郭元晟，靳 鵬

（1.錫林郭勒職業(yè)學院，內(nèi)蒙古 錫林浩特 026000；2.河北省灤平縣農(nóng)牧局，河北 灤平 068250）

酵母硒對烏珠穆沁羊免疫球蛋白及細胞因子的影響

郭元晟1，靳 鵬2

（1.錫林郭勒職業(yè)學院，內(nèi)蒙古 錫林浩特 026000；2.河北省灤平縣農(nóng)牧局，河北 灤平 068250）

［目的］通過飼養(yǎng)試驗研究日糧中添加酵母硒對烏珠穆沁羊免疫球蛋白及關鍵細胞因子的影響，為合理確定內(nèi)蒙古錫林郭勒地區(qū)烏珠穆沁羊日糧中酵母硒的適宜添加量以及酵母硒在該地區(qū)肉羊養(yǎng)殖中的推廣使用提供理論依據(jù)。［方法］采用單因子隨機試驗設計，將240只健康烏珠穆沁羯羊隨機分成4組（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組）。其中，Ⅰ組為對照組，日糧中添加無機硒（亞硒酸鈉）0.3 mg/kg（DM基礎），其他3組為酵母硒組，日糧中分別添加0.3、0.6、0.9 mg/kg（DM基礎）的酵母硒。預飼期15 d，正飼期60 d。［結(jié)果］在日糧中添加酵母硒能夠顯著提高烏珠穆沁羊血清中免疫球蛋白IgM、IgG、IgA以及細胞因子IL-1、IL-2及IL-6的含量。［結(jié)論］在烏珠穆沁羊日糧中添加酵母硒能顯著提高烏珠穆沁羊的免疫水平，綜合飼養(yǎng)成本及免疫增強效果，以添加0.6 mg/kg（DM基礎）效果最佳。

酵母硒；烏珠穆沁羊；免疫功能；細胞因子

牲畜的各種疾病給畜牧業(yè)生產(chǎn)帶來巨大的經(jīng)濟損失。多年以來，人們通過在飼料中添加一定量的抗生素來減少牲畜疾病的發(fā)生。但是，隨著使用抗生素添加劑的弊端逐漸被人們所認識，研究人員開始致力于開發(fā)安全可靠的飼料添加劑以提升動物的健康水平，從而提高動物生產(chǎn)性能。免疫球蛋白普遍存在于血液、組織液、外分泌液中，具有抗菌、抗病毒、激活補體等生物學功能，可以體現(xiàn)動物免疫功能的強弱。其中IgG、IgM、IgA是動物血清中重要的免疫球蛋白，具有抗菌、抗病毒、抗腫瘤及中和毒素等作用［1］。 白細胞介素（interleukin，IL）是由免疫系統(tǒng)、造血系統(tǒng)或炎癥反應中的活化細胞產(chǎn)生的細胞因子，對機體免疫應答、炎癥反應、神經(jīng)—內(nèi)分泌效應等有重要的影響。白介素1（IL-1）來自激活的單核巨噬細胞、上皮細胞與內(nèi)皮細胞，能促進T細胞的激活，是造血生長因子的輔助因子。白介素2（IL-2）由T細胞產(chǎn)生，可以引起T細胞增殖并維持T細胞在體外的持續(xù)生長，故稱為T細胞生長因子。白介素6（IL-6）是機體為保持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定而分泌的一種多功能細胞因子，在B細胞生長分化時起關鍵作用，故稱為B細胞生長因子。因此，血清免疫球蛋白及細胞因子水平是評價機體免疫功能的重要指標，可以反映機體的免疫功能狀態(tài)［2］。大量研究證實，膳食或動物飼料中添加礦物質(zhì)元素硒，對人或動物機體具有營養(yǎng)及免疫調(diào)節(jié)作用［3］。該研究旨在通過飼養(yǎng)試驗研究日糧中添加酵母硒對烏珠穆沁羊免疫球蛋白及關鍵細胞因子的影響，為合理確定內(nèi)蒙古錫林郭勒地區(qū)烏珠穆沁羊日糧中酵母硒的適宜添加量以及酵母硒在該地區(qū)肉羊養(yǎng)殖中的推廣使用提供依據(jù)。

表1 基礎日糧配方及營養(yǎng)水平

表2 烏珠穆沁羊血清中IgG含量測定結(jié)果 g/L

表3 烏珠穆沁羊血清中IgM含量測定結(jié)果 g/L

表4 烏珠穆沁羊血清中IgA含量測定結(jié)果 g/L

1 材料與方法

1.1 實驗動物 5～6月齡的健康烏珠穆沁羊240只，體重相近。

1.2 試驗設計 采用單因子隨機試驗設計，將240只健康烏珠穆沁羯羊隨機分成4組（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組），每組6個重復，每個重復10只。其中Ⅰ組為對照組，日糧中添加無機硒（亞硒酸鈉）0.3 mg/kg（DM基礎），其他3組為酵母硒組，日糧中分別添加0.3、0.6、0.9 mg/kg（DM 基礎）的酵母硒。 預飼期 15 d，正飼期60 d。

1.3 飼養(yǎng)管理及試驗日糧 實驗羊只進欄前對羊舍進行全面消毒，預飼期間對羊只進行健康檢查、驅(qū)蟲、疫苗接種等。每天清掃圈舍，以保持圈內(nèi)清潔，整個圈舍采取自然通風，所有圈舍進行不定期消毒。實驗羊只由專人管理，試驗期肉羊自由采食，自由飲水。試驗日糧組成參照國內(nèi)肉羊飼養(yǎng)標準NY/T 816-2004，并做適當調(diào)整，其配方及營養(yǎng)水平見表1。

1.4 樣品采集 在正式試驗第1、30、60天清晨，每組每個重復隨機選取2只羊，每個處理組共12只，進行靜脈采血，離心制備血清，置于-70℃超低溫冰箱中凍存?zhèn)溆谩?/p>

1.5 測定指標及方法 血清中IgG、IgM、IgA含量采用試劑盒法測定，試劑盒購自南京建成生物有限公司，具體操作按照說明書進行。血清中IL-1、IL-2及IL-6含量利用放免法測定。

1.6 數(shù)據(jù)處理 試驗數(shù)據(jù)利用SAS 9.0軟件中的One-way ANOVA統(tǒng)計程序進行統(tǒng)計分析。P＜0.05表示各處理間差異顯著。

表5 烏珠穆沁羊血清中IL-1含量測定結(jié)果 ng/mL

表6 烏珠穆沁羊血清中IL-2含量測定結(jié)果 ng/mL

2 結(jié)果與分析

2.1 酵母硒對烏珠穆沁羊血清中IgG含量的影響由表2可知，添加無機硒和酵母硒對烏珠穆沁羊血清中IgG的含量均有不同程度的提高作用。在試驗第30天和第60天時，Ⅲ組、Ⅳ組羊只血清中的IgG含量均顯著高于Ⅰ組（P＜0.05），Ⅱ組、Ⅲ組和Ⅳ組之間差異不顯著（P＞0.05），以添加劑量為0.6 mg/kg（DM基礎）的Ⅲ組效果最好。

2.2 酵母硒對烏珠穆沁羊血清中IgM含量的影響由表3可知，添加無機硒和酵母硒對烏珠穆沁羊血清中IgM的含量均有不同程度的提高作用。在試驗第30天時，Ⅲ組、Ⅳ組羊只血清中的IgM含量均顯著高于Ⅰ組（P＜0.05），Ⅱ組、Ⅲ組和Ⅳ組之間差異不顯著（P＞0.05）；在試驗第60天時，3個酵母硒添加組羊只血清中的IgM含量均顯著高于Ⅰ組 （P<0.05），Ⅱ組、Ⅲ組和Ⅳ組之間差異不顯著（P＞0.05），以添加劑量為0.6 mg/kg（DM基礎）的Ⅲ組效果最好。

2.3 酵母硒對烏珠穆沁羊血清中IgA含量的影響由表4可知，添加無機硒和酵母硒對烏珠穆沁羊血清中IgA的含量均有不同程度的提高作用。在試驗第30天時，Ⅲ組羊只血清中的IgA含量顯著高于Ⅰ組（P<0.05）；在試驗第60天時，Ⅲ組、Ⅳ組羊只血清中的IgA含量均顯著高于Ⅰ組 （P＜0.05），Ⅱ組、Ⅲ組和Ⅳ組之間差異不顯著（P＞0.05），以添加劑量為0.6 mg/kg（DM基礎）的Ⅲ組效果最好。

2.4 酵母硒對烏珠穆沁羊血清中IL-1含量的影響 由表5可知，添加無機硒和酵母硒對烏珠穆沁羊血清IL-1的含量均有不同程度的提高作用。在試驗第30天和第60天時，Ⅲ組和Ⅳ組羊只血清中的IL-1含量均顯著高于Ⅰ組（P＜0.05），Ⅱ組、Ⅲ組和Ⅳ組差異不顯著（P＞0.05），以添加劑量為0.9 mg/kg（DM基礎）的Ⅳ組效果最好。

2.5 酵母硒對烏珠穆沁羊血清中IL-2含量的影響 由表6可知，添加無機硒和酵母硒對烏珠穆沁羊血清IL-2的含量均有不同程度的提高作用。在試驗第30天時，Ⅱ組、Ⅲ組和Ⅳ組羊只血清中的IL-2 含量均顯著高于Ⅰ組（P＜0.05），Ⅱ組、Ⅲ組和Ⅳ組差異不顯著（P＞0.05）；在試驗第60天時，Ⅲ組和Ⅳ組羊只血清中的IL-2含量均顯著高于Ⅰ組（P＜0.05），Ⅲ組和Ⅳ組差異不顯著（P＞0.05），以添加劑量為0.6 mg/kg（DM基礎）的Ⅲ組效果最好。

2.6 酵母硒對烏珠穆沁羊血清中IL-6含量的影響 由表7可知，添加無機硒和酵母硒對烏珠穆沁羊血清IL-6的含量均有不同程度的提高作用。在試驗第30天和第60天時，3個酵母硒添加組羊只血清中的IL-6含量均顯著高于Ⅰ組 （P＜0.05），Ⅱ組、Ⅲ組和Ⅳ組差異不顯著（P＞0.05），以添加劑量為0.9 mg/kg（DM基礎）的Ⅳ組效果最好。

表7 烏珠穆沁羊血清中IL-6含量測定結(jié)果 ng/mL

3 討論

硒對動物機體的免疫調(diào)節(jié)有重要作用，其參與調(diào)節(jié)T淋巴細胞、B淋巴細胞及非特異性免疫效應細胞的功能。關于硒對反芻動物免疫機能的影響報道并不一致。黃志堅等［4］在奶牛飼料中添加富硒酵母，隨著補硒天數(shù)的增加，補硒各組奶牛血液中淋巴細胞的轉(zhuǎn)化能力和T淋巴細胞百分率顯著增多。汪傳松等［5］研究表明，引用人工硒茶5周后，外周血淋巴細胞轉(zhuǎn)化率及IgM水平都有明顯提高。雒國彬等［6］報道，隨著酵母硒添加量的提高，奶牛血清IgM、IgG和IgA的含量呈先升高后降低的趨勢。Swecker等［7］研究發(fā)現(xiàn)，奶牛補硒后可增加初乳及犢牛血清中的IgG水平，但對IgM無顯著影響。王傳蓉等［8］報道，補硒可使母牛分娩后12 h血清中的IgM、IgG含量顯著提高，且IgA的含量也有所增加。He等［9］報道，補硒可以提高慢性肝炎病人外周血單核細胞分泌IL-2的能力。Safir等［10］研究表明，補硒可以促進巨噬細胞分泌IL-1和IL-6。倪麗麗［11］研究發(fā)現(xiàn)，在奶牛日糧中添加有機硒，可使其血清中的IgM、IgG、IgA、IL-1及IL-2含量顯著提高。該研究結(jié)果顯示，日糧中添加一定量的酵母硒能夠顯著提高烏珠穆沁羊血清中 IgM、IgG、IgA、IL-1、IL-2及IL-6的含量，這與前人大多數(shù)的研究結(jié)果是一致的。

4 結(jié)論

在烏珠穆沁羊日糧中添加酵母硒能顯著提高烏珠穆沁羊的免疫水平，綜合飼養(yǎng)成本及免疫增強效果，以添加量為0.6 mg/kg（DM基礎）效果最佳。

［1］DYLEWSKI M L，MASTRO AM，PICCIANOM F.Matemal Se nutrition and neonatal immune system development［J］.Bio Neonate，2002，82：122-127.

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Effect of Dietary Supplementation of Selenium-enriched Yeast on Immunoglobulin and Cytokine of Ujumqin Sheep

GUO Yuan-sheng1，JIN Peng2
（1.Xilingol Vocational College，Xilinhot 026000，China；2.Agricultural and Animal Husbandry Bureau of Luanping County of Hebei Province，Luanping 068250，China）

［Objective］ In order to rationally determine the optimal supplementation level of Selenium-enriched Yeast in diet of Ujumqin Sheep in Xilingol region of Inner Mongolia and to provide theoretical basis for the promotion and application of Selenium-enriched Yeast in local mutton sheep industry,the effect of dietary supplementation of Selenium-enriched yeast on immunoglobulin and key cytokine of Ujumqin Sheep was evaluated in this study. ［Methods］ The experiment was conducted by randomized design with a single factor.A total of 240 healthy wether of Ujumqin Sheep were included in this study and were randomly divided into 4 groups （Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ group）.The groupⅠwas served as control group,of which the diet was supplemented with 0.3 mg/kg of inorganic selenium （sodium selenite，DM basis）.The Ⅱ,Ⅲ and Ⅳ groups were served as experimental groups,of which the diet were supplemented with 0.3,0.6,0.9 mg/kg of Selenium-enriched Yeast （DM basis）.The pre-feeding period lasted for 15 d and the formal-feeding period lasted for 60 d. ［Results］ The serum content of IgM,IgG,IgA and IL-1,IL-2,IL-6 of Ujumqin Sheep were significantly increased when their diet was supplemented with Selenium-enriched yeast. ［Conclusion］ The dietary supplementation of Selenium-enriched yeast was able to enhance the immunity function of Ujumqin Sheep.In view of the feeding cost and immunopotentiation effect,supplementation level of 0.6 mg/kg Selenium-enriched yeast（DM basis） in diet was optimal and recommended.

Selenium-enriched yeast；Ujumqin Sheep；immunity function；cytokine

S816.72；S826.5

A文章順序編號1672-5190（2016）03-0039-03

2016－01－24

郭元晟（1982—），男，講師，博士，主要研究方向為動物營養(yǎng)與飼料科學。

（責任編輯：趙俊利）