王曉龍　才保加　劉　寧

(青海大學(xué)附屬醫(yī)院胃腸腫瘤外科，青海　西寧　810001)

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結(jié)腸腺癌組織蛋白酶和上皮型黏附素的表達(dá)及意義

王曉龍才保加劉寧

(青海大學(xué)附屬醫(yī)院胃腸腫瘤外科，青海西寧810001)

目的檢測結(jié)腸腺癌中組織蛋白酶(Cath)-B、D和上皮型黏附素(E-cadherin)的表達(dá)，探討其臨床意義。方法63例結(jié)腸腺癌患者的臨床資料及術(shù)后存留的組織作為觀察組，距腫物邊緣大于5 cm的正常結(jié)腸黏膜組織25例作為對照組。兩組中Cath-B、-D和E-cadherin的表達(dá)應(yīng)用免疫組化SP法檢測。結(jié)果兩組中Cath-B、-D和E-cadherin的陽性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。觀察組中Cath-B、-D和E-cadherin的陽性率均與腫瘤的分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及脈管浸潤密切相關(guān)，而與腫瘤的性別、年齡無明顯相關(guān)性。結(jié)論結(jié)腸腺癌中Cath-B、-D高表達(dá)、E-cadherin低表達(dá)，不僅可以促進(jìn)腫瘤的發(fā)生，還對腫瘤的進(jìn)展及播散可能有一定作用。

結(jié)腸腺癌；組織蛋白酶(Cath)-B；Cath-D；上皮型黏附素(E-cadherin)；免疫組化

結(jié)腸腺癌發(fā)生及發(fā)展與腫瘤的侵襲和播散有重要關(guān)系。目前關(guān)于腫瘤播散和轉(zhuǎn)移相關(guān)的蛋白研究較多〔1〕。組織蛋白酶(Cath)是一類在酸性pH值環(huán)境中被活化的溶酶體蛋白酶，在蛋白降解中起一定作用。Cath-B和-D是家族中的重要成員，在一定條件作用下，可以對基底膜和細(xì)胞外基質(zhì)形成有效的降解〔2,3〕。而上皮型黏附素(E-cadherin)是上皮細(xì)胞連接的重要蛋白，在正常情況下高表達(dá)，對細(xì)胞間信息傳遞和信號轉(zhuǎn)導(dǎo)有一定作用。在腫瘤形成和發(fā)展過程中，E-cadherin的表達(dá)下降，使腫瘤細(xì)胞間的黏附能力下降，細(xì)胞遷移能力增加，轉(zhuǎn)移潛能升高〔4,5〕。本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用免疫組化方法檢測結(jié)腸腺癌中Cath-B、-D和E-cadherin的表達(dá)，分析其臨床意義。

1　資料與方法

1.1一般資料我院行結(jié)腸腺癌根治的患者作為觀察組，并留取術(shù)后標(biāo)本，共63例，年齡38～79歲，平均61.9歲，其中男32例，女31例。納入均符合WHO中關(guān)于結(jié)腸腺癌的診斷標(biāo)準(zhǔn)。術(shù)前均未行放、化療。距腫物邊緣大于5 cm的正常結(jié)腸黏膜組織25例作為對照組，年齡39～76歲，平均58.6歲，其中男13例，女12例。兩組常規(guī)資料無顯著差異，具有可比性。

1.2Cath-B、-D和E-cadherin表達(dá)的檢測兩組術(shù)后留取組織均行石蠟包埋，應(yīng)用免疫組化SP法進(jìn)行Cath-B、-D和E-cadherin蛋白檢測，操作完全由主管技師進(jìn)行，做好質(zhì)量控制。

1.3Cath-B、-D和E-cadherin結(jié)果的判定Cath-B和Cath-D以細(xì)胞質(zhì)中出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性，E-cadherin以細(xì)胞膜中呈現(xiàn)棕黃色為陽性，觀察組選擇上皮細(xì)胞巢集中且染色較為明顯的區(qū)域計(jì)數(shù)，對照組選擇上皮細(xì)胞分布區(qū)且染色較為明顯的區(qū)域計(jì)數(shù)，選擇5個(gè)400倍視野進(jìn)行觀察，計(jì)算陽性率，取平均值，以<10%為陰性，以≥10%為陽性。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SAS6.12軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)或線性相關(guān)分析。

2　結(jié)　果

2.1兩組Cath-B、-D和E-cadherin陽性率比較兩組Cath-B、-D和E-cadherin陽性率差異均顯著(P<0.05)。見表1。

表1　兩組Cath-B、-D和E-cadherin陽性率比較〔n(%)〕

2.2觀察組不同臨床病理特征中Cath-B、-D和E-cadherin的比較觀察組中Cath-B、-D和E-cadherin的陽性率均與腫瘤的分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及脈管浸潤密切相關(guān)，而與性別、年齡無明顯相關(guān)性。見表2。

2.3觀察組中Cath-B、-D和E-cadherin的相關(guān)性觀察組中Cath-B和E-cadherin(r=-0.48,P<0.05)、Cath-D和E-cadherin(r=-0.45,P<0.05)具有負(fù)相關(guān)性。

表2　觀察組不同臨床病理特征中Cath-B、-D和E-cadherin的比較〔n(%)〕

3　討　論

結(jié)腸腺癌是上皮來源的惡性腫瘤，當(dāng)腫瘤穿透黏膜肌層到黏膜下層時(shí)，會發(fā)生轉(zhuǎn)移，才命名為癌，90%以上的結(jié)直腸癌為腺癌。隨著年齡的增長，結(jié)腸癌的發(fā)病率明顯增加，在發(fā)達(dá)國家，除存在遺傳易感性或易感狀態(tài)的患者，40歲以前極少發(fā)病，因此中老年人群是發(fā)病的高發(fā)年齡。全球范圍內(nèi)的結(jié)腸腺癌死亡率約為發(fā)病率的1/2。

轉(zhuǎn)移是引發(fā)患者死亡的重要因素。伴有轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白表達(dá)失調(diào)對腫瘤進(jìn)展有重要作用。Cath-B的cNDA是1986年在肝細(xì)胞腫瘤和胚胎肝中獲得的，位于染色體8p22，Cath-B的表達(dá)存在著基因、轉(zhuǎn)錄和轉(zhuǎn)錄后水平及翻譯、翻譯后修飾等多水平的調(diào)節(jié)〔6,7〕。

Cath-D最初在乳腺癌細(xì)胞(MCF)-7細(xì)胞上發(fā)現(xiàn)，是一種雌激素依賴的糖蛋白，正常組織中表達(dá)較低，主要分布在細(xì)胞質(zhì)中〔8,9〕。生理?xiàng)l件下，不同水平的調(diào)控使Cath-B和-D維持著動態(tài)平衡，但在腫瘤性因素作用下，Cath-B和-D表達(dá)常升高，其作用有促進(jìn)腫瘤的增殖和增生、促進(jìn)腫瘤分離脫落并侵入基質(zhì)和脈管系統(tǒng)〔10,11〕、增加腫瘤的運(yùn)動性和趨化作用、促進(jìn)腫瘤血管的生成和腫瘤侵襲〔12,13〕。

E-cadherin作為細(xì)胞間重要黏附分子，其表達(dá)降低或缺失時(shí)使腫瘤細(xì)胞黏附性下降，易于脫離和遷移，從而導(dǎo)致腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移〔14,15〕。本文結(jié)果提示Cath-B、-D高表達(dá)、E-cadherin低表達(dá)對腫瘤的形成有一定作用。Cath-B、-D和E-cadherin參與腫瘤的分化、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及脈管累犯，Cath-B和-D高表達(dá)、E-cadherin低表達(dá)對腫瘤進(jìn)展有重要促進(jìn)作用。研究認(rèn)為Cath-B和-D是腫瘤細(xì)胞分泌的一種蛋白降解酶，在癌巢的邊緣表達(dá)較為明顯，此時(shí)蛋白酶和抗蛋白酶之間的平衡被打破，蛋白酶占優(yōu)勢，對降解細(xì)胞外基質(zhì)、基底膜的作用明顯，高表達(dá)的Cath-B和-D也能促使腫瘤細(xì)胞穿過破損的基底膜和基質(zhì)蛋白分界帶，從而發(fā)生侵襲轉(zhuǎn)移〔16,17〕。Cath-B、-D對E-cadherin均具有一定的調(diào)節(jié)作用，因此Cath-B、-D高表達(dá)不僅對降解細(xì)胞外基質(zhì)有作用，還能在一定程度上下調(diào)E-cadherin的活性，使上皮細(xì)胞間的黏附力下降，細(xì)胞間的連接松動，細(xì)胞易于播散和遷移〔18,19〕；但是其具體機(jī)制有待更多實(shí)驗(yàn)證實(shí)。

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〔2015-01-23修回〕

(編輯苑云杰)

10.3969/j.issn.1005-9202.2016.14.060

王曉龍(1978-)，男，碩士，副主任醫(yī)師，主要從事胃腸腫瘤治療與預(yù)防研究。

R735

A

1005-9202(2016)14-3479-03；