符敏，瞿全新

細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路MEK在宮頸癌前病變和宮頸癌的表達(dá)及意義

符敏，瞿全新

目的：探討宮頸癌前病變及宮頸癌組織中絲裂原激活細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶（mitogen-activated extracellular signal-regulated kinase，MEK）細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路表達(dá)的意義。方法：選擇并收集2013年1月—2014年4月在天津市第一中心醫(yī)院婦科診治、臨床病理資料完整的宮頸病變患者共92例，根據(jù)宮頸病變程度將患者分為正常組（30例）、高級(jí)別宮頸上皮內(nèi)瘤樣變（CIN）組（30例）和宮頸癌組（32例）。用免疫組織化學(xué)SP法檢測(cè)MEK在不同組織中的表達(dá)。結(jié)果：MEK在正常組、高級(jí)別CIN組和宮頸癌組中陽(yáng)性表達(dá)率分別為20.0%、56.7%和68.8%，其中宮頸癌組MEK陽(yáng)性表達(dá)率最高，分別高于高級(jí)別CIN組及正常組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。高級(jí)別CIN組MEK的陽(yáng)性表達(dá)率高于正常組（P=0.003）。MEK陽(yáng)性表達(dá)率與患者年齡、宮頸癌病理類型、腫瘤組織分化程度、腫瘤大小及宮頸癌臨床分期等因素?zé)o關(guān)（P＞0.05）。結(jié)論：MEK轉(zhuǎn)導(dǎo)通路可能在宮頸癌及癌前病變的發(fā)生發(fā)展中有一定的作用。

宮頸腫瘤；癌前狀態(tài)；絲裂原激活蛋白激酶激酶類；信號(hào)傳導(dǎo)

（J Int Obstet Gynecol，2016，43:340-342）

宮頸癌是婦科最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，全世界范圍內(nèi)大約每年有新發(fā)宮頸癌病例50萬(wàn)例，中國(guó)每年約新增病例13.15萬(wàn)例［1-2］，且發(fā)病年齡有年輕化趨勢(shì)［3］。因此，尋找宮頸癌前病變及宮頸癌發(fā)生、發(fā)展的相關(guān)因素并對(duì)其進(jìn)行干預(yù)、控制，對(duì)于宮頸癌的治療和預(yù)防有著重要意義。眾所周知，宮頸癌的病因是人乳頭瘤病毒（HPV）持續(xù)感染，從HPV感染到發(fā)展為宮頸癌是一個(gè)漫長(zhǎng)的過(guò)程，這為研究者提供了有利的阻斷時(shí)機(jī)［4］。已有研究證明，MEK在乳腺癌、結(jié)腸癌等中有促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖的作用［5-6］。然而，關(guān)于MEK在宮頸癌及癌前病變組織中的表達(dá)及其臨床意義研究很少，本研究采用免疫組化SP法，分別對(duì)正常宮頸、高級(jí)別宮頸病變（包括原位癌）及宮頸癌組織中MEK的表達(dá)量進(jìn)行檢測(cè)，探討MEK在宮頸癌前病變及宮頸癌中的表達(dá)及其臨床意義，為宮頸癌的治療提供新思路。

1 資料與方法

1.1 一般資料選擇2013年1月—2014年4月在天津市第一中心醫(yī)院婦科診治、臨床病理資料完整的宮頸病變患者共92例，根據(jù)宮頸病變程度，將患者分為正常組（A組，30例）、高級(jí)別宮頸上皮內(nèi)瘤樣變（CIN）組（B組，30例）和宮頸癌組（C組，32例）3組。A組中有CINⅠ8例，同時(shí)收集因良性病變行子宮切除的正常宮頸組織22例。B組中有CINⅡ～Ⅲ24例、原位癌6例。C組中，宮頸癌32例，包括鱗癌27例，腺癌5例。所有患者在采集標(biāo)本前未行放、化療。3組患者年齡分別為（45.73±7.56）歲、（43.97±11.56）歲和（48.56±11.98）歲，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=1.491，P=0.231）。

1.2 方法采用免疫組化SP法，將因良性病變行子宮切除術(shù)的正常宮頸組織標(biāo)本作為陰性對(duì)照，3，3-二氨基聯(lián)苯胺（DAB）顯色后蘇木素復(fù)染，中性樹(shù)膠封片。用磷酸鹽緩沖溶液（PBS）代替一抗（兔抗人MEK多克隆抗體：北京中杉金橋公司，工作液濃度1∶100）作陰性對(duì)照，用已知陽(yáng)性組織切片作陽(yáng)性對(duì)照［7］。

1.3 觀察指標(biāo)在100倍光學(xué)顯微鏡下隨機(jī)抽取8個(gè)視野，每個(gè)視野觀察100個(gè)細(xì)胞，計(jì)數(shù)陽(yáng)性細(xì)胞，取平均值。將陽(yáng)性細(xì)胞按其染色數(shù)量比例和顯色強(qiáng)度分為4級(jí)：陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)為0計(jì)0分；1%～25%計(jì)1分；26%～50%計(jì)2分；51%～75%計(jì)3分；76%以上計(jì)4分；染色強(qiáng)度按無(wú)著色計(jì)0分、淺黃色計(jì)1分、棕黃色計(jì)2分、棕褐色計(jì)3分；兩項(xiàng)計(jì)分相加，計(jì)為總分，0～3分為陰性，4～7分為陽(yáng)性。所有標(biāo)本由經(jīng)驗(yàn)豐富的高年資病理醫(yī)師診斷證實(shí)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 20.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。定性資料用率表示，采用χ2檢驗(yàn)或Fisher精確概率法。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.13 組患者M(jìn)EK的表達(dá)A、B、C組MEK表達(dá)陽(yáng)性率分別為20.0%（6/30）、56.7%（17/30）和68.8% （22/32），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=8.058，P=0.017），其中C組MEK陽(yáng)性表達(dá)率最高，高于B組和A組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2分別為4.444和15.017，P＜0.05），B組MEK陽(yáng)性表達(dá)率高于A組（χ2=8.531，P=0.003）。MEK在宮頸組織細(xì)胞質(zhì)中表達(dá)，見(jiàn)圖1。

2.2 MEK與宮頸癌臨床病理特征的關(guān)系在32例宮頸癌患者中，MEK陽(yáng)性表達(dá)率與患者年齡、病理類型、腫瘤組織分化程度、腫瘤大小及臨床分期無(wú)關(guān)（均P＞0.05），見(jiàn)表1。

表1 宮頸癌患者臨床特征與MEK表達(dá)的關(guān)系

3 討論

MEK是絲裂原活化蛋白激酶家族的重要一員，可被多種炎性因子、生長(zhǎng)因子和環(huán)境應(yīng)激反應(yīng)等激活，導(dǎo)致細(xì)胞的增殖［8-9］。MEK分為分子質(zhì)量44 ku和45 ku的MEK1和MEK2兩種類型，在腫瘤細(xì)胞生物學(xué)中，MEK是絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）信號(hào)通路中特性了解最為透徹的激酶之一［10］。本研究發(fā)現(xiàn)由正常宮頸組織到宮頸癌組織的變化過(guò)程中，MEK表達(dá)呈遞增趨勢(shì)，宮頸癌組中表達(dá)率最高，這說(shuō)明MEK參與了宮頸腫瘤的發(fā)展。原因可能是宮頸癌的發(fā)生多數(shù)伴有Ras基因突變，然后通過(guò)Ras-Raf-MEK-細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶（extracellular regulated protein kinases，ERK）信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路激活MEK，MEK使其下游底物ERK磷酸化而具有活性，將信號(hào)傳導(dǎo)至細(xì)胞核內(nèi)使細(xì)胞的增殖增強(qiáng)，從而促使宮頸細(xì)胞進(jìn)一步向?qū)m頸癌細(xì)胞發(fā)展。

有研究表明，在年齡≥50歲、臨床分期較早、病理分級(jí)高分化和腫瘤直徑＜5 cm的肝癌患者中MEK-1的表達(dá)強(qiáng)于年齡＜50歲、分期較晚、低分化、腫瘤直徑≥5 cm者［11］。但本研究對(duì)宮頸癌患者的結(jié)果表明，MEK陽(yáng)性表達(dá)與患者年齡、宮頸癌病理類型、腫瘤組織分化程度、原發(fā)腫瘤大小及宮頸癌臨床分期等因素?zé)o關(guān)，這一結(jié)果可能與本研究病例數(shù)較少有關(guān)，需增加樣本量進(jìn)一步研究。

圖1 MEK在不同宮頸組織中表達(dá)（SP法×100）

綜上，MEK可能參與了宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展，通過(guò)抑制MEK的活性使Ras-Raf-MEK-ERK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路受到阻斷，抑制MEK的磷酸化［12-13］，從而可以抑制腫瘤細(xì)胞的發(fā)展。目前已有多種MEK抑制劑投入臨床試驗(yàn)，如有突破將為宮頸癌的治療提供新的思路，為宮頸癌患者帶來(lái)希望。

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The Expression and Its Significance of Cell Signal Transduction Pathways MEK in Cervical Precancerous Lesions and Cervical Cancer

FU Min，QU Quan-xin.Department of Obstetrics and Gynecology，Tianjin Occupational Diseases Precaution and Therapeutic Hospital，Tianjin 300011，China（FU Min）；Department of Obstetrics and Gynecology，Tianjin First Center Hospital，Tianjin 300192，China（QU Quan-xin）

FU Min，E-mail:yzxfck@163.com

Objective:To explore the expressssion of mitogen-activated extracellular signal-regulated kinase（MEK）signaling pathways in cervical precancerous lesions and cervical cancer.Methods:A total of 92 patients with cervical lesions were collected between January 2013 and April 2014 in the department of gynecology of Tianjin First Central Hospital. According to the degree of cervical lesions，the patients were divided into three groups:normal group（30 cases），high level cervical intraepithelial neoplasia（CIN）group（30 cases），cervical cancer group（32 cases）.Using immunohistochemical SP method to detect the MEK expression in different tissues.Results:In normal group，high level CIN group and cervical cancer group，the positive rates of MEK were 20.0%，56.7%，68.8%respectively.MEK positive expression rate is highest in the cervical cancer group，higher than that of the high level CIN group and normal group（P＜0.05）.The difference between the normal group and the high level CIN group was the statistical significant（P=0.003）.MEK positive expression rate had no correlated with patients′age，cervical cancer pathological type，degree of tumor differentiation，tumor size and clinical stage（P＞0.05）. Conclusions:MEK pathway may play a certain role in cervical cancer and precancerous lesion development.

Uterine cervical neoplasms；Precancerous conditions；Mitogen-activated protein kinases；Signal transduction

2015-12-23）

［本文編輯 秦娟］

300011天津市職業(yè)病防治院婦產(chǎn)科（符敏）；天津市第一中心醫(yī)院婦產(chǎn)科（瞿全新）

符敏，E-mail：yzxfck@163.com