楊　莉　張　強　陳　明*　于　坤

563003　貴州省 遵義醫(yī)學院附屬醫(yī)院產(chǎn)科

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犬尿氨酸/色氨酸比值與妊娠期高血壓疾病的相關性研究▲

楊莉張強陳明*于坤

563003貴州省 遵義醫(yī)學院附屬醫(yī)院產(chǎn)科

目的探討妊娠期高血壓疾病與犬尿氨酸(Kyn)、色氨酸(Trp)、尿氨酸/色氨酸比值的相關性，為妊娠期高血壓疾病嚴重程度的判定提供一種監(jiān)測指標。方法采用反相高效液相色譜紫外法測定血漿色氨酸及犬尿氨酸的含量,并分析其與妊娠期高血壓疾病比值。結(jié)果血漿Kyn/Trp比值在正常妊娠婦女為0.281±0.047,妊娠期高血壓婦女為0.273±0.053,子癇前期輕度婦女為0.178±0.054,子癇前期重度婦女為0.140±0.043。子癇前期輕度、重度婦女血漿Kyn/Trp比值較正常妊娠、妊娠期高血壓婦女明顯降低(P<0.01)；子癇前期重度婦女血漿Kyn/Trp比值較輕度婦女明顯降低(P<0.05)；正常妊娠、妊娠期高血壓婦女血漿Kyn/Trp比值無明顯差異(p>0.05)。犬尿氨酸和妊娠期高血壓疾病嚴重程度呈明顯負相關(R=-0.0776，P<0.01)，色氨酸和妊娠期高血壓疾病嚴重程度無相關性(R=-0.033，p=0.805)，犬尿氨酸/色氨酸比值和妊娠期高血壓疾病嚴重程度呈明顯負相關(R=-0.0751,P<0.01)。結(jié)論(1)血漿Kyn及Kyn/Trp比值與妊娠期高血壓疾病的嚴重程度有關。(2)妊娠期高血壓疾病越嚴重，血漿Kyn、Kyn/Trp比值越小。提示血漿Kyn、Kyn/Trp比值可能成為我們臨床上判斷妊娠高血壓疾病嚴重程度的參考指標之一。

妊娠期高血壓疾??；嚴重程度；相關性

妊娠期高血壓疾病(pregnancy-induced hypertension syndrome,PIH)是妊娠20周以后出現(xiàn)的高血壓、水腫、蛋白尿三大癥候群,嚴重時可出現(xiàn)抽搐、昏迷、心腎功能衰竭甚至發(fā)生母嬰死亡。因此加強對PIH的認識,了解某些因素對PIH的影響,對今后預防PIH的發(fā)生、減少孕產(chǎn)婦及圍生兒死亡及指導臨床實踐有重要的意義[1]。現(xiàn)對本院2013年10月至2014年10月產(chǎn)科住院產(chǎn)婦60例為研究對象，其研究結(jié)果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇本院產(chǎn)科住院產(chǎn)婦60例患者。并分為4組，每組各15例，即正常妊娠組：平均年齡26.9歲；妊娠期高血壓組：平均年齡27.3歲，孕周37-39周，妊娠期首次出現(xiàn)血壓≥140/90mmHg，尿蛋白(-)；子癇前期輕度組：平均年齡28.2歲，孕周36-39周，妊娠20周以后出現(xiàn)血壓≥140/90mmHg，尿蛋白(+)或24小時尿蛋白定量≥0.3g；子癇前期重度組：平均年齡27.9歲，孕周36-39周，血壓≥160/110 mmHg；尿蛋白(+++)或24小時尿蛋白定量≥5.0g(以上標準按照《婦產(chǎn)科學》第八版)[2]。所有病例排除以下情況：雙胎妊娠，各種神經(jīng)精神疾病、肝腎功能衰竭、白內(nèi)障、糖尿病等并發(fā)癥及其它妊娠期合并癥。各組的組間孕婦年齡、孕周及初產(chǎn)婦比例分別經(jīng)卡方檢驗和方差分析，差異均無統(tǒng)計學意義(p>0.05)，因此組間年齡、孕周及初產(chǎn)婦比例差異不會對試驗結(jié)果造成影響。

1.2 標本收集和處理 清晨空腹靜脈血2ml，以12000×g4℃離心后取抗凝血漿105μL加入26μL20%HCLO4溶液，混勻1min，靜置10min，再以12000×g4℃離心10min，靜置后取上清液20μL進樣分析。

1.3 色譜分析條件 色譜柱：ZORBA×SB-C18(150mm×4.6mm,5?m)；檢測波長：245nm；流動相：水(含0.001mol/L KH2PO4)：甲醇=90:10；流速：1ml/min；柱溫：25℃。1.4 統(tǒng)計學分析 采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)處理，分別對正常妊娠組、妊娠期高血壓組、子癇前期輕度組、子癇前期重度組年齡及孕齡進行卡方檢驗和t 檢驗，色氨酸、犬尿氨酸的含量以及犬尿氨酸/色氨酸比值的比較使用方差分析; 犬尿氨酸/色氨酸比值和妊娠期高血壓疾病嚴重程度的相關性采用多因素方差分析，得出P值和線性相關系數(shù)(R2)；采GraghPad4.0軟件包制作犬尿氨酸/色氨酸比值的散點圖。

2 結(jié)果

2.1 同時定量檢測各組孕婦血漿中色氨酸和犬尿氨酸含量，計算犬尿氨酸/色氨酸比值：Kyn和Trp保留時間分別為4.2±0.1min和8.8±0.1min，兩者分離良好，且血清內(nèi)源性物質(zhì)對待測組分的分離無干擾(見圖1，圖2)。

圖1犬尿氨酸和色氨酸標準品色譜圖

圖2孕婦血漿中犬尿氨酸和色氨酸色譜檢測圖

正常妊娠組、妊娠期高血壓組、子癇前期輕度組、子癇前期重度組Kyn和Trp含量組間差異無統(tǒng)計學意義( P>0.05)；子癇前期輕度組、子癇前期重度組血漿Kyn/Trp比值較正常妊娠組、妊娠期高血壓組明顯降低(P<0.01)，且子癇前期重度組血漿Kyn/Trp比值較子癇前期輕度組進一步降低(P<0.05)；正常妊娠組與妊娠期高血壓組比較血漿Kyn/Trp比值無明顯差異(P>0.05)。見表1

表1 血漿樣品中Kyn和Trp濃度(μg/mL)及比值

注：與NP組比較，*P<0.01;與GH組比較，#P<0.01；與PM組比較，▲P<0.05

2.2 犬尿氨酸、色氨酸、犬尿氨酸/色氨酸比值和妊娠期高血壓疾病嚴重程度的相關性分析 犬尿氨酸和妊娠期高血壓疾病嚴重程度呈明顯負相關(R=-0.0776，P<0.01)，色氨酸和妊娠期高血壓疾病嚴重程度無相關性(R=-0.033，p=0.805)，犬尿氨酸/色氨酸比值和妊娠期高血壓疾病嚴重程度呈明顯負相關(R=-0.0751,P<0.01)。

3 討論

人體的肝臟以外唯一催化色氨酸沿犬尿酸途徑分解代謝的限速酶是IDO。IDO通過降解淋巴組織及胎盤組織中的色氨酸,誘導母胎間的免疫耐受[3]。近來有學者研究發(fā)現(xiàn)，滋養(yǎng)細胞可功能性地表達IDO，IDO介導Trp降解同時也是滋養(yǎng)細胞條件培養(yǎng)基中Trp降解的主要途徑(占76%)。由于在滋養(yǎng)層和胎盤組織中同時存在IDO, 在早孕期的滋養(yǎng)細胞中也表達[4]，人孕卵一旦著床且與母體血供建立,胎盤組織分泌的胎兒細胞即能產(chǎn)生IDO,意味著孕婦血中Trp代謝變化在妊娠的第一周就可發(fā)生,妊娠婦女血漿Kyn/Trp比值顯著高于非妊娠婦女。Wang等的研究證明Kyn有較強的擴血管作用，降低自發(fā)性高血壓大鼠的平均動脈壓，通過藥物抑制IDO活性，Kyn濃度降低，實驗動物的血壓即開始增加[5]。

本研究同時顯示：在子癇前期時，血漿Kyn/Trp比值明顯低于正常妊娠者，子癇前期重度者(PS組)明顯低于子癇前期輕度(PM組)、妊娠期高血壓者(GP組)，而PM組低于GP組。血漿Kyn/Trp比值與妊娠期高血壓疾病的嚴重程度密切相關。妊娠期高血壓疾病病情越嚴重，血漿Kyn/Trp比值越小，原因可能是子癇前期，尤其是在子癇前期重度時，IDO的活性明顯下降，Trp代謝顯著減弱，母胎免疫失衡，排斥反應增強。據(jù)此臨床上可測定血漿Kyn/Trp比值的變化判斷妊娠高血壓疾病的嚴重程度。

具備高危因素的孕婦，在產(chǎn)前檢查時定期檢測血漿中的Kyn、Trp值，可早期識別該疾病的嚴重程度，及時防治妊娠期高血壓疾病的并發(fā)癥及后遺癥，降低孕產(chǎn)婦、圍生兒病死率。降低對家庭和社會帶來的巨大經(jīng)濟負擔。提高圍產(chǎn)兒的生存質(zhì)量。高效液相色譜法操作簡便，分析時間短，特異性高，準確度高，線性范圍較寬，檢測限較低，推薦應用于臨床檢驗。通過測定Kyn/Trp的比值判斷妊娠期高血壓疾病的嚴重程度提供良好的檢測指標。對子癇前期患者在不同的發(fā)病孕周及產(chǎn)后血漿中該比值的變化有待今后大樣本，多中心聯(lián)合基礎上進一步研究

[1] Hao K H,Zhou Q,Chen W,et al.Possible role of the ‘IDO-AhR axis’ in maternal-fortal tolerance[J]. CellBiology International,2013,37(2):105-108.

[2]謝幸，茍文麗.婦產(chǎn)科學[M].北京:人民衛(wèi)生出版社，2013:64-71.

[4]Mcgaha T L,Huang L,Lemos H, et al.Amino acid catabolism:a pivotal regulator of innate and adaptive immunity[J]. Immunological Reviews,2012,249(1):135-157.

[5]Wang Y,Liu H,Mckenzie G,et al.Kynurenine is an endothelium-derived relaxing factor produced during inflammation[J].Nat Med,2010,16(3):279-285.

[6]Dürr S,Kindler V.Implication of indolamine 2,3dioxygenase in the tolerance toward fetuses,tumors,and allografts[J].Journal of Leukocyte Biology,2013,93(5):681-687.

貴州省遵義市紅花崗區(qū)科學技術項目(遵紅科合社字(2011)17號)

10.3969/j.issn.2095-9559.2016.04.046

2095—9559(2016)04—2370—02

2015-10-30

*為通訊作者