羅葵，曹麗歌，高麗芳，田蜜，崔淑香

（首都醫(yī)科大學醫(yī)學實驗與測試中心，北京100069）

紅景天片提高缺氧耐受力的功能研究

羅葵，曹麗歌，高麗芳，田蜜，崔淑香*

（首都醫(yī)科大學醫(yī)學實驗與測試中心，北京100069）

研究紅景天片提高缺氧耐受力的功能。分別用0.2、0.4、1.2 g/kg·BW（分別相當于人體推薦用量的5、10、30倍）劑量的紅景天片連續(xù)給小鼠灌胃30 d，檢驗其提高3種不同類型缺氧模型小鼠缺氧耐受力的能力。結果顯示紅景天片能夠顯著延長小鼠在常壓缺氧存活時間和急性腦缺血性缺氧（斷頭）后張口喘氣時間，對小鼠體重和小鼠在亞硝酸鈉中毒后的存活時間無影響，說明紅景天片具有提高缺氧耐受力的功能。

紅景天片；缺氧耐受力；小鼠

紅景天是景天科紅景天屬多年生草本或亞灌木植物，大多分布在北半球的高寒地帶，生長在海拔3 500 m～5 000 m左右的高山流石或灌木叢林下，為高寒無污染地帶的珍稀野生植物［1］。紅景天有抗缺氧、抗衰老、抗疲勞和抗輻射等多種作用［2-4］。

紅景天能在極其惡劣而多變的自然環(huán)境中生長［5］，惡劣的生存環(huán)境使紅景天在遺傳上具備其它其他植物所沒有的特殊物質(zhì)［2］。經(jīng)現(xiàn)代分析研究，已初步從紅景天植物中先后分離出40多種有活性的化合物，主要含有紅景天苷、黃酮類、活性酶、多糖類、揮發(fā)油和18種氨基酸等，其中，紅景天苷是紅景天苷中的主要有效成分［6］。本文使用3種不同類型的缺氧模型小鼠，對以紅景天苷為主要成分的紅景天片是否具有提高缺氧耐受功能進行研究。

1　材料與方法

1.1材料

本實驗受試物為市面購買的紅景天片，主要成分為紅景天苷（含量560 mg/100 g），輔料為糊精，成人（60 kg）口服推薦劑量為0.04 g/kg·BW。陽性對照物為銀杏葉片（銀可絡），成人口服推薦劑量為0.017 5 g/kg· BW。試驗前，用純凈水配制成所需濃度混懸液。

1.2試劑與儀器

亞硝酸鈉（分析純）：北京劉李店化工廠，批號為20030908；鈉石灰：廣東汕頭西隴化工廠，批號為051027。

TE212-L型電子天平：德國Sartorius公司；1 mL注射器：上海米沙瓦醫(yī)科工業(yè)有限公司；250 mL廣口瓶：北京玻璃儀器廠；灌胃針；秒表。

1.3實驗動物及飼養(yǎng)條件

本實驗選用SPF級ICR雌性小鼠，購自北京維通利華實驗動物技術有限公司，實驗動物生產(chǎn)許可證號為SCXK（京）2012-0001。首都醫(yī)科大學實驗動物科學部提供動物實驗室，為屏障系統(tǒng)，實驗動物使用許可證號：SYXK（京）2010-0020。室內(nèi)溫度（23±2）℃，相對濕度（50±20）%。喂飼基礎飼料，由北京科澳協(xié)力飼料有限公司提供真空包裝無菌飼料，生產(chǎn)許可證號：SCXK（京）2014-0010。

1.4方法

1.4.1實驗動物分組

實驗小鼠共180只，常壓耐缺氧實驗、亞硝酸鈉中毒存活實驗和急性腦缺血性缺氧實驗各使用60只。各實驗的小鼠按體重隨機分別分成5組，每組12只小鼠。

1.4.2常壓耐缺氧實驗

根據(jù)紅景天片人群推薦量（0.04 g/kg·BW）的5、10、30倍設3個劑量組，即0.2、0.4、1.2 g/kg·BW，以銀杏葉片人群口服用量（0.017 5 g/kg·BW）的10倍為陽性對照組，即0.175 g/kg·BW，同時設一個陰性對照組。用純水配制受試物和陽性對照物，按照0.2 mL/10g· BW的體積灌胃，連續(xù)給予受試物和陽性對照物30 d。記錄試驗期間小鼠的體重增長情況。于末次灌胃后1 h，將各組小鼠分別放入盛有5 g鈉石灰的250 mL磨口瓶（每瓶1只），用凡士林封瓶口，蓋嚴，使之不漏氣，立即計時，以呼吸停止為指標，觀察小鼠在常壓缺氧條件下的存活時間。

1.4.3亞硝酸鈉中毒存活實驗

給樣濃度和方法同常壓耐缺氧實驗。記錄實驗期間小鼠的體重增長情況。于末次灌胃后1 h，各組動物按0.24 g/kg·BW劑量腹腔注射亞硝酸鈉（注射量為0.1 mL/10 g），立即計時，記錄小鼠中毒后存活的時間。

1.4.4急性腦缺血性缺氧實驗

給樣濃度和方法同常壓耐缺氧實驗。記錄實驗期間小鼠的體重增長情況。于末次灌胃后1 h，各組小鼠自頸部逐只斷頭，立即按秒表記錄小鼠斷頭后至張口喘氣停止時間。

1.5數(shù)據(jù)統(tǒng)計

采用spss19.0軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，分別以耐缺氧時間、中毒存活時間和喘氣停止時間為計量數(shù)據(jù)，采用方差分析和組間比較，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。常壓耐缺氧實驗、亞硝酸鈉中毒存活實驗和急性腦缺血性缺氧實驗中受試樣品組與對照組比較，存活時間延長，并具有統(tǒng)計學意義，則判定該實驗結果陽性。根據(jù)《保健食品檢驗與評價技術規(guī)范（2003版）》，常壓耐缺氧實驗、亞硝酸鈉中毒存活實驗和急性腦缺血性缺氧實驗3項實驗中任2項實驗結果陽性，則判定該受試樣品具有提高缺氧耐受力功能。

2　結果

2.1對小鼠體重的影響

在本研究所包含的常壓耐缺氧實驗、亞硝酸鈉中毒存活實驗和急性腦缺血性缺氧實驗中，紅景天片對小鼠體重的影響分別見表1、表2和表3。

表1　紅景天片對常壓耐缺氧實驗小鼠體重的影響（±s）Table 1Effects of Rhodiola extract tablets on atmospheric anoxia experimental mice weight（±s）

表1　紅景天片對常壓耐缺氧實驗小鼠體重的影響（±s）Table 1Effects of Rhodiola extract tablets on atmospheric anoxia experimental mice weight（±s）

組別供試品劑量/（g/kg·BW）初體重/g終體重/g陰性對照組021.3±1.5727.9±1.90低劑量組0.221.3±1.2428.1±1.67中劑量組0.421.4±0.8927.5±1.57高劑量組1.221.4±0.9328.7±2.04陽性對照組0.17521.3±1.1029.0±3.61

表2　紅景天片對亞硝酸鈉中毒存活實驗小鼠體重的影響（±s）Table 2Effects of Rhodiola extract tablets on subjected to NaNO2experimental mice weight（±s）

表2　紅景天片對亞硝酸鈉中毒存活實驗小鼠體重的影響（±s）Table 2Effects of Rhodiola extract tablets on subjected to NaNO2experimental mice weight（±s）

組別供試品劑量/（g/kg·BW）初體重/g終體重/g陰性對照組019.1±1.0029.3±2.48低劑量組0.219.1±0.9328.6±2.80中劑量組0.419.1±0.8227.9±2.39高劑量組1.219.0±0.7227.8±2.23陽性對照組0.17519.1±0.7426.9±1.68

表3　紅景天片對急性腦缺血性缺氧實驗小鼠體重的影響（±s）Table 3Effects of Rhodiola extract tablets on acute lack of blood in brain experimental mice weight（±s）

表3　紅景天片對急性腦缺血性缺氧實驗小鼠體重的影響（±s）Table 3Effects of Rhodiola extract tablets on acute lack of blood in brain experimental mice weight（±s）

組別供試品劑量/（g/kg·BW）初體重/g終體重/g陰性對照組019.3±1.0227.3±1.50低劑量組0.219.5±1.0427.0±2.61中劑量組0.419.5±1.0927.3±2.21高劑量組1.219.5±1.0726.7±1.51陽性對照組0.17519.3±0.7927.5±2.16

由表1、表2和表3可見，在常壓耐缺氧實驗、亞硝酸鈉中毒存活實驗和急性腦缺血性缺氧實驗中，各組小鼠初始體重差異無顯著性；經(jīng)口給予ICR小鼠供試品30 d，各劑量組及陽性對照組小鼠體重與陰性對照組小鼠體重相比無顯著差異，表明紅景天片對小鼠體重增長無顯著影響。

2.2常壓耐缺氧實驗

在該實驗中，紅景天片對小鼠常壓缺氧存活時間的影響見表4。

由表4可見，經(jīng)口給予小鼠供試品30 d后，低劑量組、中劑量組及陽性對照組小鼠與陰性對照組小鼠相比，常壓缺氧存活時間有顯著差異（P＜0.05），其中，中劑量組小鼠與陰性對照組小鼠相比，常壓缺氧存活時間有非常顯著差異（P＜0.01）。實驗結果表明飼喂中劑量的紅景天片能提高小鼠常壓缺氧耐受力。

表4　紅景天片對小鼠常壓缺氧存活時間的影響（±s）Table 4Effects of Rhodiola extract tablets on mice atmospheric anoxia survival time（±s）

表4　紅景天片對小鼠常壓缺氧存活時間的影響（±s）Table 4Effects of Rhodiola extract tablets on mice atmospheric anoxia survival time（±s）

注：*與陰性對照組比較，P＜0.05，表示有顯著差異；**與陰性對照組比較，P＜0.01，表示有非常顯著差異。

組別供試品劑量/（g/kg·BW）常壓缺氧死亡時間/min陰性對照組028.76±3.18低劑量組0.235.31±9.58*中劑量組0.438.32±8.15**高劑量組1.233.25±5.34陽性對照組0.17535.53±6.47*

2.3亞硝酸鈉中毒存活實驗

在該實驗中，紅景天片對小鼠亞硝酸鈉中毒存活時間的影響見表5。

表5　紅景天片對小鼠亞硝酸鈉中毒存活時間的影響（±s）Table 5Effects of Rhodiola extract tablets on the survival time of mice subjected to NaNO2（±s）

表5　紅景天片對小鼠亞硝酸鈉中毒存活時間的影響（±s）Table 5Effects of Rhodiola extract tablets on the survival time of mice subjected to NaNO2（±s）

組別供試品劑量/（g/kg·BW）亞硝酸鈉中毒存活時/min陰性對照組021.00±4.41低劑量組0.219.66±7.23中劑量組0.421.68±5.65高劑量組1.220.02±2.82陽性對照組0.17522.46±10.58

由表5可見，經(jīng)口給予ICR小鼠供試品30 d，各劑量組及陽性對照組與陰性對照組相比，亞硝酸鈉中毒存活時間無顯著差異。表明紅景天片不能提高小鼠亞硝酸鈉中毒存活能力。

2.4急性腦缺血性缺氧實驗

在該實驗中，紅景天片對小鼠急性腦缺血性缺氧張口喘氣時間的影響見表6。

表6　紅景天片對小鼠張口喘氣時間的影響（±s）Table 6Effects of Rhodiola extract tablets on mouth breathing time after acute lack of blood in brain（±s）

表6　紅景天片對小鼠張口喘氣時間的影響（±s）Table 6Effects of Rhodiola extract tablets on mouth breathing time after acute lack of blood in brain（±s）

注：*表示與陰性對照組比較P＜0.05。

組別供試品劑量/（g/kg·BW）張口喘氣時間/min陰性對照組014.42±1.56低劑量組0.215.00±1.48中劑量組0.415.85±1.68*高劑量組1.216.54±1.51*陽性對照組0.17515.58±1.44

由表6可見，經(jīng)口給予小鼠供試品30 d后，低劑量組及中劑量組小鼠與陰性對照組小鼠相比，急性腦缺血性缺氧張口喘氣時間有顯著差異（P＜0.05）。表明飼喂中劑量的紅景天片能提高小鼠急性腦缺血性缺氧耐受力。

2.5結論

在本研究條件下，紅景天片0.4 g/kg·BW劑量能顯著延長常壓耐缺氧時間和急性腦缺血性缺氧耐受時間，表明紅景天片具有提高缺氧耐受力的功能。

3　討論

缺氧是指因組織的氧氣供應不足或用氧障礙，而導致組織的代謝、功能和形態(tài)結構發(fā)生異常變化的病理過程。有研究表明，紅景天提取液不僅對常壓缺氧和組織缺氧小鼠有保護作用，而且對特異性增加心臟耗氧的小鼠能明顯延長其生存時間，說明能改善心肌氧的供求［7］。紅景天苷是紅景天中的主要有效成分，龍怡［8］等研究表明紅景天苷等成分能提高心肌細胞活力，對抗心肌缺氧損傷，保護心肌細胞。

銀杏葉（Ginkgo biloba leaves）是銀杏科植物銀杏（Ginkgo biloba L.）的干燥葉。銀杏葉提取物中主要生物活性成分為銀杏黃酮糖苷和銀杏萜內(nèi)酯。李曉莉［9］等研究表明銀杏葉提取物可以顯著延長小鼠在常壓缺氧條件下的存活時間。

本研究結果表明，以紅景天苷為主要成分的紅景天片具有提高缺氧耐受力功能。在常壓耐缺氧試驗中，低劑量組、中劑量組和陽性對照組小鼠常壓缺氧存活時間較陰性對照組有顯著延長（P＜0.05）。在急性腦缺血性缺氧實驗中，中劑量組小鼠斷頭喘氣時間較陰性對照組有顯著延長（P＜0.05）。綜合上所述，中劑量紅景天片能提高小鼠的缺氧耐受力。雖然陽性對照組只在常壓耐缺氧試驗中較陰性對照組有顯著差異，而在亞硝酸鈉中毒存活實驗和急性腦缺血性實驗中較陰性對照組沒有明顯差異，這可能與陽性對照物的劑量有關。本研究結果為紅景天的開發(fā)利用提供科學參考。

［1］德吉，周生靈，郭小芳，等.紅景天的研究進展［J］.西藏科技，2012（8）：70-71

［2］馬根順，羅丁.紅景天藥理作用研究進展［J］.中國實用醫(yī)藥，2009，4（28）：227-228

［3］劉明成，張得鈞.紅景天藥理作用研究進展［J］.亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥，2013，9（6）：65-69

［4］熊云珍，胡艷紅，熊新剛，等.紅景天藥理作用研究進展［J］.湖北中醫(yī)雜志，2013，35（8）：78-81

［5］李昱柳，蘇巧娟，李靈芝.紅景天苷藥理活性研究進展［J］.武警醫(yī)學院學報，2007，16（1）：98-100

［6］李丹紅，孟玉彩，趙文.紅景天植物生物活性研究進展［J］.毒理學雜志，2008，22（4）：320-323

［7］吳萬征，李朝暉，梁球.西藏紅景天提取物抗缺氧作用的實驗研究［J］.中藥材，2005，28（1）：41-42

［8］龍怡，李佳川，孟憲麗.紅景天有效成分對缺氧缺糖心肌細胞損傷的保護作用研究［J］.中藥藥理與臨床，2010，26（1）：24-25

［9］李曉莉，王斌，蘇喜生，等.銀杏葉提取物對小鼠耐缺氧作用的影響［J］.衛(wèi)生研究，2000，29（3）：190-191

Experimental Study on the Effects of Rhodiola Extract Tablets in Enhancing Anoxia Endurance

LUO Kui，CAO Li-ge，GAO Li-fang，TIAN Mi，CUI Shu-xiang*
（Medical Experiments and Testing Center，Capital Medical University，Beijing 100069，China）

To study on the function of Rhodiola extract tablets in enhancing anoxia endurance，the mice of experimental groups were orally given Rhodiola extract tablets for 30 days at the dosages of 0.2，0.4，1.2 g/kg·BW（Equivalent to 5，10，30 times of the recommended amount ofhuman body）respectively.The anoxia endurance ofthetabletswereexaminedonthreedifferenttypesofanoxiamodelmice.Theresultwasthatasfollowed，Rhodiola extract tablets could significantly increase in mice atmospheric anoxia survival time and mouth breathing time after acute lack of blood in brain.No significant effects of Rhodiola extract tablets on the growth of mice and the survival time of mice subjected to NaNO2was observed.The results indicated that Rhodiola extract tablets could enhance anoxia endurance of mice.

Rhodiola extract tablets；anoxia endurance；mice

10.3969/j.issn.1005-6521.2016.17.039

2015-10-14

羅葵（1983—），女（漢），主管技師，碩士，研究方向：食品藥品安全評價。

崔淑香（1963—），教授，研究方向：衛(wèi)生毒理學。