何旭　田自珍

（甘肅省蜂業(yè)技術(shù)推廣總站，741022）

利用基因庫保護(hù)中華蜜蜂種質(zhì)資源

何旭田自珍

（甘肅省蜂業(yè)技術(shù)推廣總站，741022）

利用基因庫保存中蜂生物遺傳物質(zhì)具有特別的意義：低溫保存遺傳材料是野生生物保護(hù)戰(zhàn)略的有機(jī)組成部分。當(dāng)野生種群的遺傳多樣性由于自然的選擇、遺傳演變而部分喪失時，基因庫仍為保護(hù)種群遺傳多樣性；野生生物基因資源庫為改良蜜蜂品質(zhì)和種間雜交提供了野生種源；野生生物基因庫資源為地理隔離種群之間交流基因提供了途徑。

一、保存蜜蜂種質(zhì)基因的方式和技術(shù)途徑

蜜蜂精、卵細(xì)胞貯存技術(shù)：采取細(xì)胞貯存技術(shù)和生物活體貯存技術(shù)、資源區(qū)保存技術(shù)相結(jié)合的方法進(jìn)行蜜蜂種質(zhì)基因的保存工作技術(shù)已經(jīng)實驗成功，近期即可應(yīng)用于蜜蜂種質(zhì)基因的保存工作。目前我國學(xué)者正在探索雄蜂精液冷凍技術(shù)和母蜂卵細(xì)胞貯存技術(shù)為蜜蜂種質(zhì)基因保存提供先進(jìn)的技術(shù)條件。

雄蜂精液冷凍應(yīng)用人工授精技術(shù)實施蜜蜂生物活體保存蜜蜂種質(zhì)基因：對一些不適合應(yīng)用精液、卵細(xì)胞貯存技術(shù)的部分蜂種，應(yīng)用蜜蜂人工授精技術(shù)實施蜜蜂生物活體保存種質(zhì)基因的技術(shù)，飼養(yǎng)1000群蜜蜂，每一個品種（系）蜜蜂設(shè)50～80群蜂保存基因。通過人工授精，嚴(yán)格控制交配，定向繁育。

二、保存基因分批入庫及步驟

根據(jù)我國不同蜂種在保種中的地位和蜂種資源的疏密程度，分別應(yīng)用上述技術(shù)途徑分批分類入庫保存。保證品種（系）的純度正常指標(biāo)。

第一批：在我國土生土長的東方蜜蜂品種中華蜜蜂，首先立足全國的中蜂資源，進(jìn)行全國性調(diào)查，摸清分布范圍，鑒定品種、品系，陸續(xù)入庫。

第二批：在我國飼養(yǎng)近百年歷史的地方品種蜜蜂，如琿春黑蜂、東北黑蜂、新疆黑蜂、本地意蜂等，這些西蜂在我國地理條件下的長期飼養(yǎng)過程中，已形成不同于原產(chǎn)地的蜜蜂品種（系），成為我國的地方品種，甚至成為珍稀品種。因此，要抓緊收進(jìn)基因庫保存起來。

三、基因庫技術(shù)管理程序和內(nèi)容

1.資源標(biāo)準(zhǔn)點

資源標(biāo)準(zhǔn)點是蜜蜂基因庫種質(zhì)基因的來源蜂場（點），包括本場的保種蜂場和資源區(qū)采集樣本點蜂場，這些基礎(chǔ)蜂場（點）要具有本品種的代表性，其形態(tài)特征和生物學(xué)特性要符合本品種的鑒定指標(biāo)。對那些不適合或暫時不能搞精、卵細(xì)胞冷凍保存的蜂種，實施生物活體保存基因技術(shù)，保種蜂場要以正規(guī)飼養(yǎng)技術(shù)為基礎(chǔ)，繁殖強(qiáng)壯的蜜蜂群體和個體，為保存好各品種基因創(chuàng)造條件。

在實驗室內(nèi)要進(jìn)行品種分類、人工授精、精卵細(xì)胞的采集、蜜蜂整體解剖、蜜蜂細(xì)胞生物學(xué)研究、蜜蜂分子生物學(xué)研究、蜂種形態(tài)學(xué)鑒定和檢測分析等大量實驗工作。實驗室是基因庫的加工處理中心，需要分類的蜂種和需要保存的蜜蜂資源均要經(jīng)過實驗室處理后才能進(jìn)入基因庫，需要研究實驗的蜜蜂細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)和蜜蜂基因工程技術(shù)等均要在實驗室進(jìn)行。實驗室要配備先進(jìn)的儀器設(shè)備，選拔培養(yǎng)思想素質(zhì)優(yōu)、專業(yè)水平高的專業(yè)人員，使實驗室整體水平適應(yīng)基因庫發(fā)展需要。

2.凍精室

貯存雄蜂精液和母蜂卵以及蜂種樣本的冷凍處理，儲藏室有專人管理值班，定期檢查室內(nèi)冷凍容器、設(shè)備及冷凍材料等。

3.標(biāo)本室

標(biāo)本室是基因庫保存的蜜蜂種質(zhì)資源的縮影，通過標(biāo)本室內(nèi)展示的蜜蜂品種標(biāo)本，可以全面反映和代表基因庫的品種資源面貌，為全面了解不同品種蜜蜂的形態(tài)特征、品種分類、蜂種資源以及利用途徑等提供基礎(chǔ)依據(jù)?；驇靸?nèi)保存的各種蜜蜂都按不同品種、品系制作長期保存的標(biāo)本。

4.信息數(shù)據(jù)庫

數(shù)據(jù)庫室基因庫信息數(shù)據(jù)處理和貯存的中心，設(shè)微機(jī)3～4臺，實行電腦管理?；驇毂４娴拿鄯淦贩N（系），要將其分類指標(biāo)、蜂種來源、形態(tài)特征、生物學(xué)特性、經(jīng)濟(jì)性狀、世代系譜檔案、繁育檔案、飼養(yǎng)檔案等和蜂種基因、貯存形式、方法、時間等數(shù)據(jù)以及有關(guān)信息，經(jīng)過處理后以文字、數(shù)字、圖象、表格等形式輸入數(shù)據(jù)庫，內(nèi)容增減變化要及時調(diào)整，準(zhǔn)確反映歷史數(shù)據(jù)和現(xiàn)實數(shù)據(jù)，使整個基因庫數(shù)據(jù)實行程序化、系統(tǒng)化管理。信息數(shù)據(jù)入庫程序見圖1：

圖1　蜜蜂基因庫管理流程

中國農(nóng)科院蜜蜂所在蜜蜂種質(zhì)資源平臺建設(shè)上取得了成績，利用現(xiàn)代信息技術(shù)對我國蜂種資源采用常規(guī)和現(xiàn)代生物技術(shù)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化收集、整理和保存，優(yōu)化現(xiàn)有的蜜蜂種質(zhì)保存技術(shù)，完善種質(zhì)資源庫（活體、生殖細(xì)胞、胚胎）及種質(zhì)資源數(shù)據(jù)庫，評價蜜蜂資源性狀及遺傳多樣性，達(dá)到了種質(zhì)資源的共享。

目前蜜蜂所根據(jù)國家自然科技資源平臺建設(shè)的總體目標(biāo)，在國家自然科技資源平臺建設(shè)技術(shù)指標(biāo)和規(guī)范的基本框架下，制定和完善了中蜂和西方蜜蜂的共性描述規(guī)范、數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)和數(shù)據(jù)質(zhì)量控制平臺，整合國內(nèi)大部分蜜蜂種質(zhì)資源，收集了全國21個省份、3個自治區(qū)和一個直轄市900多群中蜂和200多群西方蜜蜂資源。應(yīng)用資源平臺編碼系統(tǒng)、共性描述標(biāo)準(zhǔn)、個性描述規(guī)范標(biāo)準(zhǔn)、數(shù)據(jù)質(zhì)量控制規(guī)范對蜜蜂進(jìn)行了分類、分級以及標(biāo)準(zhǔn)化整理和數(shù)字化表達(dá)，向國家E—平臺提供了900幅圖片、60000多條蜜蜂種質(zhì)資源共性描述信息、100000多條的蜜蜂種質(zhì)資源個性描述信息并保存了900份蜜蜂活體和遺傳物質(zhì)資源。

同時利用生物特征識別技術(shù)和分子生物學(xué)技術(shù)，對我國長江以北大部分省的蜜蜂種質(zhì)資源進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)西方蜜蜂新亞種一個，中蜂新類型多個。完善了種質(zhì)資源庫（活體、精液）及種質(zhì)資源庫（形態(tài)庫、線粒體DNA基因庫），實現(xiàn)信息資源共享，其他地區(qū)蜜蜂種質(zhì)資源多樣性的研究正在進(jìn)行。