范國宇+劉偉

【摘要】 目的 研究G蛋白偶聯(lián)受體30（GPR30）在雌激素受體陰性乳腺癌患者乳腺病理組織中的表達(dá)情況及臨床意義。方法 123例乳腺癌患者的病理標(biāo)本， 進(jìn)行免疫組化染色， 觀察GPR30的表達(dá)情況。結(jié)果 GPR30表達(dá)于63.41%的乳腺癌患者中， ER（+）患者表達(dá)率64.29%， 其中TAM治療耐藥表達(dá)率高達(dá)69.23%。結(jié)論 GPR30在雌激素受體陰性的乳腺癌內(nèi)分泌治療中具有重要作用。

【關(guān)鍵詞】 G蛋白偶聯(lián)受體30；雌激素受體陰性乳腺癌；內(nèi)分泌治療；三陰性乳腺癌

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.21.006

【Abstract】 Objective To research expression and clinical significance by G protein-coupled receptor 30 （GPR30） in pathological breast tissue of estrogen receptor negative breast cancer patients. Methods A total of 123 pathological samples of breast cancer patients were taken into immumohistochemical staining to observe expression of GPR30. Results GPR30 was shown in 63.41% of breast cancer patients， and patients with ER（+） had expression rate as 64.29%. TAM treatment showed drug resistance expression rate as 69.23%. Conclusion GPR30 contains important effects in endocrinotherapy for estrogen receptor negative breast cancer.

【Key words】 G protein-coupled receptor 30； Estrogen receptor negative breast cancer； Endocrinotherapy； Triple-negative breast cancer

近10年來我國乳腺癌發(fā)病率增加37%， 高峰發(fā)病年齡為45～55歲， 較世界平均水平早10～15年。GPR30是G蛋白偶聯(lián)受體超家族的一員， 是由375個(gè)氨基酸組成的受體， 廣泛分布于乳腺、卵巢、肝臟等組織細(xì)胞。實(shí)驗(yàn)證明GPR30是一種新型雌激素受體[1]， 與傳統(tǒng)的雌激素受體（ER）作用方式不同， 它能參與表皮生長因子受體（EGFR）、ER等信號的傳導(dǎo)通路， 與乳腺癌的細(xì)胞增殖、轉(zhuǎn)移、侵犯密切相關(guān)[2， 3]。本研究應(yīng)用免疫組織化學(xué)技術(shù)觀察GPR30在乳腺癌患者乳腺病理組織中的表達(dá)和分布規(guī)律， 闡明GPR30的表達(dá)情況及臨床意義， 報(bào)告如下。

1 材料與方法

1. 1 材料 收集本院2005 ～2012年病理診斷為乳腺癌的123例患者的病理標(biāo)本， 平均隨訪48個(gè)月， 其中ER（+）70例， 他莫昔芬（TAM）口服2年發(fā)現(xiàn)復(fù)發(fā)和（或）轉(zhuǎn)移26例；ER（-）

53例， 其中三陰性29例。常規(guī)石蠟包埋、免疫組化染色。

1. 2 判定標(biāo)準(zhǔn) 參照ER免疫組化評分系統(tǒng)[4]， 每張切片選取5個(gè)高倍視野進(jìn)行記數(shù)， 陽性細(xì)胞的百分率（A）：<1% 1分；1%～10% 2分；11%～33% 3分；34%～66% 4分；67%～100% 5分。染色程度（B）：全部細(xì)胞陰性為0分；染色細(xì)胞弱陽性為1分；中等陽性為2分；強(qiáng)陽性為3分；（A）+（B）總和5～8分為抗原陽性， 不足為陰性。

1. 3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

GPR30表達(dá)于63.41%的乳腺癌患者中， ER（+）患者表達(dá)率64.29%， 其中TAM治療耐藥表達(dá)率高達(dá)69.23%， 與TAM治療繼續(xù)的患者（22.73%）比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P<0.01）， 提示GPR30在TAM治療耐藥中有意義。ER（-）患者表達(dá)率62.26%， 與ER（+）患者表達(dá)率比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）， 提示GPR30與ER在乳腺癌患者的表達(dá)相互獨(dú)立。在三陰性乳腺癌中， GPR30的表達(dá)率高于乳腺癌（P<0.01）。見表1。

3 討論

雌激素在乳腺癌的發(fā)生發(fā)展過程中有重要作用， 雌激素水平增高預(yù)示著乳腺癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)增加， 針對雌激素的內(nèi)分泌治療可降低乳腺癌患者復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)[5-8]。GPR30能夠激活EGFR、Ca2+、環(huán)磷酸腺苷（cAMP）等信使介導(dǎo)的系列性雌激素效應(yīng)， 與ER的作用方式不同， 可獨(dú)立作用， 在部分組織細(xì)胞中， GPR30與ER有協(xié)同表達(dá)現(xiàn)象[9]， 而在單獨(dú)表達(dá)其中一者的細(xì)胞， 也能介導(dǎo)雌激素效應(yīng)。本研究中GPR30在ER（+）患者表達(dá)率64.29%， ER（-）患者表達(dá)率62.26%， 支持兩者相互獨(dú)立、可共同作用， 不相互依賴。臨床上近30%的ER（+）的乳腺癌患者對內(nèi)分泌治療不敏感甚至產(chǎn)生耐藥， 本研究中ER（+）患者TAM治療耐藥表達(dá)率高達(dá)69.23%， 與未耐藥患者（22.73%）有明顯差異， Ignatov等[10]已經(jīng)驗(yàn)證GPR30在他莫西芬耐藥乳腺癌細(xì)胞的耐藥機(jī)制， 經(jīng)他莫西芬處理的MCF-7細(xì)胞， 增強(qiáng)了對雌二醇（E2）的敏感度， 可提高GPR30表達(dá)， GPR30激活后反作用于EGFR， 發(fā)出細(xì)胞增殖、凋亡等信號， 在TAM耐藥機(jī)制中起到獨(dú)特作用[11]， 此時(shí)的TAM 對于GPR30則是激動(dòng)劑， 所以對于GPR30表達(dá)過高的ER（+）乳腺癌患者， 需應(yīng)用他莫昔芬治療時(shí)， 要對患者進(jìn)行全面謹(jǐn)慎的評估。三陰性類型的乳腺癌復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移率高， 生存率低， 治療手段有限， 本研究中GPR30在三陰性乳腺癌達(dá)到72.41%， 可做為預(yù)后不佳的生物指標(biāo)， 有研究應(yīng)用EGFR抑制劑AG1478， GPR30抑制劑G15等， 對GPER/EGFR信號通路進(jìn)行靶向抑制， 可顯著減少三陰性乳腺癌患者的轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)[12]， 對GPR30的靶向干預(yù)， 是尋找三陰性乳腺癌治療的研究方向。

綜上所述， GPR30在ER（+）乳腺癌TAM耐藥及三陰性乳腺癌中有著極為重要的作用， 靶向抑制GPR30信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路， 創(chuàng)造新型藥物， 將成為今后研究重點(diǎn)， 為目前的臨床治療開拓新的思路。

參考資料

[1] Revankar CM， Cimino DF， Sklar LA， et al. A transmembrane intracellular estrogen receptor mediates rapid cell signaling. Science， 2005， 307（5715）：1625-1630.

[2] Li SG， Li L. Targeted therapy in HER2-positive breast cancer. Biomed Rep， 2013， 1（4）：499-505.

[3] 秦小云， 黃巨恩， 駱耐香， 等. 大鼠杏仁體基底外側(cè)核中DA能與GABA能神經(jīng)元之間突觸關(guān)系的免疫電鏡研究. 解剖學(xué)報(bào)， 2004， 35（4）：373-377.

[4] Kang K， Lee SB， Sang HJ， et al. Tectoridin， a poor ligand of estrogen receptor alpha， exerts its estrogenic effects via an ERK-dependent pathway. Molecules & Cells， 2009， 27（3）：351-357.

[5] Thomas P， Dong J. Binding and activation of the seven-transmembrane estrogen receptor GPR30 by environ mental estrogens：a potential novel mechanism of endocrine disruption. J Steroid Biochem Mol Biol， 2006， 102（1-5）：175-179.

[6] Bologa CG， Revankar CM， Young SM， et a1. Virtual and biomolecular screening converge on a selective agonist for GPR30. Nat Chem Biol， 2006， 2（4）：207-212.

[7] Otto C， Rohde-Schulz B， Schwarz G， et al. G protein-coupled receptor 30 localizes to the endoplasmic reticulum and is not activated by estradiol. Endocrinology， 2008， 149（10）：4846-4856.

[8] Carmeci C， Thompson DA， Ring HZ， et al. Identification of a Gene （GPR30） with homology to the G-protein-coupled receptor super family associated with estrogen receptor expression in breast cancer. Genomics， 1997， 45（3）：607-617.

[9] Prossnitz ER， Maggiolini M. Mechanisms of estrogen signaling and gene expression via GPR30. Mol Cell Endocrinol， 2009， 24， 308（1-2）：32-38.

[10] Ignatov A， Ignatov T， Roessner A， et al. Role of GPR30 in the mechanisms of tamoxifen resistance in breast cancer MCF-7 cells. Breast Cancer Res Treat， 2010， 123（1）：87-96.

[11] Elbaz M， Nasser MW， Ravi J， et al. Modulation of the tumor microe?nvironment and inhibition of EGF/EGFR pathway： novel anti-tumor mechanisms of cannabidiol in breast cancer. Mol Oncol， 2015， 9（4）：906-919.

[12]Yu T， Liu M， Luo H， et al. GPER mediates enhanced cell viability and motility via non-genomic signaling induced by 17β-estradiol in triple-negative breast cancer cells. J Steroid Biochem Mol Biol， 2014（143）：392-403.

[收稿日期：2016-03-07]