張富華鄒翠云吳詩寶汪巧云李韶山

(華南師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，廣州，510631)

一例雌性馬來穿山甲(Manis javanica)生殖系統(tǒng)大體解剖

張富華 鄒翠云 吳詩寶汪巧云 李韶山

(華南師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，廣州，510631)

馬來穿山甲；

(School of Life Sciences，South China Normal University，Guangzhou，510631，China)

馬來穿山甲(Manisjavanica)是全球現(xiàn)存的8種穿山甲之一，隸屬哺乳綱(Mammalia)、鱗甲目(Pholidota)、穿山甲科(Manidae)。馬來穿山甲主要分布在馬來西亞、新加坡、菲律賓、老撾、泰國、緬甸和印度尼西亞等國家[1-2]，中國云南部分地區(qū)也有少量分布[3]。近年來，因資源過度利用和棲息地破壞，導(dǎo)致穿山甲種群數(shù)量急劇下降，野生資源幾近枯竭。2014年，馬來穿山甲與中國穿山甲(Manispentadactyla)一起被IUCN評估為極度瀕危(CR)物種[4-5]。

生殖系統(tǒng)是動物執(zhí)行繁殖功能的結(jié)構(gòu)，動物整個繁殖過程都是在其正常結(jié)構(gòu)和生理功能的基礎(chǔ)上實現(xiàn)的[6]。研究動物的生殖系統(tǒng)形態(tài)和結(jié)構(gòu)是理解其繁殖習(xí)性特點、生理現(xiàn)象的基礎(chǔ)，也是動物分類依據(jù)之一[7]；在生產(chǎn)實踐中，掌握動物生殖系統(tǒng)結(jié)構(gòu)是改善動物的生產(chǎn)性能、發(fā)展人工繁殖技術(shù)、預(yù)防和治療動物疾病的依據(jù)。然而，由于馬來穿山甲為極度瀕危動物，研究樣本難以獲得，且不能隨意捕捉野生個體用于科學(xué)研究，導(dǎo)致至今人們對其生殖系統(tǒng)了解不多，僅見有人對4例懷孕及1例產(chǎn)仔不久的雌性馬來穿山甲卵巢進行了報道[8]，缺乏對完整生殖系統(tǒng)的形態(tài)結(jié)構(gòu)描述及詳細的數(shù)據(jù)測量。

本文通過對圈養(yǎng)死亡的1例雌性馬來穿山甲生殖系統(tǒng)大體解剖，描述了其生殖系統(tǒng)形態(tài)特征，并對各部分結(jié)構(gòu)進行了測量，使我們對非懷孕狀態(tài)下的馬來穿山甲雌性生殖系統(tǒng)的整體形態(tài)結(jié)構(gòu)特點有了全面了解。本研究豐富了馬來穿山甲繁殖生物學(xué)基礎(chǔ)資料，為研究該物種生殖生理學(xué)打下了基礎(chǔ)，對于促進圈養(yǎng)馬來穿山甲的繁殖管理、發(fā)展人工繁殖技術(shù)以及防治生殖系統(tǒng)疾病具有指導(dǎo)作用。

1 材料與方法

1.1 研究樣本

為華南師范大學(xué)人工救護與保育研究基地(PRB-SCNU)圈養(yǎng)死亡的1例雌性馬來穿山甲DY7。DY7于2013年9月16日被引入到PRB-SCNU，體重為1.91 kg，根據(jù)楊立等對馬來穿山甲年齡組的劃分標準，引入時此個體應(yīng)為亞成體[9]。圈養(yǎng)一段時間后，DY7因病于2014年1月5日死亡，死亡時相關(guān)指標測量結(jié)果如表1。

表1 DY7死亡時形態(tài)指標測量

Tab.1 The measurements of morphological index for Sunda pangolin DY7 died on January 5，2014

1.2 方法

對DY7生殖系統(tǒng)進行大體解剖，觀察描述其生殖系統(tǒng)各部分的形態(tài)結(jié)構(gòu)特點，并通過游標卡尺(0.002 cm)和電子稱(精確度為0.01 g)對生殖系統(tǒng)各部分的結(jié)構(gòu)進行測量或稱量。

2 結(jié)果

2.1 組成與位置

DY7生殖系統(tǒng)由卵巢、輸卵管、子宮、陰道、尿生殖前庭、陰唇和陰蒂組成。卵巢、輸卵管、子宮和陰道組成內(nèi)生殖器官，位于腹腔和盆腔內(nèi)，腎臟后方，由韌帶附著固定，背側(cè)為直腸，腹側(cè)為膀胱。尿生殖前庭、陰唇和陰蒂組成外生殖器官，尿生殖前庭位于盆腔內(nèi)，陰唇和陰蒂位于身體后端。

2.2 內(nèi)生殖器官

2.2.1 卵巢

DY7有一對卵巢，由卵巢系膜和輸卵管系膜等吊在腎臟后下方。卵巢呈粉紅色或淺黃色，卵圓形或腎形(圖1)，卵巢表面存在多個大小不同的卵泡(圖1 A)。卵巢形態(tài)測量結(jié)果見表2。

2.2.2 輸卵管

DY7輸卵管彎曲似小腸，盤旋于卵巢旁(圖1B)，是卵子進入子宮的通道。輸卵管前端緊靠卵巢，擴大為漏斗狀稱為喇叭口，面積約為1 cm2。喇叭口邊緣形似花邊，為輸卵管傘，附著在卵巢外側(cè)(圖1)，用于收集排出的卵子。喇叭口后端的輸卵管膨大，為輸卵管壺腹，是精子和卵子受精的部位。壺腹部之后的輸卵管變細，為峽部，峽部末端與子宮角相連。DY7輸卵管測量結(jié)果見表3。

圖1 DY7生殖系統(tǒng)外部形態(tài)(A：背面觀，B：腹面觀)Fig.1 The external morphology of the female reproductive system for Sunda pangolin DY7(A：dorsal view；B：ventral view) 注：1.卵巢；2.輸卵管傘；3.輸卵管；4.子宮角；5.子宮體；6.膀胱；7.子宮頸；8.陰道；9.尿生殖前庭；10.卵泡；11.角間溝；12.肛腺；13.陰唇；14.陰門；15.陰蒂；16.陰門下凹陷 Note：1.ovary；2.fimbria tubea；3.oviduct；4.uterine horns；5.uterine body；6.bladder；7.cervix；8.vagina；9.urogenital vestibule；10.follicle；11.groove between the uterine horns；12.anal gland；13.labium pudenda；14.valva；15.clitoridis；16.sunken under the valva

表2 DY7卵巢形態(tài)測量

Tab.2 The measurements of ovaries for Sunda pangolin DY7

2.2.3 子宮

DY7子宮位于腹腔內(nèi)，背側(cè)為直腸，腹側(cè)為膀胱，前連輸卵管，后接陰道(圖1)，借助子宮韌帶固定于腹腔。子宮分為子宮頸、子宮體和子宮角三部分(圖2)，子宮內(nèi)有縱隔，為雙間子宮(圖3)。

表3 DY7輸卵管測量結(jié)果

Tab.3 The measurements of the oviduct for Sunda pangolin DY7

圖2 DY7雌性生殖系統(tǒng)(示子宮頸、陰道和尿生殖前庭)Fig.2 The female reproductive system of Sunda pangolin DY7(Show：cervix，vagina，urogenital vestibule) 注：1.卵巢；2.輸卵管；3.子宮角；4.子宮體；5.子宮頸； 6.子宮頸外口；7.陰道；8.尿道外口；9.尿生殖前庭 Note：1.ovary；2.oviduct；3.uterine horns；4.uterine body；5.cervix；6.external cervical orifice；7.vagina；8.external urethra orifice；9.urogenital vestibule

子宮角形似小腸，呈羊角狀，各由前端自腹側(cè)彎向骨盆腔方向，形成一個大彎后，再繼續(xù)彎曲，并向外側(cè)旋轉(zhuǎn)，形成一個小彎；子宮角大彎游離，小彎由子宮闊韌帶附著。與兩子宮角基部縱隔相對應(yīng)的外部有一縱溝，稱為角間溝(圖2)。左子宮角長5.472 cm，右子宮角長5.226 cm。子宮角黏膜有多條縱行皺襞。與其他哺乳動物不同，在穿山甲DY7子宮黏膜上未見子宮阜。

子宮體呈扁圓形，較短，僅0.470 cm。子宮黏膜與子宮角黏膜一樣，有許多縱行皺襞。

子宮體與陰道的連接部為子宮頸，子宮頸長為0.528 cm，外表平滑，末端稍細，基部略粗(0.628 cm)，近似乳頭狀(圖2)。子宮頸外口突出于陰道，呈橫裂狀(0.492 cm)；子宮頸壁厚而硬，中間形成的一條扁平的腔隙，子宮頸黏膜形成多條輻射狀縱行的褶皺(圖3)。

圖3 DY7雌性生殖系統(tǒng)(A：示子宮、陰道尿生殖 前庭內(nèi)壁形態(tài)；B：示子宮角縱膈)Fig.3 The female reproductive system of Sunda pangolin DY7 (Picture A：show the inner lining of the uterus and urogenital vestibule;Picture B：show the mediastinum between uterine horns) 注：1.左卵巢；2.右卵巢；3.卵泡；4.子宮角內(nèi)壁；5.子宮角縱膈；6.子宮體內(nèi)壁；7.膀胱；8.陰道穹窿；9.陰道內(nèi)大腺開口；10.前庭大腺開口；11.陰瓣；12.陰唇；13.陰蒂 Note：1.left ovary；2.right ovary；3.follicle；4.the inner lining of the uterine horns；5.the mediastinum between uterine horns；6.the inner lining of the uterine body；7.bladder；8.vaginal cuff；9.the opening of the big gland in the vagina；10.the opening of the big gland in the urogenital vestibule；11.hymen；12.labium pudenda；13.clitoridis

2.2.4 陰道

DY7陰道位于骨盆腔，背側(cè)為直腸，腹側(cè)為膀胱和尿道。陰道前接子宮，以子宮頸為界，后連尿生殖前庭，長1.990 cm。陰道呈略扁的管腔，陰道壁與尿生殖前庭相比略薄，內(nèi)有多條縱行褶皺。陰道背側(cè)有一個大分泌腺，開口于陰道左側(cè)中部位置(圖3A)。陰道連接子宮處，有宮頸外口向陰道內(nèi)突出，形成一環(huán)形隱窩，稱為陰道穹隆或子宮頸陰道部(圖3A)。交配時，陰道穹隆可暫時儲存精子，并不斷將這些精子向子宮頸內(nèi)供應(yīng)。陰道既是穿山甲的交配器官，又是分娩時的產(chǎn)道。

2.3 外生殖器官

2.3.1 尿生殖前庭

DY7尿生殖前庭前接陰道，后接陰門裂。尿生殖前庭長為1.720 cm，尿生殖前庭壁相對陰道壁較厚，內(nèi)有許多縱行褶皺，與陰道交界處有一個明顯的橫向隆起褶，為陰瓣(圖3A)，后為尿道外口(圖2)。尿道外口兩側(cè)未見有前庭小腺，但尿生殖前庭背側(cè)有前庭大腺，開口于尿道外口背側(cè)(圖3A)。穿山甲的尿生殖前庭為雌性排尿、產(chǎn)道和交配器官。

2.3.2 陰唇

陰唇構(gòu)成陰門的側(cè)壁，為尿生殖道的外口，位于肛門下方。兩陰唇圍繞中間形成陰門，陰門呈橫裂狀(圖1A)，在陰門上端愈合較好，而在陰門下端正中間愈合處形成一個缺刻，缺刻下面緊連陰蒂(圖1A，圖3A)。

2.3.3 陰蒂

陰蒂位于陰門下方的凹陷內(nèi)(圖1A，圖3A)，由海綿體構(gòu)成，具有豐富的感覺神經(jīng)末梢，為退化了的陰莖。圈養(yǎng)觀察表明，剛剛交配過的馬來穿山甲陰蒂明顯腫脹外凸。

3 討論

動物機體的生命活動與其形態(tài)結(jié)構(gòu)有著密切的聯(lián)系，研究生物機體的生命活動離不開與其相應(yīng)的結(jié)構(gòu)研究，動物形態(tài)學(xué)特征是推斷或分析動物機體生理功能的依據(jù)之一[10]。在哺乳動物中，卵巢形態(tài)甚至大小等隨母獸所處的生理階段而異[6，11]。解剖發(fā)現(xiàn)DY7卵巢表面比較光滑，未見成熟卵泡和黃體，因馬來穿山甲無明顯繁殖季節(jié)，全年均可繁殖，且不足2 kg的個體已經(jīng)達到性成熟[12]，暗示DY7在死前處于發(fā)情前期。在非懷孕哺乳動物卵巢上發(fā)現(xiàn)紅體或黃體，表明此個體處于發(fā)情后期或間情期，前不久剛剛排卵，對于某個物種而言，此時很可能是其發(fā)情交配季節(jié)。積累不同季節(jié)同種動物的卵巢形態(tài)資料，對于了解本物種的繁殖習(xí)性具有重要意義。

一般情況下，多胎性動物卵巢上同時可見多個成熟卵泡、紅體或黃體[13]，而單胎動物一般僅有1～2個成熟卵泡，但通常一次僅排1個卵[6]。紅體或黃體均是由成熟卵泡排卵后形成的。在曾經(jīng)解剖的懷孕馬來穿山甲卵巢上，我們僅見1個發(fā)育相對最為成熟的卵泡或1個三角形的暗紅色的血塊，即紅體或黃體，這也表明馬來穿山甲一次僅排1個卵，解釋了馬來穿山甲每胎僅產(chǎn)1仔的原因。然而，有人在多例馬來穿山甲的左右2個卵巢上發(fā)現(xiàn)同時存在1個黃體的現(xiàn)象，卻在子宮中僅見1個發(fā)育中的胎兒[8]，我們還不能解釋這種現(xiàn)象。由于目前樣本較少，有關(guān)馬來穿山甲胎仔數(shù)與卵巢上黃體數(shù)目的關(guān)系仍需揭示。

動物子宮角長度與多胎性成正相關(guān)，豬、犬、貓、兔等多胎動物的子宮角特別長，豬的子宮角長度超過其體長的1/3[6，14-15]。DY7子宮角長度為5.2～5.5 cm，僅占其體長的13.68%～14.47%，這可能解釋了馬來穿山甲每次僅產(chǎn)1胎的原因。

哺乳動物的子宮主要分為雙子宮、雙間子宮、雙角子宮和單子宮4種類型，雙間子宮與雙角子宮的區(qū)別在于前者兩子宮角之間有隔膜，而后者沒有[7]。DY7兩子宮角之間存在明顯的隔膜(圖3B)，與Kimura等觀察到的馬來穿山甲子宮結(jié)構(gòu)相同[8]，并在縱隔相對應(yīng)的外側(cè)發(fā)現(xiàn)了角間溝(圖1)，這表明馬來穿山甲子宮屬雙間子宮，而不是在這之前一直報道的雙角子宮[8，16]。近年來，分子生物學(xué)證據(jù)表明，穿山甲所在的鱗甲目與食肉目(Carnivora)具有較近的親緣關(guān)系[17-18]，而食肉目的子宮也屬雙間子宮[6]，這可能是形態(tài)學(xué)上證明鱗甲目與食肉目具有較近親緣關(guān)系的一個證據(jù)。

了解動物生殖系統(tǒng)結(jié)構(gòu)是研究動物繁殖生理，解釋繁殖活動規(guī)律的基礎(chǔ)[6]。對于繁殖生物學(xué)了解極少的馬來穿山甲而言，進行雌性生殖系統(tǒng)解剖，觀察記錄死亡的雌性個體的是否懷孕、胎兒發(fā)育狀況、卵巢的形態(tài)、卵泡或黃體的發(fā)育程度等，通過大量資料的積累，可以從側(cè)面了解本物種的某些繁殖特點；另外掌握雌性生殖系統(tǒng)結(jié)構(gòu)，對于在生產(chǎn)實踐中馬來穿山甲生殖系統(tǒng)疾病的防治、人工助產(chǎn)等具有重要的意義。馬來穿山甲屬于極度瀕危動物，研究樣本獲得困難，本研究中測得的一些參數(shù)僅有1個案例，也未對組織結(jié)構(gòu)進行研究，今后仍需積累馬來穿山甲雌性生殖系統(tǒng)形態(tài)學(xué)資料，并在此基礎(chǔ)上對顯微和超微結(jié)構(gòu)進行深入研究，以更為全面、準確掌握本物種雌性生殖系統(tǒng)的特點，為研究本物種的生殖生理學(xué)奠定基礎(chǔ)。

致謝：感謝廣東省野生動植物保護辦、廣東省野生動物救護中心為本項研究提供的實驗動物。

[1] Gaubert P，Antunes A.Assessing the taxonomic status of the Palawan pangolinManisculionensis(Pholidota)using discrete morphological characters[J].Journal of Mammalogy，2005，86(6)：1068-1074.

[2] Challender D W S，Thai N V，Jones M，et al.Time-Budgets and activity patterns of captive Sunda pangolins(Manisjavanica)[J].Zoo Biology，2012，31(2)：206-218.

[3] 吳詩寶，王應(yīng)祥，馮慶.中國獸類一新紀錄——爪哇穿山甲[J].動物分類學(xué)報，2005，30(2)：440-443.

[4] Challender D，Baillie J，Ades G，et al.Manispentadactyla[DB/OL]//The IUCN Red List of Threatened Species.Version 2014.3.(2013-06-26).www.iucnredlist.org/details/12764/0.

[5] Challender D，Nguyen Van T，Shepherd C，et al.Manisjavanica[DB/OL]//The IUCN Red List of Threatened Species.Version 2014.3.(2013-06-23).www.iucnredlist.org/details/12763/0.

[6] 楊利國.動物繁殖學(xué)[M].2版.北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2010.

[7] 劉凌云，鄭光美.普通動物學(xué)[M].3版.北京：高等教育出版社，1997.

[8] Kimura J，Liumsiricharoen M，Chantakru S，et al.Anatomical characteristics of the female reproductive organs in the Malayan pangolin[C].Proceedings of AZWMP，2006：44.

[9] 楊立，蘇超，張富華，等.馬來穿山甲的年齡結(jié)構(gòu)及寄生物[J].經(jīng)濟動物學(xué)報，2010，14(1)：22-25.

[10] 楊秀平，肖向紅.動物生理學(xué)[M].2版.北京：高等教育出版社，2009.

[11] 劉玉堂，應(yīng)璐，徐艷春，等.東北虎雌性生殖系統(tǒng)解剖[J].經(jīng)濟動物學(xué)報，2001，5(3)：40-43.

[12] Zhang Fuhua，Wu Shibao，Yang Li，et al.Reproductive parameters of the Sunda pangolin，Manisjavanica[J].Folia Zoologica，2015，64(2)：129-135.

[13] 鄧凱偉，王鋒，王志剛，等.豬超數(shù)排卵影響因素的研究[J].黑龍江畜牧獸醫(yī)：科技版，2011(7)：39-41.

[14] 秦鵬春，楊慶章，張心田，等.東北民豬發(fā)情排卵期生殖器官的形態(tài)學(xué)研究[J].東北農(nóng)學(xué)院學(xué)報，1981(3)：59-68.

[15] 王鋒.動物繁殖學(xué)[M].北京：中國農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社，2012.

[16] Wilson A E.Husbandry of pangolinsManisspp[J].International Zoo Yearbook，1994，33(1)：248-251.

[17] Zhou Xuming，Xu Shixia，Xu Junxiao，et al.Phylogenomic analysis resolves the interordinal relationship and rapid diversification of the Laurasiatherian mammals[J].Systematic Biology，2012，61(1)：150-164.

[18] Madsen O，Scally M，Douady C J，et al.Parallel adaptive radiations in two major clades of placental mammals[J].Nature，2001，409(6820)：610-614.

Manisjavanica；

Gross Anatomy on the Female Reproductive System ina Sunda Pangolin(Manis javanica)

Zhang Fuhua Zou Cuiyun Wu Shibao*Wang Qiaoyun Li Shaoshan

Sunda pangolin(Manisjavanica)is a critically endangered species and the structure of its reproductive system is largely unknown.We studied the female reproductive system of Sunda pangolin by dissecting a pangolin that died in captivity at the Pangolin Research Base for Artificial Rescue and Conservation Breeding of South China Normal University.The reproductive system of Sunda pangolin DY7 consisted of ovary，fallopian tube，uterus，vagina，urogenital vestibule，labia，and clitoris.The uterus was bipartite，in contrast to earlier reports that it is bicornuate.Both ovaries weighed 0.30 g.The long-diameters of the left and right ovary were 1.080 cm and 1.026 cm，respectively，and the short-diameters were 0.860 cm and 0.800 cm，respectively.The length of left and right fallopian tubes were 3.150 cm and 2.930 cm，the left and right uterine horns were 5.472 cm and 5.226 cm.The lengths of the corpus uteri and cervix uterus were 0.470 cm and 0.582 cm.The vagina and urogenital vestibule were 1.990 cm and 1.720 cm，respectively.

稿件運行過程

2016-04-20

修回日期：2016-06-07

發(fā)表日期：2016-11-10

圈養(yǎng)；

繁殖習(xí)性；

繁殖生物學(xué)

Captive；

Reproductive habits；

Reproductive biology

Q954

A

2310-1490(2016)04-325-05

馬來穿山甲(Manisjavanica)是一種特殊的極度瀕危動物，但其生殖系統(tǒng)結(jié)構(gòu)一直未被描述。本文通過對在華南師范大學(xué)穿山甲人工救護與保育研究基地死亡的雌性馬來穿山甲DY7進行大體解剖，對其生殖系統(tǒng)形態(tài)結(jié)構(gòu)進行了描述。DY7生殖系統(tǒng)由卵巢、輸卵管、子宮、陰道、尿生殖前庭、陰唇和陰蒂組成。子宮類型為雙間子宮，糾正了以前其為雙角子宮的說法。DY7左右兩卵巢重均為0.30 g，長徑分別為1.080 cm和1.026 cm，短徑分別為0.860 cm和0.800 cm；左右輸卵管長分別為3.150 cm和2.930 cm；左右子宮角長分別為5.472 cm和5.226 cm，子宮體和子宮頸長分別為0.470 cm和0.582 cm；陰道和尿生殖前庭長分別為1.990 cm和1.720 cm。本文對于了解馬來穿山甲的繁殖習(xí)性、提高圈養(yǎng)馬來穿山甲繁殖管理水平、發(fā)展人工繁殖技術(shù)具有重要意義。

國家自然科學(xué)基金(31572286)；廣東省社會發(fā)展重大科技專項(2011A030100012)；廣東省自然科學(xué)基金(S2013010013356)

張富華，男，32歲，博士后研究人員；主要從事野生動物資源保護與可持續(xù)利用研究。

*通訊作者：吳詩寶，E-mail：wushibao@163.com