)較少的緣故。我省應(yīng)加強羊群的補免及監(jiān)測工作，定期開展流行病學(xué)調(diào)查，密切關(guān)注羊群的疫病動態(tài)，最大限度地降低口蹄疫的發(fā)生風(fēng)險。

3.4根據(jù)亞洲1型口蹄疫監(jiān)測結(jié)果，散養(yǎng)畜的免疫抗體合格率較低。分析原因，可能是散養(yǎng)戶的口蹄疫免疫工作主要集中在春、秋兩季集中免疫時進行,大多數(shù)家畜只能免疫1次,且在免疫過程中還可能存在疫苗注射部位不準、劑量不足的問題,從而影響了口蹄疫免疫質(zhì)量。有研究表明，口蹄疫的免疫抗體水平與免疫次數(shù)呈正相關(guān), 對家畜進行多次強化免疫，可以使免疫抗體水平較高而且維持時間較長。因此我省要加強散養(yǎng)畜的口蹄疫強化免疫工作,除做好春、秋兩季集中免疫外,還要做好定期補免工作,加強對新生仔畜、補欄畜、漏免畜和抗體水平不達標畜群的補免工作,確保應(yīng)免畜群免疫密度達到100%，免疫抗體合格率全年保持在70%以上。

3.5安徽省牛、羊的口蹄疫疫苗多為O型-亞洲1型二價苗，而監(jiān)測結(jié)果顯示牛、羊的亞洲1型口蹄疫免疫抗體合格率均略低于O型口蹄疫免疫抗體合格率。這有可能是因為不同動物免疫口蹄疫O型-亞洲1型二價苗，疫苗作用于機體后，刺激機體產(chǎn)生的 O 型口蹄疫免疫抗體和亞洲1型口蹄疫免疫抗體不同。具體原因是疫苗不同血清型毒種免疫原性的差異所致，還是牛羊個體對疫苗免疫應(yīng)答存在差異性，尚需進一步研究和探討。

3.6做好口蹄疫免疫抗體監(jiān)測工作，可以及時掌握畜群免疫狀態(tài)，指導(dǎo)制定科學(xué)合理的免疫程序。2015年我省口蹄疫集中監(jiān)測工作得到較為有效開展，取得良好效果，為口蹄疫疫情預(yù)警預(yù)報提供了技術(shù)支撐。應(yīng)進一步加強集中監(jiān)測工作，鼓勵有條件的市、縣動物疫病預(yù)防控制機構(gòu)積極主動開展，力爭做到監(jiān)測范圍更廣，覆蓋面更大。

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[6]農(nóng)業(yè)部.關(guān)于印發(fā)《2013年國家動物疫病強制免疫計劃》的通知[Z].農(nóng)醫(yī)發(fā)〔2013〕8號.北京:農(nóng)業(yè)部,2013-02-25.

[7]農(nóng)業(yè)部.關(guān)于印發(fā)《2015年國家動物疫病監(jiān)測與流行病學(xué)調(diào)查計劃》的通知[Z].農(nóng)醫(yī)發(fā)〔2015〕10號.北京:農(nóng)業(yè)部,2015-04-01.

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Concentrative Monitoring and Analysis of the Immune Antibody to Foot-and-mouth Disease in Anhui Province in 2015

WANG Jun1,2, CHEN Xi1, ZHOU Ying-chun1, WANG Qian1, HE Chang-sheng1,LIU Hua1, SHEN Yan1, ZHAN Song-he1,*

(1.AnhuiProvincialCenterforAnimalDiseaseControlandPrevention,HefeiAnhui230091China;2.AnhuiProvincialTechnologyServiceCenterforPreventionandTreatmentofLivestockandPoultry)

In 2015, 6481 swine serum, 1663 cattle serum and 1643 goat serum were randomly sampled from 16 cities and 2 autonomous counties of Anhui province. The liquid-phase blocking ELISA and VP1 structural protein ELISA were used to detect type O FMD immune antibody; The Asia type 1 and type A FMD immune antibody were detected by using the method of liquid-phase blocking ELISA. The results showed that: the average qualification rate of O type FMD immune antibody was 79.12%, and the qualification rate of swine, cattle, goat serum immune antibody were 81.90%, 77.87% and 69.39%, respectively; the average qualification rate of Asia type 1 FMD immune antibody was 70.14%, and the qualification rate of cattle, goat serum immune antibody were 73.78% and 67.29%, respectively; the qualification rate of cattle type A FMD immune antibody was 86.74%.

Foot-and-mouth disease; immune antibody; monitoring; analysis

1004-6704(2016)04-0136-04

2016-03-18

王軍(1983-)，男，安徽合肥人，獸醫(yī)師，碩士，主要從事動物疫病防控工作。

占松鶴(1970-)，男，安徽合肥人，博士，主要從事動物疫病防控工作。E-mail：songhezhan@163.com。

S 852.4

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