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[摘要]目的 本研究旨在進一步研究闡明腫瘤相關(guān)巨噬細胞特異性標(biāo)志物CD68相對表達量與卵巢癌發(fā)生發(fā)展及預(yù)后的關(guān)系。方法 納入我院2012年1月～2015年1月卵巢癌手術(shù)切除患者的病例樣本共計48例，對這48例卵巢癌病例采用逆轉(zhuǎn)錄實時定量聚合酶鏈反應(yīng)RT-PCR的方法對腫瘤相關(guān)巨噬細胞特異性標(biāo)志物CD68的相對表達量進行檢測。結(jié)果 腫瘤相關(guān)巨噬細胞特異性標(biāo)志物CD68相對表達量與患者的年齡、分化程度、腫瘤侵襲深度及瘤組織大小、是否轉(zhuǎn)移等并不存在相關(guān)性（P>0.05）；而淋巴受累方面，淋巴受累組的腫瘤相關(guān)巨噬細胞相對表達量明顯下調(diào)（P<0.05），無淋巴受累組的相對表達量與正常組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），腫瘤相關(guān)巨噬細胞相對表達量明顯下調(diào)與淋巴結(jié)受累轉(zhuǎn)移的風(fēng)險有關(guān)；生存分析方面，腫瘤相關(guān)巨噬細胞相對表達量明顯下調(diào)的患者中生存時間較高表達的患者明顯增長。結(jié)論 腫瘤相關(guān)巨噬細胞相對表達量水平與卵巢癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及預(yù)后有著相關(guān)性。

[關(guān)鍵詞]腫瘤相關(guān)巨噬細胞；相對表達量；卵巢癌

[中圖分類號]R737.31 [文獻標(biāo)識碼]B [文章編號]2095-0616（2016）05-166-04

卵巢癌是最常見的婦科腫瘤之一，盡管對卵巢癌的診斷和治療技術(shù)不斷的提高，但是該病的預(yù)后仍不理想，早期診斷對疾病的及時發(fā)現(xiàn)及治療具有重要的臨床意義。目前認為腫瘤相關(guān)巨噬細胞在腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及預(yù)后有著相關(guān)性，為此學(xué)術(shù)界對腫瘤相關(guān)巨噬細胞進行不斷深入研究。為了探討腫瘤相關(guān)巨噬細胞與卵巢癌的相關(guān)性，我們通過對這48例卵巢癌病例采用逆轉(zhuǎn)錄實時定量聚合酶鏈反應(yīng)的方法對腫瘤相關(guān)巨噬細胞的相對表達量進行檢測，初步探討腫瘤相關(guān)巨噬細胞的表達與卵巢癌的發(fā)生發(fā)展之間的作用關(guān)系。

1資料與方法

1.1一般資料

納入我院2012年1月～2015年1月婦科行卵巢癌手術(shù)切除患者的病例樣本共計48例，年齡為42～78歲，平均（613±1.1）歲，所有的患者均為初診的患者，術(shù)前未進行任何放療、化療及分子靶向治療等，收集標(biāo)本前該臨床試驗研究通過了醫(yī)院倫理委員會的批準(zhǔn)，所有病例患者簽訂知情同意書。在術(shù)中取材之后，腫瘤的位置以病理組織報告為標(biāo)準(zhǔn)，對組織的病理學(xué)進行分型，腫瘤的浸潤程度按照國際抗癌聯(lián)盟標(biāo)準(zhǔn)分類，淋巴分化以及轉(zhuǎn)移采用的國際WHO的診斷標(biāo)準(zhǔn)進行分析判斷，對所有手術(shù)治療的患者從出院到死亡進行隨訪觀察，隨訪的時間以每月1次，最后一次隨訪時間為2015年7月25日，最長隨訪時間為3.5年，平均隨訪時間為（23±1.2）年。

1.2 RNA提取及RT-PCR反應(yīng)

對48例卵巢癌組織采用RNA提取試劑盒（美國Invitroge公司）進行RNA提取，采用TaqMan腫瘤相關(guān)巨噬細胞試劑盒（美國Santa Cruz公司）檢測腫瘤相關(guān)巨噬細胞在患者卵巢癌組織中的表達情況。

1.3統(tǒng)計學(xué)檢測

數(shù)據(jù)采用SPSS18.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行分析，對臨床病理因素之間的風(fēng)險情況采用理論Logistic回歸分析，組間比較用方差分析，組間均數(shù)比較采用t檢驗，組間率的比較用x²檢驗。運用Kaplan-Meier的生存曲線對腫瘤切除術(shù)后患者的生存情況進行分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1腫瘤相關(guān)巨噬細胞CD68的相對表達量與臨床病理特征之間的比較

48例卵巢癌組織的腫瘤相關(guān)巨噬細胞CD68的相對表達量為0.436，95%CI為0.323～0.534.表達量低于平均值的有21例，高于平均值的有27例，淋巴受累組的腫瘤相關(guān)巨噬細胞相對表達量明顯下調(diào)（P<0.05），而無淋巴受累組的相對表達量與正常組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），見表1。

2.2腫瘤相關(guān)巨噬細胞CD68相對表達量的高低與臨床病理因素之間的關(guān)系

腫瘤相關(guān)巨噬細胞相對表達量的低增加了淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的風(fēng)險，調(diào)整之后風(fēng)險的OR=5.05，95%CI為1.14～23.45，P<0.05，見表2。

2.3腫瘤相關(guān)巨噬細胞的相對表達量與預(yù)后之間的相關(guān)性

48例卵巢癌組織的腫瘤相關(guān)巨噬細胞的相對表達量為0.436，95%CI為0.323～0.534。21例腫瘤相關(guān)巨噬細胞相對表達量明顯下調(diào)的患者中生存時間為（127.34±10.90）個月，而腫瘤相關(guān)巨噬細胞高表達的患者生存時間為（69.23±12.43）個月，兩組比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（t=6.647，P=0.000），腫瘤相關(guān)巨噬細胞表達的高低與預(yù)后有著一定的相關(guān)性。

3討論

卵巢癌是來源于卵巢上皮的惡性腫瘤之一，每年我國有超過40萬的新發(fā)病例，由于早期卵巢癌發(fā)病并無明顯的臨床癥狀，大部分卵巢癌患者初次入院檢查已經(jīng)是中晚期，因此探求研究卵巢癌發(fā)病的機制具有重要的現(xiàn)實意義。通過大量的臨床研究發(fā)現(xiàn)，腫瘤相關(guān)巨噬細胞是一類在腫瘤發(fā)生及發(fā)展中發(fā)揮重要生物學(xué)效應(yīng)的分子，卵巢癌患者腹膜匯總巨噬細胞的浸潤明顯增加。目前對腫瘤組織中巨噬細胞增多的機制尚未研究清楚，發(fā)現(xiàn)了相當(dāng)多表型和功能出現(xiàn)一定的差異性。隨著生物信息學(xué)的發(fā)展，腫瘤相關(guān)巨噬細胞在腫瘤中的相關(guān)研究越來越深入，研究發(fā)現(xiàn)腫瘤相關(guān)巨噬細胞參與者各類腫瘤的生長、發(fā)育，與腫瘤細胞的增殖凋亡以及侵襲轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，涉及到各類腫瘤的發(fā)生發(fā)展，且腫瘤相關(guān)巨噬細胞的表達譜還決定著腫瘤的基因反應(yīng)，在腫瘤亞型、轉(zhuǎn)移等臨床病理因素中發(fā)揮著重要作用，尤其對于術(shù)后的生存期及預(yù)后具有一定的相關(guān)性，研究提示了腫瘤相關(guān)巨噬細胞可以用于對腫瘤預(yù)后的評估，其表達量與腫瘤的預(yù)后有著一定的相關(guān)性。

我們通過腫瘤相關(guān)巨噬細胞標(biāo)志物CD68的表達水平與卵巢癌之間的相關(guān)性分析，該分子產(chǎn)生蛋白酶和生長因子直接促進腫瘤浸潤和轉(zhuǎn)移，以往的研究發(fā)現(xiàn)腫瘤相關(guān)巨噬細胞在不同腫瘤組織中均有差異性表達，其調(diào)控功能也有所不同。文獻報道腫瘤相關(guān)巨噬細胞的下調(diào)在結(jié)腸癌、乳腺癌、宮頸癌等中具有預(yù)后判斷介質(zhì)。研究還發(fā)現(xiàn)在膀胱癌中腫瘤相關(guān)巨噬細胞表達的下調(diào)可作為膀胱癌晚期的標(biāo)志性分子。過表達的腫瘤相關(guān)巨噬細胞可以誘導(dǎo)子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生，其中對Ishikawa細胞的生長具有顯著的抑制作用，還能提高順鉑對子宮內(nèi)膜癌的細胞毒作用。腫瘤相關(guān)巨噬細胞主要通過負調(diào)控腫瘤相關(guān)巨噬細胞對整個相關(guān)基因表達體系發(fā)揮著精細調(diào)節(jié)的作用。通過負相的調(diào)控機制，促進了腫瘤的發(fā)生發(fā)展，而抑制過表達的腫瘤相關(guān)巨噬細胞，可以從而可以抑制腫瘤細胞的增殖和遷移侵襲能力。因此可以說腫瘤相關(guān)巨噬細胞在腫瘤的調(diào)控中具有重要的作用。本研究結(jié)果顯示了，淋巴受累組的腫瘤相關(guān)巨噬細胞相對表達量明顯下調(diào)，而無淋巴受累組的相對表達量與正常組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義，腫瘤相關(guān)巨噬細胞相對表達量明顯下調(diào)與淋巴結(jié)受累轉(zhuǎn)移的風(fēng)險有關(guān)；生存分析方面，腫瘤相關(guān)巨噬細胞表達的高低與預(yù)后有著一定的相關(guān)性。

綜上所述，我們發(fā)現(xiàn)腫瘤相關(guān)巨噬細胞在卵巢癌表達下調(diào)與組織分化及預(yù)后有著密切的相關(guān)性，提示腫瘤相關(guān)巨噬細胞可能與卵巢癌的轉(zhuǎn)移侵襲等影響預(yù)后的因素有關(guān)，該分子差異性表達推測可能是卵巢癌早期的潛在標(biāo)志物。