金桂蘭，羅 平，杜 娟，林 寧，譚建玲，邢翔飛#（.三峽大學(xué)人民醫(yī)院/宜昌市第一人民醫(yī)院藥學(xué)部，湖北宜昌 443000；.湖北中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，武漢 430064）

尼可地爾骨架型緩釋片的處方優(yōu)化及體外釋藥研究

金桂蘭1＊，羅 平2，杜 娟2，林 寧2，譚建玲1，邢翔飛1#（1.三峽大學(xué)人民醫(yī)院/宜昌市第一人民醫(yī)院藥學(xué)部，湖北宜昌 443000；2.湖北中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，武漢 430064）

目的：優(yōu)化尼可地爾骨架型緩釋片的處方，評(píng)價(jià)其體外釋藥特性。方法：采用粉末直接壓片法，在單因素考察的基礎(chǔ)上，以1、4、8、12 h尼可地爾的累積釋放度（Q）為評(píng)價(jià)指標(biāo)，用星點(diǎn)設(shè)計(jì)-響應(yīng)面法優(yōu)化制劑輔料中羥丙甲基纖維素（HPMC）、乙基纖維素（EC）的用量；比較所制緩釋片在不同pH（1.0、5.0、6.8、7.4）介質(zhì)中12 h內(nèi)的Q值。結(jié)果：最優(yōu)處方（每片量）為尼可地爾10 mg、HPMC 150 mg、EC 90 mg、微晶纖維素80 mg、乳糖60 mg、硬脂酸鎂2%；所制緩釋片的Q1 h、Q4 h、Q8 h、Q12 h分別為23.6%、51.3%、83.7%、96.9%，與預(yù)測(cè)值的偏差分別為2.1%、1.6%、1.0%、0.2%；緩釋片在pH 1.0～7.4的介質(zhì)中各時(shí)間點(diǎn)的Q值相近。結(jié)論：優(yōu)化處方所制的尼可地爾骨架型緩釋片具有緩釋作用，pH在1.0～7.4范圍內(nèi)變化對(duì)其主藥的釋放無干擾。

尼可地爾；骨架型緩釋片；處方優(yōu)化；星點(diǎn)設(shè)計(jì)-響應(yīng)面法；體外釋藥

尼可地爾（Nicorandil，又名煙浪?。?，化學(xué)名N-［2-（硝基氧基）乙基］-3-吡啶羧酰胺，屬硝酸酯類化合物，具有硝酸酯類和鉀離子通道開放的雙重作用［1-2］，在臨床上適用于高血壓、冠心病及各類心絞痛的治療，為較理想的抗心絞痛藥。目前，尼可地爾上市制劑有片劑、注射劑等。實(shí)際應(yīng)用中，該藥物的水溶性較差，存在口服生物利用度低等問題。

近年來，結(jié)合緩控釋制劑的優(yōu)點(diǎn)，并根據(jù)心腦血管疾病的發(fā)病規(guī)律，研究可以長(zhǎng)時(shí)間平穩(wěn)起效的緩控釋制劑已成為心腦血管藥物研究的趨勢(shì)之一。本研究以羥丙甲基纖維素（HPMC）和乙基纖維素（EC）為緩釋材料，應(yīng)用星點(diǎn)設(shè)計(jì)-響應(yīng)面法［3］優(yōu)化處方，并對(duì)其體外釋藥進(jìn)行初步探討，旨在研究制備一種服用方便且血藥濃度持續(xù)穩(wěn)定的尼可地爾緩釋片。

1 材料

1.1 儀器

UV-2550紫外-可見分光光度計(jì)（日本島津公司）；BP211D十萬分之一電子天平（德國(guó)Satorius公司）；TDP單沖壓片機(jī)（上海天祥健臺(tái)制藥機(jī)械有限公司）；ZRS-8G溶出儀（天津市天大天發(fā)科技有限公司）。

1.2 藥品與試劑

尼可地爾對(duì)照品和原料藥（西安立邦制藥廠提供，批號(hào)：20130307、120917，純度：＞99%）；尼可地爾片（河南天方藥業(yè)有限公司，批號(hào)：130709107，規(guī)格：5 mg/片）；EC（黏度：0.01 Pa·s）、HPMC K4M和微晶纖維素（MCC）均購(gòu)自安徽山河藥用輔料股份有限公司；乳糖（天津市博迪化工有限公司）；硬脂酸鎂（天津市標(biāo)準(zhǔn)科技有限公司，化學(xué)純）；水為二次蒸餾水。

2 方法與結(jié)果

2.1 釋放度的測(cè)定

2.1.1 含量測(cè)定方法的建立 精密稱定尼可地爾對(duì)照品適量，用pH 6.8磷酸鹽緩沖液（PBS）溶解定容至100 ml，備用。精密量取上述溶液，制備成質(zhì)量濃度分別為1.01、3.03、6.06、9.09、12.12 μg/ml的對(duì)照品溶液，在262 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度。以質(zhì)量濃度（c）為橫坐標(biāo)、吸光度（A）為縱坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸分析，得回歸方程為A=0.017 6c－0.003 9（r2=0.999 7），尼可地爾檢測(cè)質(zhì)量濃度的線性范圍為1.01～12.12 μg/ml。按相關(guān)方法考察，50%、100%、150%的加樣回收率分別為101.98%、99.99%、98.53%，RSD分別為1.12%、0.39%、0.27%（n=3）；精密度試驗(yàn)RSD為0.41%（n=6）。

2.1.2 籃法測(cè)定累積釋放度 按2015年版《中國(guó)藥典》（四部）釋放度測(cè)定法中通則0931第一法（籃法）操作，以900 ml經(jīng)脫氣處理的pH 6.8的PBS為釋放介質(zhì)，轉(zhuǎn)速50 r/min，溫度（37± 0.5）℃ 。分別于0、0.5、1、2、3、4、6、8、10、12 h取樣5 ml，并及時(shí)補(bǔ)加等體積同溫新鮮介質(zhì)。樣品液用0.45μm微孔濾膜過濾，測(cè)定吸光度，并根據(jù)回歸方程計(jì)算累積釋放度（Q）。

2.2 星點(diǎn)設(shè)計(jì)-響應(yīng)面法優(yōu)化制劑處方

2.2.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與結(jié)果 經(jīng)過單因素試驗(yàn)的初步考察表明，HPMC和EC的用量是影響藥物釋放的主要因素。本研究設(shè)定每片制劑中HPMC（X1）的用量范圍為100～160 mg、EC（X2）的用量范圍為60～120 mg，響應(yīng)值為Q1 h、Q4 h、Q8 h、Q12 h，以星點(diǎn)設(shè)計(jì)-響應(yīng)面法進(jìn)行2因素5水平的處方優(yōu)化試驗(yàn)［4-5］。因素與水平見表1，星點(diǎn)設(shè)計(jì)與結(jié)果見表2。

表1 因素與水平Tab 1 Factors and levels

表2 星點(diǎn)設(shè)計(jì)與試驗(yàn)結(jié)果Tab 2 Central composite design and test results

2.2.2 模型擬合 以X1和X2為自變量，Q1 h、Q4 h、Q8 h、Q12 h為因變量，使用Design Expert軟件處理數(shù)據(jù)，進(jìn)行模型擬合，以模型擬合相關(guān)系數(shù)（r2）和置信度（P）判斷最佳模型［6-7］。分別采用多元線性模型和二次多項(xiàng)式模型對(duì)不同時(shí)間點(diǎn)各自變量和因變量進(jìn)行回歸分析，二次多項(xiàng)式模型擬合相關(guān)系數(shù)明顯高于多元線性模型，且置信度也優(yōu)于多元線性模型。因此，本研究選擇二次多項(xiàng)式模型擬合方程優(yōu)化制劑處方，其方程為Q1 h= －70.052+1.125X1+0.650X2+0.001 6X1X2－0.005 1X－0.004 9X（r2=0.973 4，P=0.010 0）；Q4 h=－170.48+2.85X1+1.64X2+0.000 33X1X2－0.011 2X－0.010X（r2=0.948 4，P=0.056 0）；Q8 h=29.605+0.714X1+0.546X2+0.000 056X1X2－0.003 3X－0.003 6X（r2=0.991 8，P=0.029 5）；Q12 h=23.283+0.776X1+0.744X2+0.000 78X1X2－0.003 6X－0.004 8X（r2=0.991 2，P= 0.005 4）。根據(jù)上述選用的二次多項(xiàng)式模型，分別繪制X1和X2對(duì)Q的響應(yīng)面圖和等高線圖，見圖1和圖2。

2.2.3 處方優(yōu)化與驗(yàn)證 設(shè)定響應(yīng)值Q1 h為10%～30%、Q4 h為40%～60%、Q8 h為70%～90%、Q12 h＞90%，將各個(gè)響應(yīng)面優(yōu)化區(qū)域進(jìn)行重疊［8］，得到X1較優(yōu)用量范圍為150～157 mg，X2較優(yōu)用量范圍為85～98 mg。綜合考慮，最終確定尼可地爾骨架型緩釋片的處方（每片量）為尼可地爾原料藥10 mg、HPMC 150 mg、EC 90 mg、MCC 80 mg、乳糖60 mg、硬脂酸鎂2%。對(duì)其進(jìn)行驗(yàn)證試驗(yàn)，結(jié)果見表3。

圖1 X1和X2對(duì)Q值影響的三維響應(yīng)面圖Fig 1 Three-dimensional response surface map of the effects of X1and X2on Q values

圖2 X1和X2對(duì)Q值影響的等高線圖Fig 2 Contour map of the effects of X1and X2on Q values

表3 驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果Tab 3 Results of verification test

由表3可知，Q1 h、Q4 h、Q8 h、Q12 h的實(shí)測(cè)值與預(yù)測(cè)值的偏差均小于3%，表明優(yōu)化結(jié)果良好，試驗(yàn)設(shè)計(jì)和模型的擬合均有較高的可信度和預(yù)測(cè)性。最終確定，每片尼可地爾骨架型緩釋片中HPMC用量為150 mg、EC用量為90 mg。

2.3 尼可地爾骨架型緩釋片的制備[9]

按“2.2.3”項(xiàng)下優(yōu)化后處方量稱取主藥與輔料分別過120目篩，將尼可地爾與其他輔料等量遞加法逐步混勻，再加入潤(rùn)滑劑混勻，采用直接壓片法，于單沖壓片機(jī)上壓制成直徑為12mm、片質(zhì)量約為400 mg的尼可地爾骨架型緩釋片，每片含尼可地爾10 mg。

2.4 體外釋藥特性評(píng)價(jià)

2.4.1 體外釋藥特性 按最優(yōu)處方制備尼可地爾骨架型緩釋片6片（批號(hào)：201456），測(cè)定其Q12 h，并與尼可地爾普通片進(jìn)行比較。結(jié)果表明，與尼可地爾普通片比較，尼可地爾骨架型緩釋片具有良好的緩釋特性。2種制劑的累積釋放曲線見圖3。

圖3 2種制劑的累積釋放曲線（n=6）Fig 3 Cumulative release curves of 2preparations（n=6）

2.4.2 pH對(duì)Q值的影響 取同一批號(hào)尼可地爾骨架型緩釋片（批號(hào)：201458），分別以0.1 mol/L的鹽酸溶液（pH 1.0）和pH 5.0、6.8、7.4的PBS為釋放介質(zhì)，按“2.1.2”項(xiàng)下方法測(cè)定Q12 h，繪制累積釋放曲線和Q-pH-時(shí)間（t）的三維圖，具體見圖4和圖5。

圖4 尼可地爾骨架型緩釋片在不同pH介質(zhì)中的累積釋放曲線Fig 4 Cumulative release curves of Nicorandil sustained-release matrix tablet in different pH media

圖5 尼可地爾骨架型緩釋片Q-pH-t的三維圖Fig 5 Three-dimensional map of Q-pH-t of Nicorandil sustained-release matrix tablet

由圖4和圖5可知，尼可地爾骨架型緩釋片在pH 1.0～7.4的釋放介質(zhì)中各時(shí)間點(diǎn)的Q值相近，介質(zhì)pH在1.0～7.4范圍內(nèi)變化對(duì)其主藥的釋放無干擾。

3 討論

尼可地爾骨架型緩釋片為混合型骨架片，系由親水性高分子材料和不溶性骨架材料以及其他輔料混合制成。在制備工藝上，該制劑采用粉末直接壓片法，制備工藝簡(jiǎn)單、便于工業(yè)化生產(chǎn)；在制劑處方上，筆者基于前期對(duì)HPMC黏度和用量，EC、MCC、乳糖用量進(jìn)行單因素考察的基礎(chǔ)上，采用星點(diǎn)設(shè)計(jì)-響應(yīng)面法對(duì)制劑處方組成進(jìn)行了篩選優(yōu)化。

緩釋、控釋制劑長(zhǎng)時(shí)間在體內(nèi)釋藥，經(jīng)過pH約為1.0的胃液到pH約7.4的小腸遠(yuǎn)端。為能反映制劑體內(nèi)吸收特征，一般應(yīng)對(duì)緩控釋制劑的pH依賴性進(jìn)行研究。藥物釋放介質(zhì)的pH可能會(huì)影響某些控制藥物釋放關(guān)鍵輔料的特性［10-11］，對(duì)緩釋片的釋放有一定影響。本試驗(yàn)通過對(duì)尼可地爾骨架型緩釋片“Q-pH-t”釋放特性的研究，發(fā)現(xiàn)緩釋片在pH 1.0～7.4的釋放介質(zhì)中均能較好地釋放，說明pH的變化對(duì)其主藥的釋放無干擾，符合劑型設(shè)計(jì)要求，同時(shí)也表明尼可地爾可制備成緩釋制劑。

星點(diǎn)設(shè)計(jì)-響應(yīng)面法是通過試驗(yàn)擬合因變量對(duì)自變量的響應(yīng)面，從響應(yīng)面上選擇最優(yōu)響應(yīng)域的方法，其試驗(yàn)設(shè)計(jì)可靠性較高、偏差較小。筆者對(duì)星點(diǎn)設(shè)計(jì)-響應(yīng)面法優(yōu)化得到的處方進(jìn)行驗(yàn)證，制備的尼可地爾骨架型緩釋片體外釋藥平穩(wěn)持久，達(dá)到緩釋制劑的要求，為尼可地爾新劑型的開發(fā)提供了參考依據(jù)并奠定了基礎(chǔ)。另外，其體內(nèi)釋藥研究及體內(nèi)外相關(guān)性研究仍在進(jìn)行中，將另文報(bào)道。

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（編輯：鄒麗娟）

Study on Formulation Optimization of Nicorandil Sustained-release Matrix Tablet and Drug Release in vitro

JIN Guilan1，LUO Ping2，DU Juan2，LIN Ning2，TAN Jianling1，XING Xiangfei1（1.Dept.of Pharmacy，Three Gorges University People’s Hospital/the First People’s Hospital of Yichang，Hubei Yichang 443000，China；2.College of Pharmacy，Hubei University of Chinese Medicine，Wuhan 430064，China）

OBJECTIVE：To optimize the formulation optimization of Nicorandil sustained-release matrix tablet，and evaluate its drug release properties in vitro.METHODS：Based on single factor test，powder direct compression method was used，using nicorandil cumulative release rate（Q）in 1，4，8，12 h as evaluation indexes，central composite design-response surface method was adopted to optimize the amount of hydroxypropyl methylcellulose（HPMC）and ethyl cellulose（EC）；Q values within 12 h in different pH（1.0，5.0，6.8，7.4）media were compared.RESULTS：The optimized formulation（every tablet）was nicorandil 10 mg，HPMC 150 mg，EC 90 mg，microcrystalline cellulose 80 mg，lactose 60 mg，magnesium stearate 2%.Q1 h，Q4 h，Q8 hand Q12 hof the obtained formulation were 23.6%，51.3%，83.7%and 96.9%，respectively；deviation from the predicted values were 2.1%，1.6%，1.0%，0.2%.Q values were similar in pH 1.0-7.4 at different time points.CONCLUSIONS：The obtained Nicorandil sustained-release matrix tablet by optimal formulation shows sustained-release effect，and the change of pH 1.0-7.4 has no interference in the release characteristics of main drug.

Nicorandil；Sustained-release matrix tablet；Formulation optimization；Central composite design-response surface method；Drug release in vitro

·綜述講座·

R943

A

1001-0408（2016）25-3564-03

10.6039/j.issn.1001-0408.2016.25.33

2015-11-27

2016-02-01）

＊主任藥師，碩士。研究方向：醫(yī)院藥學(xué)、藥事管理。電話：0717-6228045。E-mail：jin_gl@163.com

主任藥師，碩士。研究方向：藥物制劑、臨床藥學(xué)。電話：0717-6227798。E-mail：xingxfemail@163.com