李蘭進(jìn),　國立耘,　王蒙蒙

(中國農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院, 北京　100193)

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戊唑·多菌靈·乙膦鋁乳膠液對蘋果枝干輪紋病的防治效果

李蘭進(jìn),國立耘*,王蒙蒙

(中國農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院, 北京100193)

近年,在矮砧密植蘋果園發(fā)現(xiàn)苗木栽植后幼樹主干上的枝干輪紋病發(fā)生嚴(yán)重,急需有效的防治方法。針對生產(chǎn)中的需求,本研究對幼樹枝干輪紋病的防治方法進(jìn)行了探索,結(jié)果顯示:用乳膠液配制的戊唑·多菌靈·乙膦鋁混合劑對枝干輪紋病防治效果顯著高于同種藥劑的水溶液,對剪鋸口枝干輪紋病防治效果可達(dá)63.7%～100%,是藥劑水溶液防效的2～3倍;生長季施用2次,對枝干輪紋病病斑的鏟除率為45.2%,是藥劑水溶液防效的9.6倍以上。結(jié)果表明,戊唑·多菌靈·乙膦鋁乳膠液對枝干輪紋病防治效果顯著,可以用于苗木剪鋸口的防護(hù),以及新建果園中幼樹枝干輪紋病的治療。研究結(jié)果為生產(chǎn)中幼樹枝干輪紋病的防治提供了有效的方法。

蘋果枝干輪紋病;殺菌劑;白乳膠

蘋果輪紋病,又名粗皮病,在我國各蘋果產(chǎn)區(qū)均有發(fā)生,主要危害蘋果果實(shí)和枝干,引起蘋果果實(shí)腐爛,枝干形成瘤狀突起、粗皮、潰瘍和干腐等癥狀,是影響蘋果品質(zhì)和產(chǎn)量的重要病害之一[1]。唐唯等的研究已證明蘋果輪紋病與蘋果干腐病是同一種病害的不同表現(xiàn),與在歐美等地發(fā)生的蘋果白腐病(apple white rot)也是同一種病害[2]。近年來,隨著果實(shí)套袋技術(shù)的普遍應(yīng)用,蘋果果實(shí)輪紋病明顯減輕,但枝干輪紋病發(fā)生嚴(yán)重[3],該病在山東和河南兩省的發(fā)病率高達(dá)100%[4]。對于蘋果枝干輪紋病的防治,通常建議采取栽培措施和藥劑保護(hù)相結(jié)合的策略,在加強(qiáng)栽培管理、增強(qiáng)樹勢的基礎(chǔ)上,進(jìn)行化學(xué)藥劑防治[5-6]。

近年來,蘋果矮化栽培模式在我國各地開始推廣。但是在矮砧密植園的建設(shè)中,幼樹上的枝干輪紋病在各地普遍發(fā)生。2013年,李保華等對7 省市16 縣區(qū)的23 個(gè)蘋果矮砧密植園的進(jìn)行了調(diào)查,結(jié)果顯示矮砧密植園中枝干輪紋病的病株率平均高達(dá)64.3%。不僅環(huán)渤海灣種植區(qū)發(fā)生嚴(yán)重,而且有向黃土高原種植區(qū)蔓延的態(tài)勢[7]。生產(chǎn)中急需針對幼樹枝干輪紋病的簡便、有效的防治方法。

田間調(diào)查發(fā)現(xiàn),輪紋病菌易從嫁接口處侵入,嫁接剪口處的殘樁被侵染后產(chǎn)生干腐癥狀病斑,在干旱缺水時(shí)干腐病斑容易蔓延,造成地上部萎蔫至枯死[8],同時(shí),苗木嫁接口上的干腐病斑在條件適宜時(shí)可以釋放出大量孢子,成為后續(xù)的侵染源[9],使部分苗木的主干在栽植后不久就已出現(xiàn)輪紋病瘤。趙旭等發(fā)現(xiàn)春季修剪形成的剪口在2個(gè)月內(nèi)對輪紋病菌都較為敏感,夏秋季節(jié)形成的剪口在2周內(nèi)對輪紋病菌感病性強(qiáng),2周后抗病性逐漸增強(qiáng)[8]。另外,在春季缺水的條件下,幼樹皮層潛伏侵染的病菌擴(kuò)展引起枝條皮層枯死,引起干腐。

本研究試圖通過在常用殺菌劑中添加黏稠劑提高對枝條剪鋸口的保護(hù)效果和對蘋果枝干輪紋病病斑或病瘤的治療效果，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1　材料與方法

1.1材料

菌種:試驗(yàn)所用菌株ZY7為單孢菌株,2007年從山東省招遠(yuǎn)市‘富士’蘋果枝干輪紋病病瘤上分離獲得,鑒定為Botryosphaeriadothidea,保存在中國農(nóng)業(yè)大學(xué)植物病理學(xué)真菌實(shí)驗(yàn)室。

供試植株:中國農(nóng)業(yè)大學(xué)上莊試驗(yàn)站果園的7年生‘富士’蘋果喬化植株,用于枝干剪鋸口藥劑預(yù)防試驗(yàn);北京市昌平區(qū)果樹研究所的9年生‘富士’矮化植株和陜西千陽縣果園3年生‘富士’矮化植株,用于枝干輪紋病的治療試驗(yàn)。

藥劑: 30%戊唑·多菌靈懸浮劑,江蘇龍燈化學(xué)有限公司,800倍液;60%唑醚·代森聯(lián)水分散粒劑,德國巴斯夫公司,1 000倍液;80%三乙膦酸鋁水分散粒劑,浙江世佳科技有限公司,200倍液;聚醋酸乙烯酯乳劑,三棵樹涂料股份有限公司,1.2倍液,按表1所示配制混配藥劑。

表1　混配劑中各藥劑的濃度Table 1　Treatments and concentration used in management trial

1.2方法

1.2.1藥劑對剪鋸口的保護(hù)效果

2014年,在上莊試驗(yàn)站果園,選取7年生‘富士’蘋果喬化植株進(jìn)行試驗(yàn),共設(shè)戊唑·多菌靈·乙膦鋁水溶液、戊唑·多菌靈·乙膦鋁乳膠液、唑醚·代森聯(lián)水溶液、唑醚·代森聯(lián)乳膠液、乳膠液、空白對照,6個(gè)處理。選用一年生枝條,在距基部約25 cm處剪斷,用PVC膠帶對新鮮剪口標(biāo)記。在產(chǎn)生剪口1 d后,分別用上述不同的藥劑對剪口進(jìn)行蘸藥保護(hù)。具體做法為:將剪口浸入藥液中1 cm左右,持續(xù)2 s。施藥2 d后,用ZY7菌株的菌餅接種已涂藥保護(hù)的剪口,脫脂棉保濕,并用封口膜包扎,接種3 d后解去封口膜和保濕棉球。試驗(yàn)重復(fù)2次,分別于2014年5月和6月各1次,每次重復(fù)設(shè)3個(gè)小區(qū),采用隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì),每個(gè)小區(qū)6個(gè)處理,每個(gè)處理8個(gè)剪鋸口。

2014年10月、11月分別剪取帶有2014年5月、6月處理的剪鋸口的枝段,長度6～8 cm,豎直插入保鮮盒中已滅菌的濕潤沙土里,處理一端枝條朝上用保鮮膜覆蓋以保持盒內(nèi)的濕度,26℃溫箱中培養(yǎng),及時(shí)補(bǔ)水保濕。一周后,檢查剪口端是否出現(xiàn)干腐病斑,出現(xiàn)干腐病癥狀的剪鋸口計(jì)作已被侵染的剪鋸口。對無法確定是否被侵染的剪鋸口枝段進(jìn)行病原分離:從剪口處剪取3個(gè)小塊,表面消毒后進(jìn)行組織分離,根據(jù)所形成菌落,判定剪鋸口內(nèi)是否帶有輪紋病菌,若帶菌則認(rèn)為該剪鋸口已被侵染。

根據(jù)剪鋸口干腐癥狀檢測與分離培養(yǎng)結(jié)果,計(jì)算每個(gè)小區(qū)中每處理的剪鋸口侵染率和各處理的防治效果:

剪鋸口侵染率(%)=(被侵染的剪鋸口數(shù)/接種剪鋸口數(shù))×100;

平均防效(%)=(1-處理剪鋸口平均侵染率/空白對照剪鋸口平均侵染率)×100。

對數(shù)值進(jìn)行反正弦轉(zhuǎn)換,使其服從正態(tài)分布。通過方差分析來評價(jià)不同處理間的差異顯著性,P≤0.05認(rèn)為有顯著性差異。方差分析在SPSS 17.0完成。

1.2.2重刮皮后涂藥的鏟除效果

2014年6月,在昌平果樹所選擇9年生‘富士’矮化植株上發(fā)病程度一致且較重的主干,對病斑進(jìn)行重刮皮后,涂刷不同的藥劑戊唑·多菌靈·乙膦鋁水溶液、戊唑·多菌靈·乙膦鋁乳膠液、唑醚·代森聯(lián)水溶液、唑醚·代森聯(lián)乳膠液和空白對照,共5個(gè)處理(表1)。約2個(gè)月后再次涂刷相應(yīng)的藥劑,每隔2個(gè)月觀察記錄1次治療效果。試驗(yàn)在同一果園的不同地塊重復(fù)2次(2014年6月-2015年3月),每次重復(fù)設(shè)3個(gè)小區(qū),采用隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì),每個(gè)小區(qū)內(nèi)設(shè)5個(gè)處理,每個(gè)處理6個(gè)病斑。

2015年3月底,采用病原分離鑒定法,對昌平果樹所的2次試驗(yàn)刮治的病斑治療效果進(jìn)行評估統(tǒng)計(jì)。由于試驗(yàn)所在地為生產(chǎn)果園,為了避免春季大面積取樣造成樹體嚴(yán)重?fù)p傷而誘發(fā)蘋果腐爛病,只選取戊唑·多菌靈·乙膦鋁水溶液,戊唑·多菌靈·乙膦鋁乳膠液,空白對照3個(gè)試驗(yàn)處理的病斑進(jìn)行病原分離。每個(gè)處理隨機(jī)選擇3個(gè)病斑,在病斑標(biāo)記區(qū)域內(nèi)取樣5份,四周和中心位置各取1塊樣品,每個(gè)樣品面積為1～2 cm2(包括韌皮部和外表皮),每個(gè)病斑樣品裝在一個(gè)小袋內(nèi),帶回實(shí)驗(yàn)室4℃保存。

病原的分離與鑒定:切取病斑韌皮部2～3 mm見方的組織,表面消毒后進(jìn)行分離培養(yǎng)、純化,根據(jù)菌落和孢子形態(tài)對分離出的病菌進(jìn)行鑒定,若能分離出輪紋病菌,則認(rèn)為該樣品帶菌。

根據(jù)分離結(jié)果,計(jì)算每個(gè)小區(qū)各處理病斑的帶菌率,進(jìn)行方差分析，并計(jì)算各處理的病菌鏟除效果。

病斑帶菌率(%)=(分離到輪紋菌的樣品數(shù)/樣品總數(shù))×100;

輪紋病菌的鏟除率(%)=(1-處理病斑平均帶菌率/空白對照病斑平均帶菌率)×100。

1.2.3刮破病瘤后涂藥的治療效果

2014年7月,在陜西千陽縣果園內(nèi)選擇發(fā)病程度一致且主干發(fā)病較重的3年生‘富士’矮化幼樹,刮破主干表面病瘤后,涂刷不同的藥劑處理，包括戊唑·多菌靈·乙膦鋁水溶液、戊唑·多菌靈·乙膦鋁乳膠液、唑醚·代森聯(lián)水溶液、唑醚·代森聯(lián)乳膠液、乳膠液和清水(表1)。約2個(gè)月后再次涂刷相應(yīng)的藥劑處理,每隔2個(gè)月觀察記錄1次治療效果。試驗(yàn)在不同地塊重復(fù)2次,每次試驗(yàn)設(shè)3個(gè)小區(qū),采用隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì),每個(gè)小區(qū)設(shè)6個(gè)處理,每個(gè)處理6株發(fā)病幼樹。

2015年5月初,對兩次試驗(yàn)的病斑進(jìn)行觀察并照相。由于試驗(yàn)果園屬于企業(yè)生產(chǎn)果園,該果園樹齡只有3年,樹干較細(xì),不適宜采集樹皮樣品進(jìn)行病原分離,因此,采用觀察估算病斑愈合面積的方法,對樹體表面已刮皮涂藥病斑的愈合面積進(jìn)行估計(jì),記錄下已愈合(以內(nèi)層長出光滑新皮作為判斷愈合的標(biāo)準(zhǔn))的面積占病斑刮皮涂藥面積的百分比,計(jì)算病斑治愈率。計(jì)算各處理的病斑的平均治愈率,對其進(jìn)行方差分析。

病斑平均治愈率(%)=∑(小區(qū)內(nèi)單個(gè)處理的愈合面積百分比)/處理的重復(fù)數(shù)×100。

2　結(jié)果與分析

2.1藥劑對剪鋸口的保護(hù)效果

2014年10月,對上莊試驗(yàn)站2次試驗(yàn)的剪鋸口輪紋病(干腐癥狀)的發(fā)生情況進(jìn)行調(diào)查統(tǒng)計(jì)。在SPSS 17.0中,通過“配對樣本t檢驗(yàn)”分析,顯示兩次試驗(yàn)間剪鋸口侵染率檢驗(yàn)的P值為0.023<0.05,因此拒絕原假設(shè),認(rèn)為兩次試驗(yàn)之間差異較大,因而不能將兩次數(shù)據(jù)合并,需單獨(dú)進(jìn)行分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn),2次試驗(yàn)的各小區(qū)之間無顯著性差異。第1次試驗(yàn)中,5種藥劑處理的剪鋸口帶菌率均顯著低于空白對照,其中,戊唑·多菌靈·乙膦鋁乳膠液處理的侵染率最低,防效最高，達(dá)100%(表2);第2次試驗(yàn)中,除戊唑·多菌靈·乙膦鋁水溶液、唑醚·代森聯(lián)水溶液和乳膠液外,其他2種藥劑處理(戊唑·多菌靈·乙膦鋁乳膠液和唑醚·代森聯(lián)乳膠液)的剪鋸口侵染率均顯著低于空白對照,其中,戊唑·多菌靈·乙膦鋁乳膠液處理的侵染率最低,防效高達(dá)63.7%(表2)。

表2　蘋果枝干剪鋸口涂藥對輪紋病菌侵染的預(yù)防效果1)Table 2　Efficacy of several fungicide mixtures on preventing the apple ring rot happening on pruning wounds

1) 表中數(shù)據(jù)為平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤,同列數(shù)據(jù)后的小寫字母表示在α=0.05水平下差異的顯著性。下面表格與此表示方法相同。

Data in table are mean±SE, lowercase letters in the same column mean the significance of difference at the 0.05 level. The representing method in subsequent tables are same as this.

2.2重刮皮后藥劑對蘋果輪紋病的治療效果

2015年3月,對成齡樹上進(jìn)行的兩次試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行了調(diào)查,發(fā)現(xiàn)不同處理的病斑表面呈現(xiàn)出不同的特征:涂刷戊唑·多菌靈·乙膦鋁乳膠液的病斑表面呈現(xiàn)出良好的愈合效果,粗皮開裂并部分脫落,內(nèi)層長出光滑健康新皮(圖1b);涂刷戊唑·多菌靈·乙膦鋁水溶液和唑醚·代森聯(lián)水溶液的病斑,表面原有粗皮部分縱向開裂,但沒有脫落(圖1a,c);涂刷清水的空白對照表面,粗皮開裂,但內(nèi)層長出的新皮表面粗糙發(fā)黑,疑似為新的輪紋病菌侵染所致(圖1e)。

圖1　殺菌劑對蘋果枝干輪紋病的治療效果(昌平果樹所刷藥處理9個(gè)月后)Fig.1　Treatment effect of fungicides on Botryosphaeria dothidea (9 months post treatment in Changping, Beijing)

對病斑進(jìn)行了取樣和病原菌的分離鑒定。在SPSS 17.0中,通過“配對樣本t檢驗(yàn)”分析,顯示兩次試驗(yàn)間病斑侵染率檢驗(yàn)的P值為0.131>0.05,因此接受原假設(shè),認(rèn)為兩次試驗(yàn)之間差異不顯著,因而可以將兩次數(shù)據(jù)進(jìn)行合并分析。結(jié)果顯示,戊唑·多菌靈·乙膦鋁乳膠液處理的病斑侵染率顯著低于戊唑·多菌靈·乙膦鋁水溶液和空白對照的病斑侵染率,戊唑·多菌靈·乙膦鋁水溶液與空白對照之間差異不顯著(表3)。結(jié)果表明戊唑·多菌靈·乙膦鋁乳膠液涂刷病斑2次,對輪紋病菌有明顯的鏟除效果(表3)。

表3　幾種殺菌劑混配液對周皮內(nèi)輪紋病菌的鏟除效果Table 3　Efficacy of several fungicide mixtures on eradicatingBotryosphaeria dothidea in periderm of apple trunk

2.3試驗(yàn)藥劑對陜西千陽縣果園蘋果幼樹枝干輪紋病的治療效果

2015年5月初,對陜西千陽縣基地的兩次試驗(yàn)的病樹進(jìn)行觀察,各處理的癥狀見圖2a～f。涂刷戊唑·多菌靈·乙膦鋁乳膠液的病斑呈現(xiàn)外層病斑表皮脫落,內(nèi)層長出光滑健康新皮,愈合率最高(如圖2b),而涂刷唑醚·代森聯(lián)乳膠液的病斑表皮雖然也有部分脫落,但內(nèi)層長出的新皮仍然粗糙,呈現(xiàn)出枝干輪紋病發(fā)病癥狀(如圖2d),涂刷加乳膠液藥劑的病斑粗皮開裂,但并不脫落(如圖2e),其他處理的效果不明顯(如圖2a,c,f)。

圖2　殺菌劑對蘋果枝干輪紋病的治療效果(陜西千陽縣基地刷藥處理10個(gè)月后)Fig.2　Treatment effect of fungicides on ring rot on apple branches (10 months post treatment in Qianyang County, Shaanxi Province)

根據(jù)目測估算的病斑愈合面積計(jì)算各處理幼樹的病斑治愈率并進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)分析。在SPSS 17.0中,通過“配對樣本t檢驗(yàn)”分析,顯示兩次試驗(yàn)間病斑治愈率檢驗(yàn)的P值為1.399>0.05,因此接受原假設(shè),認(rèn)為兩次試驗(yàn)之間差異不大,因而可以將兩次數(shù)據(jù)進(jìn)行合并分析。結(jié)果顯示,區(qū)組之間的差異均不顯著,戊唑·多菌靈·乙膦鋁乳膠液的治療效果最優(yōu),顯著優(yōu)于其他藥劑處理(表4)。

表4　幾種殺菌劑混配液對幼樹枝干輪紋病的治療效果Table 4　Control effect of several fungicide mixtures on ring rot on trunks of young apple trees

3　討論

田間試驗(yàn)結(jié)果顯示,在所測試的幾種處理中,戊唑·多菌靈·乙膦鋁乳膠液對枝條上剪鋸口的保護(hù)作用和對枝干輪紋病的治療作用顯著優(yōu)于同種藥劑的水溶液,能有效保護(hù)剪鋸口，可用于枝干輪紋病的預(yù)防與治療。試驗(yàn)中所用的藥劑都是在前期研究中篩選出的對輪紋病有較好防效的藥劑。蘋果輪紋病的分生孢子和子囊孢子的釋放和傳播都需要雨水,我國大部分主產(chǎn)區(qū)夏季高溫多雨給輪紋病的發(fā)生提供了適合的條件,因此延長藥劑在枝干上持續(xù)時(shí)間是防治枝干輪紋病的關(guān)鍵。白乳膠在日常生活中作為黏合劑使用,與藥劑混合后涂刷在樹體上,能夠形成一層薄膜附著在樹體表面,增加了藥劑的黏合程度,使得藥劑很難被雨水沖刷掉,延長了持效期,是戊唑·多菌靈·乙膦鋁乳膠液防效顯著高于其水溶液的主要原因。

在測試藥劑對剪鋸口保護(hù)效果試驗(yàn)中,相同藥劑處理下,第1次試驗(yàn)剪鋸口侵染率普遍低于第2次試驗(yàn),分析可能原因如下:(1)第1次試驗(yàn)時(shí),由于缺乏經(jīng)驗(yàn),枝條接種方法的掌握不熟練,導(dǎo)致部分枝條接種不成功;(2)兩次試驗(yàn)的接種時(shí)間前后相差1個(gè)月,第2次接種時(shí),氣溫較高,更適合枝干輪紋病菌侵染和擴(kuò)展,可能是導(dǎo)致第2次試驗(yàn)剪鋸口帶菌率高于第1次帶菌率的主要原因。

試驗(yàn)結(jié)果也顯示,對于樹齡較大的蘋果樹枝干輪紋病斑,刮除老翹皮后涂刷戊唑·多菌靈·乙膦鋁乳膠液,能達(dá)到很好的治療效果?？紤]到刮除老翹皮和涂刷樹干的勞動(dòng)強(qiáng)度大,今后可考慮使用電動(dòng)刮皮刀,和進(jìn)一步優(yōu)化配比使用電動(dòng)噴涂機(jī)進(jìn)行操作。此外,由于不同廠家生產(chǎn)的白乳膠也可能對藥效有影響。后期還需要對不同品牌的白乳膠和不同黏著劑進(jìn)行測試,篩選更加環(huán)保和高效的藥劑負(fù)載劑。

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(責(zé)任編輯：田喆)

Control effect of the mixture of tebuconazole and carbendazim fosetyl-aluminium with latex on ring rot on apple branches

Li Lanjin,Guo Liyun,Wang Mengmeng

(College of Plant Protection, China Agricultural University, Beijing100193, China)

Apple ring rot caused byBotryosphaeriadothideais one of the most important diseases in apple production in China. In recent years, outbreak of this disease on trunk of newly planted apple trees was observed in many places in newly established apple orchards. Therefore, effective control measures for this disease are highly demanded. In this study, we tested the control efficacy of fungicides with or without adding latex on this disease on apple branches in field trials. The results showed that the treatment of mixture containing tebuconazole and carbendazim fosetyl-aluminium with latex had significantly high prevention efficacy on pruning wounds and significantly high eradication efficacy forB.dothidea, which was 2-3 times as high as the treatment of the same fungicide without latex. Results of this study also showed that applying this chemical mixture with latex on diseased trunk yield an average eradication rate of 45.2%， which was 9.6 times as high as the treatment of the same fungicide without the latex. In conclusion, results of this study showed that the chemical mixture of tebuconazole and carbendazim fosetyl-aluminium with latex has good control effect to apple ring rot and it can be used to protect the pruning wounds and to control the ring rot disease on trunk of young trees. This study provides an effective method for controlling ring rot on pruning wounds and on trunk and branches of young apple trees.

ring rot on apple branches;fungicide;latex

2015-07-02

2015-11-07

國家現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系(CARS-28)

E-mail: ppguo@cau.edu.cn

S 436.611.19

B

10.3969/j.issn.0529-1542.2016.02.046

致謝：感謝現(xiàn)代蘋果產(chǎn)業(yè)體系北京昌平綜合試驗(yàn)站和海升現(xiàn)代蘋果陜西千陽縣示范園區(qū)在提供試驗(yàn)條件方面的幫助。